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外源基因在转基因抗虫油菜中的遗传行为

目前 ,应用基因工程技术改良油菜品种已取得很大进展[1] .油菜在生产过程中常受菜青虫等鳞翅目害虫的为害 .笔者运用农杆菌介导法和花粉管通道法将 Bt杀虫蛋白基因导入到当家双低油菜品种湘油 1 3号中 ,获得了转基因植株 [2 ,3 ] .但外源基因在转基因植株中常常丢失 ,为了选育出稳定的转基因抗虫油菜新品种应用于生产 ,作者对转基因植株中Bt杀虫蛋白基因的整合方式和遗传稳定性进行了研究 .1 材料和方法1 .1 材 料转 Bt杀虫蛋白基因植株及其自交后代 .1 .2 方 法1 .2 .1 卡那霉素筛选转基因植株后代将自交套袋收获的种子用 0 .1 % Hg Cl2 表面消毒 1 5 min,经无菌水冲洗 3次 ,置于含卡那霉素 ( 4mg/L)的 MS培养基上进行萌发 ( 2 5℃ ,光照 1 6h/d) ,3~ 4周后 ,将长出根系的绿色苗移栽到土壤中并进行检测 .1 .2 .2 PCR检测转基因植株后代采用 PCR扩增 ...  (本文共3页) 阅读全文>>

湖南农业大学
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转基因油菜的遗传稳定性与环境生态安全研究

2003年转基因作物面积达6770万公顷,其中油菜的种植面积达720万公顷,占总油菜种植面积的16%。转基因技术能够更加有效地创造新的食物,带来更少的环境污染。但是转基因技术在给人类和社会带来巨大利益的同时,有时也可能对人类健康和环境安全造成不必要的负面影响。本研究利用转基因不育系15A,转基因恢复系T742,转基因抗虫油菜T5等3个转基因油菜品系为材料对转基因油菜的遗传稳定性与环境生态安全性进行研究:1 转基因油菜的遗传稳定性利用PCR,PCR-Southern blot等分子检测技术分别对转基因油菜3个品系的第二代与第三代进行了分子检测,证明转基因油菜3个品系的目的基因都能稳定遗传;并对转基因不育系油菜15A第三代的花粉分别进行了甲烯蓝与醋酸洋红染色和形态学的观察,结果表明15A雄蕊较雌蕊短小,花粉完全不育,不育性彻底;田间观察转基因抗虫油菜T5第三代的菜青虫田间发生情况,结果显示转基因抗虫油菜T5的菜青虫发生率明显低于对照...  (本文共123页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川农业大学
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拟南芥CRY1基因C末端导入甘蓝型油菜的遗传表达及卡那霉素抗性筛选方法研究

四川农业大学油菜研究中心从2003年起,利用floral-dip转基因方法对甘蓝型油菜(B.napus L.)westar及白菜型油菜(B.campestris L.)雅安黄油菜(雅黄)进行遗传转化,获得了一批具有卡那霉素(Km)抗性的种子,本研究对这批种子进行了遗传、表达鉴定及Km抗性筛选方法的研究,主要结果如下:1.对转基因甘蓝型油菜westar后代T_2代株系,通过Km抗性鉴定,结合PCR检测及序列比对验证,对拟南芥CRY1基因C末端导入甘蓝型油菜后的遗传表现进行了分析;并利用GUS染色和花色素苷积累量的比较,对CRY1基因C末端在转基因甘蓝型油菜中的表达进行了研究。结果表明,转化的外源目的基因多数以嵌合形式,少数以单拷贝形式整合到转基因甘蓝型油菜的基因组中;目的基因能稳定地遗传给后代,株系间遗传传递率为62.5%;T_2代的遗传行为少数呈现孟德尔遗传,多数呈现非孟德尔遗传现象;拟南芥CRY1基因能在转基因油菜中表达,但也...  (本文共48页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
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转bar基因抗除草剂冬油菜及其基因流研究

