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RNA干扰:双链RNA引起的基因沉默机制——2006年诺贝尔生理学或医学奖成果简介

1引言举世瞩目的2006年诺贝尔生理学或医学奖,于2006年10月2日由诺贝尔奖评审委员会授予了2位美国科学家AndrewA.Fire和CraigC.Mello(图1),以表彰他们发现了真核生物中的RNA干扰(RNAinterference)现象。现为美国斯坦福大学教授的AndrewFire出生于1959年。19岁就获得斯坦福大学学士学位的Fire于麻省理工大学获得博士学位后,加入了当时位于英国剑桥大学SydneyBrenner教授领导的研究组做博士后。SydneyBrenner于2002年获得了诺贝尔生理学或医学奖。Fire于1986年开始转入美国Carnegie研究所工作,并在那里开始了关于RNA干扰的研究。从2003年开始,Fire又回到自己的母校——斯坦福大学,现任遗传系和病理系的教授。CraigMello出生于1960年。他于1982年获得美国Brown大学学士学位,1990年获得哈佛大学的博士学位。随后,Mello在...  (本文共4页) 阅读全文>>

《分子植物育种》2006年01期
分子植物育种

一种从香蕉果实提取高质量RNA的方法

从香蕉果实中分离和提纯高质量的RNA,并用其构建香蕉果实cDNA文库,通过RT-PCR进行相关基因的克隆、进行Northern杂交和蛋白质体外翻译试验,是从分子水平上对香蕉果实的形成、发育和果实成熟软化相关基因研究的基础。虽然已有许多有关从植物中提取RNA的方法报道,且有商业化RNA提取试剂盒,但都不太适用于从香蕉果实中提取高质量的RNA。这主要是由于香蕉果实中含有大量的多糖、酚类和一些次生代谢物质(Lizada et al.,1990),这些物质在RNA提取过程中不但不易除去,且在除去过程中易导致RNA的降解,影响RNA的质量(Zeng and Yang,2002),使其不能在体外进行翻译,不能满足进一步实验的要求。为解决这一问题,我们尝试在提取RNA常规方法的基础上进行优化和改进,成功地获得得到了高质量RNA。现介绍如下。1材料和方法1.1实验材料供试材料香蕉(Musa paradisiaca L.var.sapien-tu...  (本文共4页) 阅读全文>>

《西北植物学报》2006年02期
西北植物学报

一种快速提取小麦叶片总RNA的方法

RNA的提取是进行分子克隆和基因表达分析等研究的基础.但RNA很容易被内源及外源的RN ase降解,所以要得到未被降解的、不含DNA与其它杂质的RNA是进行分子生物学研究的前提[13].目前较为成熟的分离RNA的方法有许多,用于植物细胞总RNA的提取主要有苯酚法[1]、异硫氰酸胍法[7]、氯化锂沉淀法[1]、SDS/酚抽提法[8],或应用商品化的T rizo l试剂和Q iagen等各类试剂盒进行提取.但由于植物细胞具有坚硬的细胞壁,内含较多的多糖、脂质、多酚等次生代谢物[3,4],同种植物的不同组织和不同植物的同种组织材料,其RNA的提取方法也会有很大差异[5,6].适宜的RNA提取方法也不尽相同.因此植物RNA的提取更显得困难.本研究在苯酚法和氯化锂沉淀法的基础上,摸索出了一种适宜于小麦叶片总RNA的提取方法,提取的总RNA完整性好、纯度高,完全可满足RT-PCR、N orthern杂交、RACE等的实验要求,而且实验成本低...  (本文共5页) 阅读全文>>

《Chemical Research in Chinese Universities》2006年02期
Chemical Research in Chinese Universities

Expression of RNA Editing Deaminase on Human Glioma Cell Lines

Introduction TheprocessofRNAeditingisawidespreadphe nomenonthatactsonthepost transcriptionalalteration ofgene encodedsequencesduringtheevolutionfrom organismstomammals[1].InthecourseofRNAedi ting,thebasechangesaltercodonsand,therefore,aminoacidsequences,oftenwithprofoundconse quencesforproteinfunction.Thephenomenaofhuman RNAeditinghavebeenfoundinthecentralnervesys tem(CNS)[2—4].However,whethertheunder editing ontheQ/...  (本文共3页) 阅读全文>>

《华中科技大学学报(医学英德文版)》2006年03期
华中科技大学学报(医学英德文版)

Effects of Survivin Expression Suppressed by Short Hairpin RNA on MCF-7 Cells

RNAinterference(RNAi)involvespost tran scriptionalgenesilenceviaaprocessinwhichshortinterferingRNA(RNAi)inhibitsgeneexpressionthroughdegradationofcorrespondingmRNA.Comparedtoantisenseoligonucleotideandri bozymestrategies,RNAistrategyseemstohaveawiderprospectbecauseofpowerfulabilitytosup pressgeneexpressionandhighstabilityinvivo[1].Inthisstudy,ashRNAexpressionvectortargetedagainstgeneSurvivinwasconstructedinordertoinv...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中草药》2006年04期
中草药

铁皮石斛RNA提取及RT-PCR检测

植物生长发育是一系列基因表达和内外环境因子影响共同作用的结果。分离和提纯植物体内的总RNA,逆转录成cDNA,进行差异基因筛选克隆、N orthern杂交和蛋白质体外翻译实验等,都需要高质量的RNA。铁皮石斛D end robium cand idum W all.exL ind l.是一种富含多糖的药用植物[1],尚未见到铁皮石斛总RNA提取的报道。利用适当的声波胁迫铁皮石斛的特异基因表达,可以提高其多糖的量3.42%。为了研究适当的声波胁迫对铁皮石斛次生代谢产物表达的影响及其特异表达基因的筛选,必须得到高质量的RNA。有关植物组成RNA的提取方法已有不少报道[2,3]。由于植物组织中往往富含多糖;而多糖的许多理化性质与RNA很相似,因此很难将它们分开[4],致使污染多糖的RNA样品无法用于进一步的分子生物学研究。本实验首先采用了RN easy P lantM in i试剂盒(Q iagen)提取铁皮石斛的总RNA,但收率不高...  (本文共4页) 阅读全文>>