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CH50多肽在膀胱癌细胞系BIU-87中的表达和鉴定

0引言纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)是人体内广泛存在的具有多个功能结构域的高分子糖蛋白,体内许多细胞可合成分泌Fn,成纤维细胞分泌量尤多,而血浆内Fn主要来自肝细胞分泌。Fn其主要功能是黏附作用,能促进细胞黏附于基质及细胞之间的粘合。CH50多肽是人Fn的CellⅠ和HepⅡ两个结构域重组构建的多肽。本实验以脂质体为介导,将CH50多肽真核表达载体pCH510质粒体外转染BIU87细胞,观察CH50多肽在BIU87细胞中的表达并鉴定。1材料和方法1.1材料膀胱癌细胞系BIU87,购自武汉大学中国典型培养物保藏中心(CCTCC)。pCH510质粒的工程细菌系华中科技大学同济医学院分子生物教研室冯作化教授惠赠。pcDNA3.1的工程细菌系华中科技大学同济医院泌尿外科鲁雄兵博士惠赠。各种工具酶、羊抗小鼠IgG、AP及AMPPD、one setpRNAPCRKit等购于大连宝生物工程有限公司。小鼠抗人Fn抗体为SantaC...  (本文共5页) 阅读全文>>

《现代肿瘤医学》2017年12期
现代肿瘤医学

瞬时受体电位阳离子通道蛋白在膀胱癌细胞系中的差异表达及其意义

膀胱癌在全球肿瘤发病率中居第六位,死亡率居第九1∶1 000稀释)4℃孵育12 h。分别加入辣根过氧化物酶位,约25%为肌层浸润性膀胱癌[1,2]。肌层浸润性膀胱癌侵(HRP)标记的山羊抗兔与山羊抗小鼠的二抗(1∶1 000稀袭性强,预后差。虽然现代医学技术的进展已经使肌层浸润释),室温下在摇床上孵育1.5 h。加入ECL显影液,采用性膀胱的预后得到很大的改善,但复发和进展仍然是膀胱癌ChemiD oc TMXRS+成像系统成像。治疗的难点问题。1.2.4细胞增殖实验(MTT)取处于对数生长期的细胞,瞬时受体电位阳离子通道蛋白(TRPV1)最初被发现表胰酶消化、计数、按8 000个/孔,接种于96孔细胞培养板中,达于感觉末梢神经元突触膜上,后续研究表明TRPV1在人静置12 h。加入不同浓度TRPV1激动剂—辣椒素50、100、体内广泛表达[3]。在神经系统中,TRPV1被激活后能介导痛150和200μmol/L继续培养48 h...  (本文共4页) 阅读全文>>

《肿瘤防治研究》1989年03期
肿瘤防治研究

ras基因与人类肿瘤

自1982年从人膀胧癌细胞系分离克隆出第一个人摘基因EJ一Ha一ras后,迄今已发现了儿十种人庙丛因。在这些研究中,ras基因家族儿乎占用转染技术发现的人类转化基因的90肠。本文拟就ras兹因的特性及功能等做一简要介绍。 一、ra、墓因家族 ra。基因首先发现于Harvey和Kirsten大鼠肉瘤(ratsa孔。二a)中。在诱变此两瘤的逆转病毒中,找到了能引起红胡包荡变的核普酸序列,分别称为V一lh一:、as和V一民i一ras.在哺乳动物基因组内已发现除Ha一:as订‘’Ki一ras:外尚有N一ras。这三种有功能的ra、荃因己从至少二种哺乳动物中分离克隆出,并迸行了测厅和染色体定位(见表l)。氛屯ra.基因染色体定位染色体定雄一}Ha一IKi一IKi一{N-种川lr£51{ras:}rasi{ars:}ras }1 1 Pl‘一}、,}6P卫:一}xZP一IP:2一 人】“乞竺。}x.一甘_。l‘一D‘_!‘甘__ }厂16二...  (本文共3页) 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

MTS1在膀胱癌中的表达及野生型MTS1对人膀胱癌细胞系生长抑制作用的研究

膀胱癌是临床最常见的恶性肿瘤之一,其发病率占泌尿系肿瘤首位,而且复发率很高,成为临床治疗的难题之一。目前在分子水平上的研究显示肿瘤的发生与癌基因的激活和抑癌基因的失活以及细胞周期调节失控密切相关。肿瘤的病因治疗主要是针对癌基因和抑癌基因的异常,策略是抑制、阻断癌基因的表达和替代、恢复抑癌基因的功能。多肿瘤抑制基因(Multiple Tumor Suppressor1,MTS1)是1994年4月由美国盐湖城的Kamb等与圣地亚哥的Noborl等同时报导的第一个能直接作用于细胞周期的新型抑癌基因。现已明确MTS1位于人类第九号染色体短臂(9P21)上,由三个外显子和两个内含子组成,其编码蛋白为P16(故又称P16基因)。据统计,约有75%的癌细胞株有P16的缺失与突变,超过了P53(50%)的突变率,其中在膀胱癌细胞系中的丢  (本文共98页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东大学
山东大学

TRPV4通道在正常膀胱上皮细胞及膀胱癌细胞系表达差异的研究

研究背景:膀胱癌被报道是全身的十大常见肿瘤中之一,也是泌尿系统疾病中最常见的恶性肿瘤,在我国泌尿生殖系统肿瘤发病率占第一位。近几年随着各种不同的治疗手段的不断进步,各种手术方式及药物的应用使得膀胱癌的治疗策略越来越丰富,但是患有膀胱癌的患者的预后情况仍然不乐观,患者的5年存活率并没有得到显著的提高。膀胱肿瘤的病理类型主要为尿路上皮癌、鳞状细胞癌、腺癌,以及罕见病理分类如小细胞癌、混合型癌、癌肉瘤以及转移性癌等。其中,绝大部分的膀胱肿瘤为尿路上皮癌,尿路上皮癌的发病率占所有膀胱肿瘤的90%。然而,至今其发生发展的相关机制尚未完全清楚,因此,研究其发生发展机制对于找到膀胱癌新的治疗靶点至关重要。瞬时感受器电位(Transient receptor potential,TRP)超家族是最早被发现于果蝇的视觉系统中的一类非选择性阳离子通道家族,广泛分布于低等及高等生物中,目前已发现30多个成员。依其结构同源性可分为TRPC(canoni...  (本文共50页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
华中科技大学

沉默STIM1下调SOCE减弱EJ细胞迁移和成瘤能力

细胞内无处不在的Ca~(2+)在细胞周期、生长、凋亡、迁移、兴奋收缩和基因表达等基本的生理过程中发挥重要的作用。细胞内Ca~(2+)稳态的调节受到胞外通过钙通道进入的Ca~(2+)和胞内钙库释放的Ca~(2+)的影响,而且许多疾病的发生都与不正常的Ca~(2+)震荡有关,包括进行性疾病,心血管疾病,神经退行性疾病和癌症等。细胞膜上的Ca~(2+)通道主要包括电压门控性钙通道(voltage-gated calcium channels,VGCC)、钙库操纵性钙通道(store-operated calcium entry,SOCE)、配体门控性钙通道(ligand-gated calcium channels,LGCC)、钠钙交换体(Sodium-calcium exchanger,NCX)、受体操纵性的钙通道(receptor-operated calcium entry,ROCE)和花生四烯酸调控性钙通道(arachidon...  (本文共57页) 本文目录 | 阅读全文>>