分享到:

免疫胶体金技术及其应用

免疫胶体金技术是继三大标记技术后对免疫标记技术的又一大贡献,近年来发  (本文共2页) 阅读全文>>

东南大学
东南大学

NGAL噬菌体单链抗体的筛选、表达及其在免疫胶体金检测方法中的初步应用

人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)与炎症、胚胎发育、免疫应答、趋化作用、信号转导以及多种肿瘤的发生与发展等过程密切相关,是新的早期肾损伤生化标志物。本研究旨在应用噬菌体展示技术筛选NGAL特异性抗体,并建立免疫胶体金检测技术,为体内NGAL变化水平的检测提供方法,为急性肾损伤的诊断提供帮助。本论文采用免疫的Balb/C小鼠,从其脾脏中提取总RNA,以反转录的cDNA为模板,通过设计的简并引物来扩增轻链可变区(VL)和重链可变区(VH),经过重叠延伸PCR方法连接为单链抗体基因(scFv)。经sfiI、Xbal双酶切后连接到噬菌体载体pCantab5E中,转化大肠杆菌TGl成功构建了库容为5×107pfu的鼠源噬菌体抗体库。经过PCR检测,抗体库的插入率为85%。随机挑取部分单克隆测序分析发现抗体重链和轻链可变区序列均不相同,说明了...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国畜牧兽医文摘》2016年04期
中国畜牧兽医文摘

免疫胶体金技术及其在兽医临床上的应用探讨

免疫胶体金技术起源于20世纪80年代,是一种新式免疫标记技术,凭借成本...  (本文共1页) 阅读全文>>

四川农业大学
四川农业大学

猪繁殖与呼吸综合征抗体免疫胶体金快速诊断试纸的研制

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的一种繁殖障碍与呼吸系统传染病。猪是此病的唯一天然宿主。该病以接触性、高度传染性、高发病率,慢性和高死亡率为特征。病猪生长十分缓慢,甚至停滞生长,严重影响养猪业的经济效益,因此对该病及时作出诊断有利于降低经济损失。本研究针对目前PRRS诊断耗时长的问题,运用胶体金免疫层析技术建立PRRS抗体快速诊断方法。本研究以PRRSV POP3毒株为试验材料,结合使用中性盐沉淀法和凝胶层析法获得其结构蛋白,经SDS-PAGE电泳检测显示含六条蛋白条带,分子量分别为:68.1KD、55.2KD、38.9KD、37.6KD、35.1KD、33.9KD,其中55.2KD.38.9KD.37.6KD、35.1KD、33.9KD为PRRSV蛋白。用纯化的PRRSV POP3株病毒蛋白制备铝胶疫苗免疫2kg左右成年健康家兔,获得的兔抗PRRSV高免血清与纯化的PRRSV PO...  (本文共41页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
广西大学

弓形虫病免疫胶体金诊断试纸条的研制

弓形虫(T.gondii)病是一种呈世界性分布的人畜共患病,人群感染普遍,对孕妇和免疫力低下者,危害很大;200多种动物都能感染该病,多数呈隐性感染,但猪暴发感染弓形虫后,可引起大批死亡。弓形虫病严重威胁着人类的健康,同时也给畜牧业造成了很大的损失。目前,临床上诊断弓形虫病,依赖于血清学诊断,主要包括间接血凝试验、间接荧光抗体试验、染色试验和酶联免疫吸附试验,但这些免疫检测技术费时、费力,还需要特殊仪器设备辅助,不适合大面积推广应用。胶体金技术是一种新型快速诊断技术,已经在弓形虫病的诊断上得到使用,临床检测时操作简便、快速,无需相关专业的技术人员和贵重的仪器设备,适合于基层大面积检测、普查等,从而得到了快速发展。临床上诊断弓形虫病时经常检测血清中的抗体,但是抗体可以在体内长期存在,不能区分现症感染或既往感染,而弓形虫循环抗原存在于急性感染弓形虫病的血清中,适合急性病的诊断。本研究利用胶体金标记技术,运用免疫学方法,根据层析原理,...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

湖羊早期妊娠诊断免疫胶体金层析试纸条的初步研制

在妊娠早期,母畜外周血浆中的孕酮含量远远高于发情期,所以可以通过测定血液中的孕酮含量来进行早期妊娠诊断。传统的测定方法主要有放射免疫测定法(RIA),酶免疫测定法(EIA)和乳胶凝集测定试验(LAIT),但是由于操作比较复杂,所以并未得到广泛的应用。胶体金免疫层析技术是20世纪90年代在免疫渗滤技术基础上建立的一种简易快速的免疫检测技术,其检测结果通过肉眼即可判断。这种技术具有操作简便,操作时间短等优点,已经广泛地应用于食品安全和激素的检测。本试验采用胶体金免疫层析技术,根据试验确立的湖羊妊娠孕酮临界值,应用竞争法研制出一种胶体金免疫层析试纸条;通过对配种后21d左右湖羊血液中的孕酮进行半定量测定,进行早期妊娠诊断,具有很好的应用价值。试验的主要内容包括以下3个部分:1.对85头配种后21 d左右未出现返情的湖羊采用放射免疫测定法(RIA)测定其外周血中的孕酮含量。研究结果表明,妊娠羊的孕酮含量为2.33±0.70ng/mL,未...  (本文共70页) 本文目录 | 阅读全文>>