本研究主要内容是利用目前应用最广泛的农杆菌介导的植物转化方法,以bar基因为目标基因,获得适合我国种植的转基因抗除草剂冬油菜品系,同时对转基因油菜与中国不同类型白菜的人工可交配性、天然异交率与生存适合度进行研究,评价转基因油菜与白菜类亚种及变种的基因流。以油菜子叶柄和下胚轴为外植体,以双低抗病冬油菜品种“中双7号”为转化受体,转化3批约500个子叶柄和600个下胚轴,获得了46株转基因油菜,其中转化阳性植株为35株,阳性率为76%,转化效率为3.2%。对抗除草剂油菜后代的不同株系进行拷贝数、表达水平与外源基因整合位置等因素的分析,选取6个包含单拷贝、双拷贝和多拷贝的家系对叶片、茎杆、花、根和种子5个组织进行表达量测定,结果表明拷贝数对表达量没有明显影响,而在不同组织中,叶片和茎中表达较高,种子和根中表达很低;同时全面考察了转基因油菜品系的生长势与生育期、产量相关性状、抗逆性、种子品质性状、种子生活力等方面的特性。经过对转基因家系...  (本文共125页) 本文目录 | 阅读全文>>

湖南农业大学
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转Bt基因甘蓝型油菜潜在入侵能力的生态适应性研究

随着全球转基因作物的大面积种植,转基因作物的生态风险评价越来越受到人们的关注,特别是转基因作物的潜在入侵能力。因为大多数转基因作物是异花授粉作物,易与亲缘关系相近的野生近缘种之间发生基因流,使得转基因逃逸到野生近缘种中,如果后代转基因能稳定遗传并具有较强竞争能力,则转基因作物有成功入侵的风险。本论文以转Bt基因甘蓝型油菜(Brassica napus L.)及其野生近缘种野芥菜(B.juncea)为材料,从转Bt基因甘蓝型油菜与野芥菜间遗传亲和性开始,研究Bt基因在杂回交后代中的遗传表达;在温室中设计不同密度,研究转Bt基因甘蓝型油菜与野芥菜在不同竞争强度条件下的适合度表现与竞争关系;在实验地中模拟转Bt基因甘蓝型油菜在野芥菜种群中入侵过程,探讨转基因甘蓝型油菜和野芥菜的适合度表现及其种群生产力变化。其主要研究结果如下:1.转Bt基因甘蓝型油菜能与野芥菜杂交和回交,并成功获得可育的杂交种与回交种;2.Bt基因在杂回交后代中能够稳...  (本文共50页) 本文目录 | 阅读全文>>

福建农林大学
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农业生物技术可持续性评价体系的研究

可持续农业是21世纪农业发展的主要模式,生物技术是农业可持续发展的重要技术支撑和保障。农业可持续发展需要什么样的生物技术来支撑,如何根据可持续发展的要求来规范和引导生物技术的发展,从而找到一个生物技术与可持续农业的有效结合点,这是本论文研究的总体思路。1.系统阐述了各类型农业生物技术的内涵、研究进展和成效。现代生物技术是一个复杂的技术群,包括基因工程、细胞工程、微生物工程、酶(蛋白质)工程等4大工程技术。对农业4大生物工程技术特别是基因工程技术的进展(以转基因作物类型为重点),作了较为全面系统的阐述,为构建评价体系奠定基础。2.根据农业生物技术的生态安全性的要求,建立了其安全性评价的指标体系,主要包括:(1)水平基因转移。评价了GMOs(转基因生物)在自然环境中水平基因转移的可能途径及其研究方法;(2)非靶标效应。阐述了转基因植物对植食性昆虫的影响、通过食物链产生的间接影响、对土壤微生物群落的影响、对水生生物的影响、对鸟类的影响...  (本文共214页) 本文目录 | 阅读全文>>