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中华眼镜蛇细胞毒素体外抑制膀胱癌细胞增殖活性的实验性研究

细胞毒素(cytotoxin,CTX)是眼镜蛇毒中有溶细胞作用的活性多肽,对许多肿瘤细胞具有选择性抑制增殖作用·本研究采用结晶紫染色法检测CTX对膀胱癌细胞株的体外抑制增殖作用,为体内和临床实验提供依据·1材料和方法1·1试剂蛇毒细胞毒素CTX-10、CTX-11、CTX-12和CTX-13由中科院昆明动物所提供,浓度分别是0·68、0·8、0·87和0·587 mg/mL·RPM I1640、胰酶:GIBCO生产;HEPES:Roche生产;小牛血清:Hylcon生产;结晶紫:北京市旭东化工厂生产·1·2细胞株细胞株EJ和B IU-87由北京大学医学部基础医学院免疫系免疫药理研究室提供·1·3主要仪器医用洁净工作台,北京半导体设备一厂·恒温、CO2培养箱,Harris公司·倒置相差显微镜,O lympus公司,BH-2型·1·4 CTX抑制膀胱癌细胞株增殖的实验采用改良结晶紫染色法[1],结晶紫是一种能被活细胞核摄取的染料,死...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国卫生产业》2012年19期
中国卫生产业

中药靛玉红对膀胱癌细胞株的生长抑制作用观察

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤[1],我国膀胱癌发病率居泌尿系统肿瘤第一位,其中90%以上为膀胱移行细胞癌。目前临床上对膀胱癌采用的主要治疗方法是手术切除,术后化疗,必要时放疗。但膀胱癌总体来说复发率较高。目前临床工作者和研究者均认为,从中药中寻找新的抗肿瘤药物已成为发展方向。靛玉红是我国创制的治疗慢性粒细胞白血病的有效药物,它是治疗慢性粒细胞白血病的有效成分,由传统中药青黛中提取。其抗肿瘤作用原理主要为抑制DNA聚合酶,影响DNA的聚合过程,从而使DNA合成受抑制。本实验将不同浓度的中药靛玉红作用于膀胱癌细胞株,观察其对膀胱癌细胞株的生长抑制作用,并进一步观察其是否具有量效关系和时间依赖性。1材料与方法1.1药品与试剂RPMI1640培养液、二甲基亚砜(DMSO)、甲基四唑蓝、胰蛋白酶、靛玉红粉剂(用前靛玉红需经DMSO溶解,需用不同浓度时,加RPMI1640培养液稀释)、胎牛血清。膀胱癌细胞株。1.2实验分组实验组:靛玉红...  (本文共2页) 阅读全文>>

兰州大学
兰州大学

蛇葡萄素(Amp)诱导人膀胱癌细胞株SW780凋亡的研究

目的:研究蛇葡萄素体外对人膀胱癌细胞株SW780增殖的抑制作用及凋亡机制的探索。方法:①采用MTT比色法检测Amp处理人膀胱癌细胞株SW780 48h、72h后对其增殖的抑制作用;②荧光显微镜观察不同浓度Amp作用人膀胱癌细胞株SW780后细胞的凋亡状态的变化情况;③采用激光共聚焦显微镜检测不同浓度Amp对人膀胱癌细胞株SW780线粒体膜电位、细胞pH值及细胞内Ca2+度的影响;④Western Blot检测不同浓度Amp作用于人膀胱癌细胞株SW780 48 h后p-Bcl-2、Bax与Cleaved caspase-3蛋白的表达情况与Amp 150 μgml处理人膀胱癌细胞 SW780 12 h、24 h、48 h 后 p-Bcl-2、Bax 与 Cleaved caspase-3 蛋白的表达情况。结果:C①MTT法体外实验结果表明:在Amp浓度分别为60μg/ml、72μg/ml、87 μg/ml、104 μg/ml、125...  (本文共63页) 本文目录 | 阅读全文>>

