分享到:

淋巴组织常规石蜡切片检测T淋巴细胞的方法

T淋巴细胞在免疫病理学中具有举足轻重的作用,它分泌的淋巴因子大大影响着免疫反应的进程。因此,在组织切片上检测T细胞及其受体的分布、数量以至进行DNA序列分析等愈来愈显示出重要性〔1一3〕.然而,由于技术原因,长期以来有关研究只能在结构保存较差的冰冻切片上进行,以至形态结构难以与免疫标记的研究紧密配合.近年来,国际上在石蜡切片上检测T细胞抗原的探讨文章陆续发表〔4一7〕,国内则至今未查见常规石蜡包埋切片上检测T细胞的报道。现将我们采用改变固定液的方法获得初步成功的体会报道于下。材料与方法 一、材料 (一〕标本来源:31例新鲜胸腺组织取自本校附一院胸外科手术病人,13例新鲜扁桃组织取自本校附一院门诊手术患者。新鲜标本立即切成Zrn们。厚,分别置于后述各固定液中或液氮冷冻保存。 (二)抗体种类及来源:Leu系列单克隆抗体(McAb)。包括T细胞系试剂盒Leui、LeuZa、Leu3a、Leu4、HLA一DR以及Leu6(1:25)、L...  (本文共4页) 阅读全文>>

《第四军医大学学报》1989年04期
第四军医大学学报

常规石蜡切片免疫组织化学双标记染色

免疫组织化学多重标记技术,能同时在一张组织切片或一个细胞内证实多种抗原存在。免疫酶(辣根过氧化物酶抗辣根过氧化物酶法,简称PAP法)双标记染色,能同时定位两种不同的抗原成份,是一种简便、敏感、特异的方法。本实验用铁蛋白和cc广抗胰糜蛋白酶抗血清,S~100蛋白和o【广抗胰糜蛋白酶抗血清,分别对恶性组织细胞增生症常规石蜡切片,进行了PAP法双标记染色,得到了良好结果。 材料和方法 材料①挑选瘤细胞较多的恶性组织细胞增生症石蜡包埋组织块,制备厚度为4∥m的切片,用10%乳胶贴片,56℃烘片24 h后备用。②兔抗人肝铁蛋白抗血清,兔抗人o【。一抗胰糜蛋白酶抗血清,兔抗牛S一100蛋白抗血清(Dako,Denmark)。③羊抗兔IgG抗血清,兔PAP复合物(自制)。④胰蛋白酶(Difco,USA)。⑤3,3一二氨基联苯胺(DAB)(北京化工厂)。⑥4一氯一l一萘酚(Sigma,USA)。 染色步骤①常规脱蜡,水化,置切片于含0.3%H。...  (本文共2页) 阅读全文>>

《河南师范大学学报(自然科学版)》1989年02期
河南师范大学学报(自然科学版)

人胚组织块切前整体染色法

1引言 对一个生物学工作者来说,要了解生物内部微细结构,一是借助电子显微镜看超微结构,一是借助显微镜看显微结构。由于电子显微镜需要昂贵资金及复杂技术,不是每个单位都能购置的。而显微镜确能满足一般单位要求。显微镜技术主要包括显微组织切片技术与组织化学技术,在教学上应用最广的是前者,现着重讨论显微组织切片技术间石蜡切片的人胚组织制片。石蜡制片是观察生物体内显微结构最基本的方法,其制片程序是:材料经固定、脱水、透明后浸蜡包埋,再经切片、染色、脱蜡、脱水、透明、封固后观察。从实践中感到切片后一片片染色既费时费工又浪费药品,而改用切片前对材料整体(块)染色,切片后只要脱蜡、透明即可封藏观察。这样作既省工序且作成的切片(单片或连续切片)效果较好。2制作方法2。1材料:人胚组织如泉丸、胰脏等2.2试荆配制2。2。1 Bouin固定液:苦味酸饱和溶液75份、甲醛25份、冰醋酸5份、混合即成。2.2.2 EhrLioh酸性苏木精液:苏木紫2克,9...  (本文共3页) 阅读全文>>

《浙江肿瘤通讯》1990年01期
浙江肿瘤通讯

常规石蜡切片体会点滴

、常规石蜡切片是外检病理常规技术制作的重要手段夕制成红篮相映、鲜明艳丽、清晰可观的良好切片,仍是一个值得注意的问题。 作者现将自1931年以来,用以下方法制作常规石蜡切片的经验总结如下:·肠2,、1.取材:要求切取的组织块厚薄。.2~水洗后入1%盐酸酒精分化数秒钟;自来水。.3mm均匀、平整。通常置10%福尔马林浸洗两下,用温水加快蓝化再流水冲洗10分溶液固定过低’然后流水冲洗1。分钟。“〔,钟;光镜观察以核染色得当为止(为易控制 2.酒精脱水;75%15分钟;85%30分分化,苏木素相对过染为宜)。钟;。5%I、I、,各‘/J、时;纯酒精r、·认一:;”...  (本文共2页) 阅读全文>>

《实用肿瘤学杂志》1992年02期
实用肿瘤学杂志

用常规石蜡切片方法制做大切片的几点体会

一般常规石蜡切片由于不能观察肿瘤的完整性,侵犯深度,与周围组织的关系等,满足不了科研、教学和诊断需要,又如火棉胶等制片方法费时、费力又不经济,难于普及应用。为此,我们经过反复实验和摸索,采用常规石蜡切片方法制做相当整个成人肾脏大小的大切片。几年来共做大切片350例左右,为科研和诊断水平的提高创造了条件。现将我们在制做中的几点体会具体介绍如下: 1.取材、固定、脱水过程 取新鲜标本,对整个肿物及周围组织做完整切面,取0.6一0.scm厚,平放在混合固定液中,如有上浮的组织(肺、脂肪等),可将组织用两块同组织块大小的玻璃夹好,再用线系好放入混合固定液中(冰乙酸10%,甲醛30%,95%酒精60%)。视不同的组织固定的时间有不同,大约是4一5小时。固定后取出组织用小刀修平,再放入酒精中,不同的组织在酒精中的时间也有所不同,大致是70写酒精4一5小时,80写酒精4一5小时,90%酒精4一5小时,95%酒精4小时,100肠酒精5小时,再取...  (本文共1页) 阅读全文>>

《实用医技杂志》2014年04期
实用医技杂志

常规石蜡切片脱水方案的调整与实验

多年来,我们在常规石蜡切片中一直沿用脱水、透明、浸蜡和包埋等传统程序,环节多,历时长,尤其脱水、透明程序中广泛采用的二甲苯和丙酮等试剂,挥发性强,毒副作用大,长期使用对工作人员的有害刺激及对空气、土壤或水源等的污染不可忽视[1]。为此,近年来,我们经过反复实验研究,对常规石蜡切片脱水方案本着环保和效佳的原则,进行了较大幅度的调整与创新,取消了原设定的透明程序及所选用的二甲苯等有毒有害试剂,现报告如下。1材料与方法1.1材料:40%甲醛,4%福尔马林,无水乙醇(A),环己酮(C),正丁醇(Z),冰乙酸,95%乙醇,0.9%氯化钠注射液(自来水自制的0.9%氯化钠溶液),切片石蜡(溶点为52~58℃)。1.2方法(包括试剂的配制方法)和程序:将从大体标本上切取的组织块盛入脱水篮内进行,见表1。程序固定脱水:下午17:00~18:00取材完毕,上机至次晨8:00上班常规包埋、切片。表1常规组织脱水试剂配制方法与程序程序名称试剂及其配制...  (本文共1页) 阅读全文>>