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寡核苷酸探针在法医学上的应用研究

寡核苷酸探针在法医学上的应用研究齐守文,杜立新,谭丽,申成斌(河南省高级人民法院郑州450003河南医科大学第二附属医院妇产科郑州450003河南省公安厅郑州450003)摘要采用寡核苷酸探针(CAC)_5对河南汉族50名无关个体和两个家系10名成员进行了DNA指纹检验。结果:得到了清晰可辨的寡核苷酸指纹图谱。经统计学处理,无关个体的相关机率为9.8×10~(-10)。家系调查表明,亲代与子代之间,杂交片段的遗传符合孟德尔法则。提示:寡核苷酸探针(CAC)_5在法医学个人识别和亲权鉴定中具有重要的实用价值。关键词寡核苷酸指纹;(CAC)_5探针;法医学;应用中图分类号R89在人基因组的基因间区或内含子等非编码区内,散在分布着与小卫星相似的另一类简单重复DNA(simplerepeatitiveDNA)[1],如GATA、GACA、CA、CAC等,由于这些重复单位在人基因组中出现的数目和频率不同而表现出多态性。用这些简单重复单位或...  (本文共4页) 阅读全文>>

《现代临床医学生物工程学杂志》2002年04期
现代临床医学生物工程学杂志

寡核苷酸探针芯片快速进行原肺癌P53序列分析

对 10 0种人类原肺癌的P5 3序列应用双脱氧循环测序和应用P5 3基因芯片进行测序进行比较 ,评估这两种不同的测序技术的差别 ,以确定这两种方法的准确性和局限性 .P5 3基因的变异即可用这两种技术来测得 ,也可用其中的一种技术来测得 ,已经应用特异变异的寡核苷酸杂交进行了验证 .对P5 3基因的保守区域 (外显子 5 - 9)应用...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国医学科学院学报》1988年03期
中国医学科学院学报

生物素标记寡核苷酸探针探测扩增的病理性突变基因

碱基突变可直接影响人类基因的功能,导致各种遗传病的发生。本文作者建立了用生物素标记寡核普酸探针探测扩增的病理性突变基因的方法.标记时寡核普酸的用量仅需6ng,在末端转移酶的催化下,把生物素标记的脱氧核普酸连接到寡核普酸的3’羚基末端。经分离纯化后,进行斑点杂交和Southern印迹杂交,最后用ABC系统(即:Avidin一Biotin一碱性磷酸酶复合物)酶标显示杂交信号.用两种寡核普酸探针(尹‘卜42及日气:一‘:等探针)分别与克隆化扩增的正常和突变的日一珠蛋白基因DNA杂交,结果表明:‘,P探针与生物素探针都具有高度特异性,后者的灵敏度略低。进一步将探测Hbs的两种寡核普酸19聚体(民S和队^)用”P和生物素标记,将Hbs杂合子病人白细胞DNA进行基因扩增,并以正常p一珠蛋白基因DNA作对照,与两种探针分别进行斑点杂交、两结果完全一致:Hbs杂合...  (本文共1页) 阅读全文>>

《生物化学杂志》1989年06期
生物化学杂志

生物素标记寡核苷酸探针探测扩增的病理性突变珠蛋白基因

高比放射性特异的寡核普酸探针已用于镰刀状细胞贫血[1],a一1抗胰蛋白酶缺陷症〔”,户地中海贫血〔3]及血红蛋白E〔‘〕等由碱基突变引起的遗传病的基因分析〔‘]。最近发展的引物介导的基因扩增法[61(或称polymerase Chain Reaetion,pCR)可将两端引物所限定的染色体DNA片段体外扩增10“一1沪倍,明显地降低了寡核普酸探针灵敏度的要求,使基因点突变分析大为简化「,’。我们研究了用末端转移酶催化寡核普酸3‘端标记生物素的方法,制备了特异的生物素寡核昔酸探针,并以这种探针检测了扩增后的户珠蛋白基因点突变。材料和方法 一、寡核昔酸的酶促生物案标记 四种19聚寡核普酸口T:一。2、刀全;一;2、刀息和聆皆为用DNA合成仪合成。末端转移酶(T dT)为Boehringer产品;Bio一12一dUTp为BRL产品。标记反应体系20拼L含二甲肿酸钾loommol/LPH7.1,MnCI:Zmmol/L,DTT o.lm...  (本文共5页) 阅读全文>>

《国外医学.妇产科学分册》1989年02期
国外医学.妇产科学分册

用寡核苷酸探针对α-1-胰蛋白酶缺馅进行产前诊断

在北欧约i/2,O。。~台,吞仓你天发·生“吐、扮胰蟹白酶(AA勺缺陷,’多纷个体血浆中个1峨胰蟹白酶水平芷常,为蟹百酶扣制因子〔夕扔M型纯仓子,而血娘中a·1-;抚胰蛋白酶水平低下的个体,通常具有Z等位基因,这是由子A人个基因申G替代A,这种突变是多欣链叙2位查上各氨酸脸一转变成赖氨酸,通过寡核曹酸探针杂交可检厕出这神突变。Z等位基因便AAT的变异体表沽,而这种变异体在企常情况卞歼胜并不分泌。Pl参塑Z乞呼位基因个体对阻塞性肺疾惠共有高风险,有13绍A人午缺陷个体在儿童期爱全严重祥硬化,如果PIZ艺向胞曾患严重肝疾患,那么PIZZ胎儿发生屏硬化的风险为钊%,此类象族需进行产前诊断。 作者采用胎J乙绒电细胞D封A,用M和么特异性寡核普酸探针检铡M和艺娜位基周,宜艘夯析意突变。用5,人探针(卜。七b加,Hr备菌跪片曦)一检测S,tI多态性,用a,探针(。.skb加卿Hl参毋组片段)检测A,蕊1多态性,时A人T裁因进粉限钢性片段多态...  (本文共2页) 阅读全文>>

《国外医学.遗传学分册》1989年02期
国外医学.遗传学分册

用合成寡核苷酸探针直接检测血红蛋白Freiburg

血红蛋白(Hb)F加ibuirg为不稳定血红蛋白,具有该异常血红蛋白的病人表现为轻度溶血、间歇加重,高铁血红蛋白达封总应红蛋白的20%。它的分子基础是p一珠蛋白肤链的第23位领氨酸的缺失。因此,Hb Freiburg极可能是由于泌一珠蛋白基因的相应密码丢失引起的,并推测该突变是因在减数分裂时,同源少-珠蛋白基因间不等交换造成的。 因为没有合适的内切酶,不能用特异的限制性内切酶来直接识别该突变。而DNA限制性位点的趁锁分析只有在单倍型组合有信息意义时,在两代以上才能识别带有突变基因的染色体。作者用合成的寡聚核昔酸舞针,对染色体DNA的突变进行了直接检脚和分析。 近期的研究发现,长约17~23bp的合成寡核昔酸在适宜的条件下可以进行特异杂交,当错误配对杂交的热不稳定性达到最大时,可检测出单个城基的错误配对。作者用19bp和16bp的寡核昔酸分别作为少和日F探针,其顺序分别为‘5产一TG GAT GAAGTT GGT GGT GA一3...  (本文共2页) 阅读全文>>