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原发性膀胱移行细胞癌P16基因缺失研究

Serrano等 1993年发现一 16kU的蛋白 ,命名为P16蛋白 ,具有抑制细胞周期蛋白依赖激酶 4(CDK4 )的活性 ,其编码基因定位于第 9号染色体短臂不足 4kb的范围内 (9p2 1~ 2 2区域 ) [1] 。分子生物学研究显示在多种类型肿瘤组织中存在该区域缺失或突变[2 ] ,提示P16基因与肿瘤的发生、发展有关。为探讨P16基因在膀胱移行细胞癌 (TCC)中的改变 ,笔者采用PCR和免疫组化方法对人原发性膀胱移行细胞癌标本P16基因缺失和P16蛋白的表达进行了研究。1 材料与方法1.1 标本来源  38例病理学检查证实的原发性膀胱癌TCCs和 9例正常膀胱粘膜标本由近两年武汉大学中南医院泌尿外科手术获取。 - 70℃冰箱速冻保存 ,以供提取DNA。1.2 DNA提取及PCR方法建立 组织DNA提取依常规方法进行。正常膀胱粘膜DNA作对照 ,3 磷酸甘油醛脱氢酶 (GAPDH)基因作内对照 ,扩增P16基因...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中华实验外科杂志》2001年01期
中华实验外科杂志

原发性膀胱移行细胞癌p16基因缺失突变的研究

为探讨p16基因在膀胱移行细胞癌(TCC)中的改变,我们采用多聚酶链(PCR)和多聚酶链单链构象多态性(PCRSSCP)方法对人原发性膀胱移行细胞癌标本p16基因缺失和突变进行了研究。材料与方法1.标本来源:38例经病理检查证实的原发性膀胱TCCs和9例正常膀胱粘膜标本获于武汉大学中南医院泌尿外科手术。标本于-70℃冰箱速冻保存,以供提取DNA。2.DNA提取及PCR方法建立:组织DNA提取依常规方法进行。正常膀胱粘膜DNA作对照,3磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因作内对照(表1),扩增p16基因2个外元,即外元1和外元2。引物设计见表1。反应体系50μl,模板DNA0.2μg,MgCl21.5mmol/L,KCl50mmol/L,Tris·Cl10mmol/L,dNTP0.2mmol/L,每对引物各20pmol/L,混匀后液体石蜡覆盖在2400型基因扩增仪(GeneAmpPCRsystem2400,美国PerkinElmer...  (本文共2页) 阅读全文>>

《重庆医学》2000年01期
重庆医学

原发性膀胱移行细胞癌中P16基因缺失与突变及临床意义

原癌基因的激活和抑癌基因的失活,是近年来肿瘤分子生物学研究的热点,尤其是抑癌基因在参与细胞周期调控,维护细胞正常增殖方面起重要作用而倍受重视。因其突变、缺失可引起抑癌基因失活,致细胞周围调节失控,从而导致细胞异常增殖而癌变。继po3和Rb基因之后,lop年发现P16基困亦为一个直接参与细胞周期调控的一种抑癌基因,因它与多种人类肿瘤的发生、发展有关而受到高度重视。为研究P16基因在膀脱移行细胞癌发生发展中的临床意义,本研究采用银染peR-SSCP检测了40例中国人膀眈移行细胞癌及40例相应癌旁组织标本中P16基因外显子1、外显子2的缺失及突变情况,以探讨P16基因缺失及突变与膀既移行细胞癌的恶性程度、临床分期的关系。1.材料和方法1.1材料1.1.回标本:收集我院泌尿外科1997-1998年手术切除标本,经病理检查证实为膀跳移行细胞癌者40例,其中男性兆例,女性12例;年龄引一769岁,平均619岁;术后立即从癌块和癌旁组织中分别...  (本文共3页) 阅读全文>>

《重庆医科大学学报》2001年03期
重庆医科大学学报

原发性膀胱移行细胞癌中p16基因状态的研究

p16基因,也称MTS1/CDKN2/p16INK4,定位于人染色体9P21区,基因编码蛋白为p16,作为CDK4与CDK6的抑制因子,在细胞周期调控中起负性调节作用,防止细胞过度增殖。实验证实p16基因在许多肿瘤细胞株和原发肿瘤组织中有缺失和点突变[1~3]。近来研究发现许多肿瘤中p16基因5’CpG岛(富含G、C的区域)常表现高度甲基化并伴随基因失活[4~6]。甲基化作为p16基因的另一失活方式已引起重视,有关原发性膀胱移行细胞癌(Transitional Cell Carcinoma of Bladder,TCCB)中p16基因的状态的报道较少见,本文对40例TCCB标本及其癌旁组织中p16基因外显子1和外显子2的缺失、突变及甲基化情况进行了检测,现报告如下。1 材料与方法1.1 标本来源 本院泌尿外科手术切除标本40例,其中男性28例,女性12例,年龄31~77岁,平均62岁。40例标本均经病理证实为TCCB者,癌旁正常...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中华医学杂志》2001年20期
中华医学杂志

