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RhoA和肌球蛋白轻链在肝纤维化大鼠肝组织中的表达

肝纤维化是由各种病因引起慢性肝损伤的病理结果。肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)在慢性肝损伤过程中经表型转化成为肌成纤维细胞,从而具有增殖、合成大量细胞外间质(extracellularmatrix,ECM)、舒缩功能改变等细胞行为[1]。Rho/Rho激酶信号传导通路是细胞骨架肌动蛋白的重要调节分子,可促进肌动蛋白微丝骨架的聚合,引起细胞形态和功能改变[2]。本研究旨在探讨Rho/Rho激酶信号传导通路在肝纤维化形成中的变化。1材料与方法1·1动物模型建立健康雄性SD大鼠60只,清洁级,体重300~350 g,由河北医科大学实验动物中心提供。应用胆总管结扎方法建立大鼠肝纤维化模型,手术组(n=48),假手术组(n=12),分别于结扎后1、2、3和4周麻醉动物,假手术组与4周手术组同批麻醉,提取肝组织-70℃冻存,以备提取RNA和蛋白;再切取相同部分肝组织,以4%多聚甲醛固定,常规石蜡切片,用于...  (本文共4页) 阅读全文>>

《徐州医学院学报》1988年01期
徐州医学院学报

Cd~(2+)和Hg~(2+)对肌球蛋白轻链激酶活性的调节

肌球蛋白轻链激酶(MLCK),是一种钙调素(ca。Imodulin,CaM)依赖酶,催化肌球蛋白20KD轻链(Lc。。)的磷酸化,使肌动球蛋自得以激活肌球蛋白ATP酶,从而引起平滑肌的收缩活动¨’。此酶诱导的平滑肌活动在CaM调节的许多生化反应中,是为数有限的具有生理意义的过程。因此,利用这个分子模型体系研究CaM及其靶酶的生物功能,近年很受霞视。M、azzei报告Cd。’能激活牛心肌MLCK、,达到Ca。’激活的80%吨、。我们实验室观察到Pb。‘能替代Ca。‘激活鸡砂囊MLcK旧’。但为了排除Ca。’和其它二价离子的干扰,上述作者都在反应体系中加入50*tool/L EGT A'而产生EGTA缓冲体系,放所测得的离子浓度是不确切的。鉴于cd。’租Pb。’对MLCK的作用都是双相效应:低浓度时刺激酶的活性,商浓度时抑制此酶,因此弄清楚它们的Ac㈣和Ic s o,对解释它们的在体作用可能有参考价值。 体内研究表明低剂量的重金属离...  (本文共5页) 阅读全文>>

《湖南师范大学自然科学学报》2011年01期
湖南师范大学自然科学学报

鳜鱼与鲢鱼肌球蛋白轻链2启动子的克隆及其序列比较分析

不同鱼类由于所处的地理环境和食性不同,使其在肌肉相关性状等方面存在较大的差异.近年来,为了探明不同鱼类的肉质差异及其形成的原因,国内外许多学者对其进行了研究和对比.随着研究的深入,人们已经逐渐认识到这些差异是相关基因差异表达的结果[1-5].对这些基因差异表达调控机制的研究还处于起步阶段.启动子是真核生物基因表达调控的顺式作用元件,含有基因表达调控网络的重要信息,很大程度上决定了基因表达的强度以及特异性[6-8].因此,分析和认识差异表达基因的启动子结构和转录调控网络,有助于从理论上揭示基因差异表达的关键调控点,理解基因表达调控机制及其调控网络,并将其应用于鱼类转基因和育种工程等领域,对于阐明重要肉质性状形成的分子机制等生命过程具有重要意义.目前青、草、鲢、鳙、鲤和鲫鱼等常规鱼既是我国淡水养殖的主体产业,又是我国水产品市场供应的主导产品,其产量占淡水养殖总产量的70%以上.但是,与鳜鱼、黄鳝、黄颡等淡水优质鱼相比,这些常规品种在...  (本文共5页) 阅读全文>>

