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骨髓间充质干细胞在肺损伤大鼠肺组织的分化

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是成体干细胞的一种,在一定条件下可分化为多个胚层来源的组织细胞[1],因此,MSCs移植有可能成为替代受损细胞,治疗多种疾病的有效方法。本实验应用博来霉素(BLM)诱导的大鼠肺损伤模型,观察了MSCs在大鼠肺组织的分化,为MSCs治疗肺疾病提供实验依据。1材料与方法1.1实验试剂DMEM-F12(Gibco公司),胎牛血清(Hyclone公司),Percol1分离液(Sigma公司),DAPI(4,6-二乙酰基-2-苯基吲哚,Roche公司),小鼠抗大鼠广谱细胞角蛋白(PCK)单克隆抗体(Santa Gruz公司)。1.2MSCs的分离、培养及鉴定参考Sekiya等[2]的方法。MSCs取自一只100~150g雄性SD大鼠的骨髓。将获取的大鼠股骨、胫骨骨髓用1.073g/ml的Percoll分离液分离,用含10%胎牛血清的DMEM-F12悬浮细胞,37℃、...  (本文共3页) 阅读全文>>

南方医科大学
南方医科大学

间充质干细胞对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺保护作用及机制研究

研究背景及目的急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)主要是由胃酸吸入、感染、创伤、脂肪栓塞等引起,感染是最常见原因。不论何种原因所致急性肺损伤,炎症反应都在其病理改变中起了主要作用。虽然,大量的研究试图阐明急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症的发病机理,但是,至今仍没发现特别有效的治疗手段。目前,急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的治疗上主要以支持治疗、药物治疗和辅助通气治疗为主,临床上仍然保持着很高的病死率,大约维持在30%~40%,因此迫切需要深入研究其发病机制,寻找更加有效的治疗方法。间充质干细胞(MSC)不仅具有低免疫原性、多向分化潜能、诱导免疫耐受、还具有免疫抑制的作用。由于MSCs具有独特的免疫学特性及良好的可塑性,并且MSCs的利用不涉及伦理争议,因此,到目前为止MSCs已成为细胞治疗和组织工程的最佳候选细胞材料。但是,其治疗机制仍然没有完全清楚。核转录因子KB(NF-κB)是近年研究较多的一个促炎因子,其在炎...  (本文共142页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
华中科技大学

大鼠骨髓间充质干细胞移植对大鼠肺气肿的修复作用及其机制的研究

COPD是慢性气道疾病,与有毒颗粒和气体引起的肺组织异常炎性反应有关,导致气流受限不完全可逆的肺气肿。COPD是全世界死亡率的第5位因素,而且COPD的患病率和死亡率有逐年上升的趋势。目前对COPD发病机制的观点是香烟刺激物诱导炎性细胞的聚集,炎性细胞释放活性氧和蛋白水解酶,引起肺基质的毁损和结构细胞的死亡。最近的研究认为肺组织结构细胞的凋亡可能在COPD的发病机制中有很重要的作用。对COPD病人肺组织切片的研究发现肺泡上皮细胞和内皮细胞的凋亡增加,而这些结构细胞的增殖并没有均衡的增加,因而可促进肺组织的毁损和肺气肿的发生。而且在严重的COPD动物模型中发现,在肺气肿的发展中显著缺乏炎性细胞。动物实验证明即使没有炎性细胞的聚集,肺泡壁细胞或内皮细胞凋亡也足够引起肺气肿的发生。越来越多的证据证明了炎症、蛋白酶/抗蛋白酶失衡、氧化应激与凋亡相互作用导致COPD发病的复杂性。因此有待于进一步研究在COPD发病过程中凋亡的途径,以及进一...  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

第二军医大学
第二军医大学

骨髓间充质干细胞在大鼠百草枯中毒肺损伤中的实验研究

第一部分:SD大鼠骨髓间充质干细胞分离、培养、纯化及其生物学特性鉴定的研究目的:探讨SD大鼠骨髓间充质干细胞(Bone Marrow-derived Mesenchymal SstemCells,BMSCs)体外分离、纯化和培养方法,并鉴定其生物学特性,建立理想的大鼠BMSCs体外分离培养体系,为BMSCs实验研究奠定基础。方法:取4-6周龄的清洁级雄性SD大鼠,无菌条件下分离大鼠后肢,PBS冲洗骨髓腔,收集骨髓。联合运用密度梯度离心法和全骨髓贴壁培养法分离、纯化和培养SD大鼠BMSCs。光镜下进行细胞形态学观察、采用MTT法绘制细胞生长曲线、应用流式细胞术测定细胞表面标记,并检测BMSCs向成骨、成脂肪细胞分化的潜能。结果:显微镜下体外分离培养的SD大鼠BMSCs呈梭形、成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长。细胞生长曲线呈“S”形。P3代SD大鼠BMSCs纯度达98%以上;细胞表面表达CD44、CD90等抗原分子,不表达CD...  (本文共75页) 本文目录 | 阅读全文>>

滨州医学院
滨州医学院

胎盘间充质干细胞在油酸型急性肺损伤中的炎症调节作用研究

目的探讨人胎盘间充质干细胞(human placenta-derivedmesenchymal stem cells, hpMSCs)对油酸型大鼠急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的炎症因子IL-8/IL-10的调节作用,同时检测小G蛋白(RhoA)在油酸型急性肺损伤大鼠肺组织中的表达变化,探讨移植hpMSCs对RhoA的表达的影响,为进一步揭示间充质干细胞在调节急性肺损伤炎症反应中的作用机制,为寻找靶向治疗肺部及其他炎性疾病提供理论依据,同时为胎盘间充质干细胞在调节炎症治疗肺损伤方面提供依据方法采用胶原酶酶消化法体外培养并扩增人胎盘间充质干细胞,体外培养传代、细胞计数,生长曲线及向神经、成骨诱导来证明胎盘间充质干细胞。采用油酸舌下静脉注射法建立大鼠急性肺损伤模型,进行间充质干细胞移植治疗。将36只健康雄性SD大鼠随机分为3组,每组12只:(1)正常对照组(n=12),经舌下静脉注入0.5m1生理盐水;(...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

骨髓间充质干细胞在大鼠肺组织内的分化及对肺损伤治疗作用的研究

多种原因可损伤肺泡上皮细胞,造成肺实质结构的破坏,影响肺的通气和换气功能,导致呼吸衰竭,甚至死亡。肺泡上皮细胞的损伤可见于多种肺部疾病,如肺纤维化、肺气肿、肺囊肿、急性呼吸窘迫综合征等。现行的治疗方法主要是尽早去除致病因素,减轻肺组织炎症,以减轻肺组织损伤以及肺纤维化的形成,但治疗效果并不理想。肺移植虽然为终末期肺疾病患者的治疗提供了一种手段,但由于其面临着诸多问题:如供体来源困难,急慢性排斥反应的产生,移植后生存率不高,费用昂贵等,使得肺移植难以广泛开展。如何治疗肺损伤及肺纤维化,改善患者的呼吸功能,提高患者的生活质量是当前国际上的研究热点。干细胞由于其自我复制及多向分化的特点已经被广泛研究用于多种疾病的治疗。本研究旨在观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)植入博来霉素(bleomycin,BLM)诱发的肺损伤大鼠体内后在肺组织内的分化及对肺损伤的治疗作用,为干细胞治疗肺损伤提供实验依据...  (本文共113页) 本文目录 | 阅读全文>>