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Bt Cry1Ac毒素筛选的粉纹夜蛾离体抗性细胞与敏感细胞蛋白质组的差异分析

随着转苏云金芽孢杆菌 (Bt)基因植物以及Bt生物农药的推广 ,许多有害昆虫对Bt类制剂产生了不同程度的抗性 (McGuaghey ,1985 ;Whalonetal .,1993;Leeetal .,1995 )。近年来关于昆虫对Bt产生抗性的分子机制已有比较多的报道。在某些昆虫抗性品系中已经确定了一些抗性相关基因 ,Linda等(2 0 0 1)研究表明烟芽夜蛾Heliothisvirescens对Bt产生抗性主要是由于钙粘蛋白基因内插入反转座子所至。Zhu等 (2 0 0 0 )研究表明印度谷螟Plodiainterpunctella抗性品系中氨肽酶基因的错义点突变可能与其抗性的产生相关。然而 ,也有与以上报道相左的报道 ,Linda等 (2 0 0 2 )在另一烟芽夜蛾抗性品系中发现其抗性与钙粘蛋白和氨肽酶基因并无多大关系 ;Liu等 (2 0 0 0 )报道小菜蛾Plutellaxylostella一个Cry1C抗性品...  (本文共5页) 阅读全文>>

《华北农学报》2005年02期
华北农学报

烟夜蛾幼虫中肠Bt Cry1Ac毒素受体蛋白cDNA片段的克隆和序列测定

ToxinBindingProteinfromtheMidgutofHelicoverpaassultaGuen啨eLarvaANShi heng,GUOXian ru,LUOMei hao,JIANGJin wei,MAJi sheng(PlantProtectionCollegeofHenanAgriculturalUniversity, 自1915年Berliner从德国地中海粉螟(Ana gastakuhniella)上分离出一种后来被命名为苏芸金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)的细菌以来,Bt制剂成为当前应用最广、最有效的微生物杀虫剂。随着分子生物学技术和基因工程的发展,把Bt的杀虫基因转入植物中的研究,为害虫防治开辟了新的途径。但自从McGallghey1985年报道印度谷螟(Plodiainterpunctella)对Bt产生抗性以来[1],Bt制剂的应用面临着新的挑战,因为尽管在田间仅...  (本文共5页) 阅读全文>>

河南农业大学
河南农业大学

烟夜蛾(Helicoverpa assulta Guenée)幼虫中肠Bt Cry1Ac毒素受体蛋白cDNA的克隆

利用RT—PCR技术扩增烟夜蛾Helicoverpa assulta Guenée幼虫中肠Bt毒素CryIAc受体蛋白基因,进行克隆和测序,结果表明,所测序出的812bp的片段编码270个氨基酸残基,且这个片段在阅读框内。通过同源性分析发现,其核苷酸序列与棉铃虫(Helicoverpa armigera)、斑实夜蛾(Helicoverpa punctigera)、烟芽夜蛾(Heliothis virescens)、舞毒蛾(Lymantria dispar)、小菜蛾(Plutella xylostella)、印度谷螟RC688品系(Plodia interpunctella)、印度谷螟HD198品系、烟草天蛾(Manduca sexta)和家蚕(Bombyx mori)的CryIAc受体蛋白基因的同源性分别是97%、90%、78%、63.5%、55%、60.3%、61.2%、55%和59%。推导的烟夜蛾CryIAc受体蛋白基因的氨...  (本文共54页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国农业科技导报》2012年02期
中国农业科技导报

用人工合成多肽作为半抗原制备Bt Cry1Ac的单克隆抗体

棉铃虫是世界性农业害虫,每年造成的经济损失高达50~100亿元人民币。棉铃虫的大暴发,使化学农药使用量急剧增加,严重污染了人们赖以生存的自然环境,破坏了生态平衡[1]。为减轻棉花害虫的危害,保护生态环境,我国于20世纪90年代中期开始大面积种植具有自主知识产权的国产转基因抗虫棉,种植面积已超过棉花总面积的85%,产生了巨大的经济效益和良好的社会及环境效益。转Bt基因棉抗虫性的检测是转Bt基因棉的研究、选育和种子生产的重要环节,对保证种质纯度和评价转基因作物的生态和食品安全性、进行转基因产品的强制标识,都有重要意义。苏云金芽孢杆菌(Bacilus thuringiensis,简称Bt)是一种广泛存在于土壤中的革兰氏阳性细菌,由Ishiwata于1901年首先在受病害的蚕蛾中发现。苏云金芽饱杆菌在形成芽孢的过程中,可产生具有杀虫活性的蛋白质伴孢晶体,即杀虫晶体蛋白(insecticidalcrystal protein,ICP)[2...  (本文共7页) 阅读全文>>

《植物保护学报》2003年03期
植物保护学报

粉纹夜蛾离体细胞对Bt Cry1Ac毒素的抗性发展及其交互抗性

随着苏云金芽抱杆菌(及沈说usth枕rin沙nsis,Bt)制剂的广泛应用和转Bt毒素基因植物的大面积种植,田间至少已有20多种主要害虫产生了明显的抗性,这将严重地威胁着Bt资源的可持续利用,因此,抗性研究十分重要川。实验室筛选的Bt抗性昆虫是研究抗性发展及其机制的良好材料,但是抗性昆虫常因病原体感染而导致绝种,或因选择压力不当而不能繁殖,或选择压力不连续而导致抗性衰退,要获得高水平的抗性昆虫并非易事。 Bt晶体活性毒素可引起离体细胞产生与虫体内中肠上皮细胞同样的病理变化图,利用离体细胞易于开展Bt毒素作用机理及抗性发展与抗性分子机制的研究。以Bt抗性细胞株作研究材料与虫体相比还具有试验周期短、易排除干扰因素、抗性细胞可长期液氮冻存而抗性不衰退、群体均一性良好、细胞间没有基因交流而遗传物质稳定等独特优点。目前国内外有关利用离体细胞研究Bt抗性的报道很少。Jolmson曾报道过一株Bt晶体活性毒素筛选的抗性比为97的极色卷蛾细胞系...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国农业科学》2014年09期
中国农业科学

基于磁珠和双抗夹心免疫分析的Bt Cry1Ac毒素单链抗体筛选与鉴定

0引言【研究意义】苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)是一种革兰氏阳性(G+)细菌,它在产生芽孢的同时能产生伴孢晶体,又称杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,ICPs),其对鳞翅目、双翅目和鞘翅目等昆虫有均有杀虫活性[1]。Bt基因是转基因食品中使用最广泛且最有效的杀虫基因,并且被广泛应用于基因工程中[2]。目前已发现的Bt基因有130多种,而且新的Bt基因还在不断的被发现和鉴定。在转基因食品被开发、研究和商业化的同时,建立适当的检测方法对于转基因食品成分快速鉴定与检测,促进农业转基因生物安全管理,保护生态环境具有极其重要的研究意义[3]。【前人研究进展】Cry1Ac蛋白是应用范围最广泛的一种Bt毒素,近些年对其的检测主要有聚合酶链式反应(PCR)[4]、酶联免疫反应(ELISA)[5-7]、生物测定[8-9]、免疫PCR[10]、放射性免疫分析[11]、...  (本文共9页) 阅读全文>>