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菊粉酶产生菌的选育及发酵条件

菊粉酶产生菌的选育及发酵条件谢秋宏,相宏宇,葛玉斌,尹辉(吉林大学分子生物学系,长春130023)提要野生型黑曲霉AJ1405经紫外线、硫酸二乙酯和亚硝基胍等多代诱变处理,获得一株产菊粉酶(InulinaseE.C.3.2.1.7)能力较高的变异菌株AJ1958.连续传代10次,AJ1958突变株无衰退,是稳定的变异菌株.其产生的菊粉酶只被菊粉(Inulin),而不被蔗糖、淀粉、纤维素、葡萄糖或果糖诱导.在1000mL0.07g/mL菊芋提取液中添加豆饼粉5g,麸皮5g,250mL三角瓶中装50mL培养液,于30℃,120r/min旋转式摇床振荡培养3d,酶活力可达64μmol·min(-1).K+,Fe(2+),Mg(2+)对酶形成有促进作用.关键词菊粉酶,诱变,发酵条件在注重营养保健的今天,高果糖浆风靡全球.70年代,大量的果糖是由淀粉通过葡萄糖的异构化生产的.因其工艺复杂,人们探讨通过化学法或酶法水解菊粉生成果糖,结果表明...  (本文共4页) 阅读全文>>

江南大学
江南大学

菊粉酶产生菌的选育及其酶学性质的初步研究

本文以实验室保藏的黑曲霉为出发菌株,对其进行了诱变,对突变株的发酵条件进行了优化,并对菊粉酶进行了分离纯化及酶学性质的研究,最后对菊芋粉的水解进行了初步研究,主要结论如下:(1)出发菌株黑曲霉YH-1的菊粉酶活力Ⅰ为60.9U/mL,I/S=0.38。对其进行了亚硝基胍诱变、高温和高菊芋粉相结合的梯度驯化后,最终选育出一株产酶较高的菌株YH-3,菊粉酶活力Ⅰ为85.2U/mL,I/S=0.38保持不变。(2)对菌株YH-3进行产酶培养基及发酵条件优化,确定最佳产酶培养基:菊芋粉25.2g/L、豆饼粉40g/L、蔗糖酯4.9g/L和氯化钠5.5g/L;最佳发酵条件:接种量0.8mL孢子液/瓶,发酵温度37℃,装液量80mL/500mL,发酵周期96h,在最佳的发酵条件下菊粉酶活力Ⅰ为196.0U/mL,比出发菌株提高了2.2倍。(3)发酵液经过硫酸铵分级沉淀、MonoQ5/50GL强阴离子柱、Superdex20010/300GL...  (本文共54页) 本文目录 | 阅读全文>>

《食品科学》2008年04期
食品科学

Aspergillus ficuum菊粉酶酶学性质的研究

不同微生物菊粉酶对菊粉的作用方式不同,得到的水解产物也不相同。外切菊粉酶作用于菊粉链的非还原性末端的糖苷键,逐一水解释放出果糖,主要产物为果糖;内切菊粉酶随机地断开菊粉链内部的糖苷键,水解产物主要为低聚果糖。应用Aspergillus ficuum菊粉混合酶系来水解菊粉,内切菊粉酶将菊粉水解成低聚果糖,外切菊粉酶又迅速将低聚果糖水解为果糖,这样由于二者的协同作用,使得水解产物主要为果糖。因此,为了提高菊粉酶水解产物中低聚果糖的含量,研究外切菊粉酶和内切菊粉酶的理化性质显得非常重要。在前面的研究中[1],我们采用离子交换色谱、凝胶过滤色谱和制备电泳技术对Aspergillus ficuum菊粉酶系进行分离纯化和鉴定,获得五个电泳纯酶:三个外切菊粉酶组分Exo-Ⅰ、Exo-Ⅱ、Exo-Ⅲ和两个内切菊粉酶组分Endo-Ⅰ、Endo-Ⅱ。本研究对这五种菊粉酶的酶学性质进行研究,为深入了解混合酶系中各组分对菊粉的作用机制提供理论依据,并为...  (本文共6页) 阅读全文>>