重庆医科大学
重庆医科大学

干扰HMGB1表达对膀胱癌细胞株恶性行为及其化疗敏感性的影响

目的:探讨高迁移率族蛋白1对膀胱癌细胞株的恶性生物学行为的作用以及其对膀胱癌化疗耐药的影响。方法:20例膀胱肿瘤以及相应癌旁组织,免疫组化方法检测癌和癌旁组织HMGB1表达差异;应用RNAi处理膀胱癌细胞株T24和BIU-87并分组;CCK8、流式细胞术、划痕实验和侵袭实验检测HMGB1敲低后对T24细胞增殖、周期、迁移以及侵袭能力的影响;使用共聚焦显微镜和透射电镜观察LC3荧光斑点;Western blot法检测相关蛋白的表达。结果:HMGB1在癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P0.05);CCK8结果提示,相较于Blank组和NC组,HMGB1干扰组细胞增殖受抑制;流式细胞术提示敲低干扰组中G0/G1期细胞数量增加,且吉西他滨诱导的细胞凋亡增加;划痕测试法和Transwell侵袭试验显示敲低HMGB1后细胞迁移以及侵袭能力减弱;Western blot结果显示敲低HMGB1后E-cadherin蛋白表达上调,N-cadher...  (本文共45页) 本文目录 | 阅读全文>>

《山东医药》2009年46期
山东医药

稳定高表达增强型绿色荧光蛋白基因膀胱癌细胞株的构建

绿色荧光蛋白(GFP),特别是增强型GFP(EGFP)作为一类新型基因,以其独特的生物学特性可以对活细胞的蛋白质分布、基因表达及标记细胞的组织分布等进行实时、非侵入、高敏感度的检测,目前已广泛应用于肿瘤研究领域。要利用GEP作为标记基因在体内监测肿瘤的生长和转移,首先必须获得稳定高表达GEP的单克隆肿瘤细胞株。2007年11月~2008年6月,我们利用脂质体将EGFP真核表达质粒(pEGFP-N3)转染至人膀胱癌细胞株KU-7中,成功构建了表达EGFP的细胞株KU-7/EGFP,为膀胱癌生长机制的实时可视化研究奠定了基础。1材料与方法1.1实验材料细胞株:人膀胱移行细胞癌细胞株KU-7(由山东省医学科学院基础医学研究所提供)。主要试剂:pEGFP-N3、RPM I1640、胎牛血清、DMEM无血清培养基,琼脂粉、胰酶、DMSO,脂质体转染试剂盒。实验动物:裸鼠BALB/Cnu/nu(购于山东大学实验动物中心)12只,4~6周龄,...  (本文共3页) 阅读全文>>

《西安交通大学学报(医学版)》2007年05期
西安交通大学学报(医学版)

水飞蓟宾对人膀胱癌细胞株5637增殖的抑制作用及其机制

水飞蓟素(SM)是从菊科植物水飞蓟中提取的黄酮类化合物,其组份中水飞蓟宾(silibinin,SB)含量最多,生物活性也最强。已知SB具有抗自由基活性、抗脂质过氧化、抑制5-脂氧合酶等多种作用。近几年来研究还发现SB对各种上皮源性的肿瘤如前列腺癌、结肠癌、膀胱癌、肺癌等均具有良好抑制作用,并且已进入治疗前列腺癌的I期临床试验,但关于SB对膀胱癌的作用,国内外研究甚少。本文将研究SB在体外对人膀胱癌细胞株5637的抗增殖作用及其相关机制。1材料与方法1.1细胞株人膀胱癌细胞株5637购自美国ATCC细胞库。1.2主要试剂水飞蓟宾SB(C25H22O10·H2O)为美国Sigma公司产品,相对分子质量500.23;RPMI-1640培养液为GIBCO公司产品;胎牛血清为杭州四季清生物制品公司产品;四甲基偶氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)为美国Sigma公司产品;脱氧核苷三磷酸(dNTP)、RNA酶、聚合酶链反应(PCR)的相...  (本文共4页) 阅读全文>>