《广西师范大学学报(自然科学版)》2011年02期
广西师范大学学报(自然科学版)

斑鳜肌球蛋白轻链1基因cDNA的克隆及其分析

肌球蛋白是发挥肌肉收缩功能不可缺少的组成部分。它是由6条多肽链组成的六聚体,包括4条相对分子质量约为2.2×105的肌球蛋白重链(MHC)和2条相对分子质量约为1.6×104~2.0×104的肌球蛋白轻链(M LC)[1-2],其中M LC主要有3种类型:M LC 1、M LC 2和M LC 3,M LC 1和M LC 3合称碱性轻链,M LC 2称调节轻链。肌球蛋白重链和肌球蛋白轻链共同构成一个具2个球状头部和一个棒状尾部的分子,一对调节轻链分别位于头部和杆部与颈部相连处,一对碱性轻链分别位于2个头部[3]。重链和轻链的相对含量决定了肌肉的收缩性能。对鲑鳟鱼的研究证实,幼鱼较成鱼肌肉具有更快的收缩运动能力,而这种差异是由于MHC和M LC表达量不同所致[4-5]。为适应不同的生长环境,发挥不同的生理功能,M LC表达量表现出组织特异性、发育特异性。同时,鲑鳟鱼类的这类结构基因还表现出肌肉纵轴不同部位表达的差异[6]。斑鳜S i...  (本文共5页) 阅读全文>>

《广西医学》2014年10期
广西医学

肌球蛋白轻链激酶和肌球蛋白轻链9基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

肺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,5年生存率低于15%,严重危害人类的健康及生命[1]。肺癌的发生发展涉及多条信号转导通路。本课题前期采用基因富集等生物信息学方法筛选出与非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展相关的关键基因之一——肌球蛋白轻链9(MYL9)[2]。MYL9是免疫球蛋白超家族成员,主要依靠肌球蛋白轻链激酶(MYLK)对其起调控作用。目前,国内外关于MYLK、MYL9与NSCLC的相关报告比较少。因此,在前期研究基础上,本实验采用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)研究MYLK mRNA和MYL9 mRNA在NSCLC的表达情况,并探讨MYLK及MYL9基因表达与NSCLC患者的临床特征的相关情况。1资料与方法1.1临床资料选取2012年8月至2013年7月在我院胸外科经手术切除及病理证实为NSCLC患者60例,切取NSCLC组织及其癌旁组织(距肿瘤5 cm以外);另选择60例气胸、胸外伤患者,取术中切除的正常肺组织。肺癌...  (本文共3页) 阅读全文>>

《安徽大学学报(自然科学版)》2004年06期
安徽大学学报(自然科学版)

人心室肌球蛋白轻链1基因的克隆及其体外的表达与纯化

肌球蛋白是一种重要的收缩性蛋白,它是由两条重链(MHC)、两条碱性轻链(MLC1)和两条可磷酸化的调节轻链组成。在成人心肌肌球蛋白组分中,心室肌球蛋白轻链1(VLC1)是最主要的MLC1成分,另一种MLC1即心房肌球蛋白轻链1(ALC1)只在胚胎期的心脏和骨骼肌中出现,编码两者的基因具有78.4%的同源性。VLC1的基因位于第三号染色体的短臂上[1],它除了在心室肌和成人缓慢性骨骼肌中表达外,当心脏压力过重和患有某些心脏疾病时,亦会在心房肌中有诱导表达[2]。目前,检测心室肌球蛋白轻链1的变化在临床上已经成为先天性心脏病和心肌坏死、心肌梗塞的重要诊断工具[3,4,5]。1988年,Hoffmann等人报道了人心室肌球蛋白轻链1的全长cDNA序列[6],本工作根据该序列信息合成相应引物,从人脑cDNA文库中通过PCR方法得到该基因的cDNA,将它成功连接到pET22b质粒载体中,在大肠杆菌中实现了重组表达,并对表达蛋白进行了分离纯...  (本文共5页) 阅读全文>>