《饲料研究》2008年07期
饲料研究

产菊粉酶曲霉菌株的筛选和发酵条件的优化

70年代以来,国外就开始研究菊粉酶,我国在这方面的研究起步较晚。目前据国内外统计,产菊粉酶的丝状真菌有17个属40余种,酵母菌10个属20余种,细菌12个属10余种,其中大部分菌株产外切酶,青霉和少数曲霉产内切酶,而该研究均停留于实验室研究阶段,而且各菌株发酵获得的菊粉酶产量较低,生产成本高。曲霉是目前研究产菊粉酶的热点菌种之一。国际上报道的曲霉菊粉酶最高产量为50U/mL,而国内报道的曲霉菌株产菊粉酶的最高酶活力达到53U/mL,离工业化生产均有一定距离,因此,进一步摸索菊粉酶高产发酵仍十分必要。从菊芋周围的土壤筛选出产菊粉酶活力较高的曲霉菌株,并通过对该菌株实验室水平发酵工艺条件的优化,确定其最佳发酵条件,从而提高菌株的产酶活力,了解菊粉酶酶学性质基础,通过基因改良技术提高菌种的产酶能力,达到工业化生产要求。1材料与方法1.1试验材料1.1.1材料菊芋生长周围的土壤。1.1.2菊粉国产粗菊粉培养基的配制。优化纯Flucka公...  (本文共4页) 阅读全文>>

《当代畜禽养殖业》2004年01期
当代畜禽养殖业

菊粉酶研究进展及应用

菊粉最早是从菊科植物中分离出来而得名。菊粉(Inulin)是、种有吠喃构形的D一果糖经p一2,l糖昔键脱水聚合而成,且在果糖残基(F)末端连有一个葡萄糖残基(G)的直链结构多糖,是最简单的一类果聚糖,简写为GFll(Fdel-man等,1968)。此外,Em、r等(1995)报道,菊粉还含有少量另一类果聚糖(inulonose),即末端无连有G的果聚糖菊粉酶(illt,11,lase)是能够水解p一2,1一D一果聚糖果糖许键的一类水解酶,学名p一2,1一D一果聚糖酶,又叫p果聚糖酶、2,!一D-果聚糖水解酶(EC3.2.l)分泌菊粉酶的微生物在自然界中分布很广,土壤、水和动物消化道中的多种微生物都能分泌、菊粉酶可以在一定的温度条件下水解菊粉成果糖或低聚果糖1菊粉酶的分类根据菊粉酶在微生物体内主要分布于细胞内、细胞壁和细胞外,分别称为胞内酶、胞壁结合酶和胞外酶,它们的比例主要受菌种、碳源、温度和pH的影响(Ettah-bi等,19...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国饲料》2003年13期
中国饲料

菊粉酶研究进展及应用

菊粉最早是从菊科植物中分离出来而得名。菊粉 (inulin)是一种有呋喃构形的D -果糖经 β -2 ,1糖苷键脱水聚合而成 ,且在果糖残基 (F)末端连有一个葡萄糖残基 (G)的直链结构多糖 ,是最简单的一类果聚糖 ,简写为GFn (Edelman等 ,1 968)。此外 ,Ernst等 ( 1 995 )报道 ,菊粉还含有少量另一类果聚糖 (inulonose)即末端无连有G的果聚糖。菊粉酶 (inulinase)是能够水解 β - 2 ,1 -D -果聚糖果糖苷键的一类水解酶 ,学名 β - 2 ,1 -D-果聚糖酶 ,又叫β -果聚糖酶、2 ,1 -D -果聚糖水解酶 (EC 3.2 .1 )。分泌菊粉酶的微生物在自然界中分布很广 ,土壤、水和动物消化道中的多种微生物都能分泌。菊粉酶可以在一定的温度条件下水解菊粉成果糖或低聚果糖。1 菊粉酶的分类菊粉酶有不同的分类方法。根据菊粉酶在微生物体内主要分布于细胞内、细胞壁和细胞...  (本文共3页) 阅读全文>>

《微生物学杂志》1999年04期
微生物学杂志

微生物菊粉酶的研究进展

菊粉酶(Inulinas.EC3.2.1.7)是B-2.1-D-果聚糖酶,可从果糖的非应原端逐个切下单个果糖(外切酶活性),或在分子内部随机切断某个p-2.1糖着键(内切酶活性)[1]。菊粉酶主要来源于菊科植物和部分微生物,微生物菊粉酶主要来自霉菌、酵母菌和细菌。菊粉酶可水解天然果聚精一菊粉(Inulin),利用菊粉酶一步水解菊粉制备高果糖浆具有工艺简单、原料价格低廉、转化率高、副产物少,不增加环境污染等优点,因而具有很大的开发应用潜力。菊粉是果糖的多聚物,富含于菊芋(He-lianthustuberosus)等多种菊科植物中,菊芋块茎主要成分是菊粉,其含量占干重的70%~80%。菊芋适应性强,耐贫瘠,种植简易,产量较高,是制备果糖或高果糖浆的极好原料。在注重营养保健和糠源不足的今天,果糖或高果糖浆急待开发。果糖作为甜味剂,具有口感好,甜度高,热值低,不易引起糖尿病、动脉粥样硬化、龋齿和肥胖等优点,且低聚果糖还有促进肠道双歧杆菌...  (本文共3页) 阅读全文>>