原发性膀胱移行细胞癌p15及p16基因缺失的研究

在人类多种类型的肿瘤中频繁出现染色体 9p2 1- 2 2区域改变[1] ,这提示该区的改变可能与肿瘤的发生、发展有关。p15、p16基因位于该区 ,为阐明其在原发性膀胱移行细胞癌(TCC)中的作用 ,作者对其在膀胱TCC中的缺失改变进行了研究。一、材料与方法1 标本来源 :38例病理检查证实的原发性膀胱TCC和9例正常膀胱粘膜标本由近两年武汉大学中南医院泌尿外科手术获取。 - 70℃冰箱速冻保存 ,以供提取DNA。2 DNA提取及聚合酶链反应 (PCR)方法建立 :组织DNA提取依常规方法进行。正常膀胱粘膜DNA作对照 ,3磷酸甘油醛脱氢酶 (GAPDH)基因作内对照 ,扩增p15、p16基因 2个外元 ,即外元1和外元2 。引物设计 :p15E1:5′CGGAGCA GCGTGGGAAAG3′,5′CTGGATCGCGCGCCTCCC3′;p15E2 :5′GCTCCACCTGCCTTGCCCCG3′,5′ATTAGGTG...  (本文共1页) 阅读全文>>

《解放军医学杂志》2001年06期
解放军医学杂志

金属蛋白酶及其抑制剂与膀胱移行细胞癌浸润转移的关系

基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )是一种锌离子依赖性蛋白水解酶 ,其主要作用底物是基底膜的Ⅳ型胶原和层粘连蛋白。组织金属蛋白酶抑制剂 2(TIMP 2 )能特异的同MMP 2及其前体结合并抑制其活性[1] 。本研究应用RT PCR和免疫组织化学方法检测人膀胱移行细胞癌及癌旁组织MMP 2和TIMP 2的mRNA及蛋白表达水平 ,以探讨其在膀胱移行细胞癌侵袭和转移过程中的意义。1 材料与方法1 1 材料随机选取兰州军区兰州总医院保存的膀胱移行细胞癌组织标本 61例 ,其中 2 3例带有癌旁组织。男性 54例 ,女性 7例 ,患者年龄 17~ 82岁 ,平均 59.3岁。1 2 方法1 2 1 MMP 2及TIMP 2mRNA表达水平测定 所有标本采用一步法[2 ] 提取组织总RNA。RT PCR反应混合物为 30 μl体系 ,包括RT PCR酶混合物 2 .0 μl (华美生物工程公司 )、引物 30 pmol及相应缓冲液...  (本文共3页) 阅读全文>>

《实用肿瘤杂志》2001年03期
实用肿瘤杂志

膀胱移行细胞癌p21WAF1/CIP1 mRNA及蛋白的表达

近年来发现细胞周期调控基因 p2 1 WAF1 /CIP1与肿瘤的发生、发展密切相关 ,在肿瘤分子生物学中的地位令人瞩目 ,但它的表达在不同类型肿瘤中的作用尚未明了。本研究同时采用原位杂交及免疫组织化学技术探讨 p2 1 WAF1 /CIP1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。1 材料与方法1 .1 研究对象 选取江西医学院第二附属医院1 998年 1月~ 1 999年 1 2月手术切除并经病理证实的膀胱移行细胞癌标本 56例。其中男性 42例 ,女性1 4例 ,年龄 36~ 76岁 ,中位年龄 56.3岁。病理分级按照 WHO标准 : 级 9例 , 级 2 1例 , 级 2 6例。浅表性肿瘤 ( Tis~T1) 1 7例 ,浸润性肿瘤 ( T2 ~ T4 ) 39例。同时选取 1 0例正常的膀胱黏膜组织作对照。所有用于原位杂交和免疫组化的病理标本均经统一的方法处理 :4%甲醛溶液固定 4~ 6小时 ,梯度乙醇脱水 ,石蜡切片包...  (本文共3页) 阅读全文>>