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外源DNA导入小麦的分子育种实践

利用花粉管通道法将具有高光合效率的C4植物高粱的DNA导入普通小麦陇春13,成功选育出了高产、抗逆、耐盐碱小麦新品系89122,较原受体增产21.06%,在盐碱地比当地主栽品种V 26增产10.5%,比原受体增产22.5%,光合效率明显提高,通过RAPD鉴定表明,高粱基因组部分片断已经整合到  (本文共5页) 阅读全文>>

河北农业大学
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低剂量辐射对HMW-GS基因转化小麦的影响

本试验主要有两方面研究内容:1.用剂量为0.5KRad、1.0KRad和1.5Krad的γ射线照射孕穗期的小麦,开花期利用花粉管通道法将HMW-GS 5+10亚基基因导入小麦;2.用剂量为0.5KRad、1.0KRad、2.0KRad和5.0KRad的软γ射线照射小麦幼胚后诱导愈伤组织,恢复培养后用基因枪法导入HMW-GS5+10亚基基因。目的是利用辐射与遗传转化相结合的方法,将优质蛋白亚基HMW-GS5+10基因导入小麦中改良其品质,同时研究低剂量辐射对遗传转化的影响,确定促进小麦遗传转化的活体和幼胚的适宜照射剂量。主要研究结果如下:对13个基因型的幼胚进行培养效果研究。结果表明,分化率和培养力均存在基因型差异,而各基因型的出愈率差别不大。农大718、龙麦29和龙麦8培养力较高,是较理想的转化试材。三种外植体(幼胚、幼穗和成熟胚)培养效果表明,幼胚、成熟胚的出愈率基本相同,高于幼穗,且差异达极显著。分化率差异较大,高低趋势为幼...  (本文共96页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东农业大学
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用花粉管通道法将豌豆DNA导入小麦及其后代的分子验证

在我国小麦产量已处于较高水平的前提下,改善和提高小麦品质就成为育种工作者一项迫切的任务。本研究通过花粉管通道法将豌豆基因组DNA导入高产低蛋白小麦品种鲁麦22号,以期提高其蛋白质含量,并探讨该方法在改良小麦品质方面的作用。以筛选的变异体T220X为材料,对其醇溶蛋白、同工酶表达和DNA水平上的差异以及蛋白质含量的变化等方面进行了研究,获得了如下结果:1.种子醇溶蛋白电泳结果显示,变异体T220X酶带与受体鲁麦22号相比,既有新的酶带增加,也有酶带缺失的情况。说明外源DNA的导入影响到醇溶蛋白组分的变化,根据醇溶蛋白基因定位,初步认定外源DNA影响到小麦的第一或者第六号染色体。2.小麦幼苗期过氧化物酶活性的测定显示,变异体T220X的酶活性高于受体鲁22;过氧化物酶电泳显示,T220X和鲁22过氧化物酶在酶带深浅和数目方面都存在差异,说明外源遗传物质已影响到过氧化物酶的变化。3.RAPD分析结果显示,变异体T220X和受体鲁22在...  (本文共43页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东农业大学
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λDNA导入中国春后代变异体的遗传分析

以中国春及入DNA导入中国春后产生的变异体为研究对象,对其形态性状、染色体、茎秆组织解剖、蛋白质和DNA上的差异进行了分析,获得如下结果:1.λDNA导入中国春后D_(1)代未出现明显形态性状变异,D_(2)代在株高、茎秆硬度、穗长、穗粒数、抗倒性等方面出现了变异,变异率为31.67%。2.对导入λDNA的中国春D_(1)、D_(2)代进行细胞学观察,观察到了单价体、染色体落后、染色体桥、微核和细胞多极分裂等异常现象。变异率为D_(1)代为25.54%,D_(2)代为24.05%。3.对变异体D_(2)34、D_(2)37和受体的茎秆组织结构解剖结比较,变异体在机械组织细胞层数、机械组织的细胞壁厚度、微管束大小以及单茎微管束数量等方面均较受体产生较大差异,统计分析表明差异达到极显著水平。4.分析1O个变异体均较受体过氧化物酶带数量减少,表达活性存在差异。其中D_(2)34、D_(2)37、D_(2)45较受体新增Rf为0.294...  (本文共58页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
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授粉后外源DNA导入技术在春小麦抗条锈病育种中的应用

为了从小麦亲缘种属中向小麦引进抗条锈病基因,解决普通小麦内抗病基因资源贫乏,现有抗源抗性不够理想的难题,本研究利用花粉管通道途径在授粉后3-6小时内将燕麦总DNA导入到宁夏主栽品种宁春4号小麦中,创造变异材料,将燕麦的抗条锈病基因导入到普通小麦中,为小麦育种提供抗条锈病的新种质。1、选用4种DNA提取方法,并进行比较,发现4种提取方法所得的DNA纯度基本均符合导入的质量标准;DNA的浓度也达到分子育种所要求的不能低于200μg/ml的要求;不同的植物采取不同的DNA提取方法,其DNA的提取率不同;植物种类与提取方法互作效应的方差分析表现为极显著。2、对供体、受体、导入后代各变异品系在宁夏当地进行连续多年(1998-2004)的成株期混合菌种的抗病性鉴定和在陕西杨凌两年(1998-1999)的分生理小种鉴定。结果显示:供体对小麦条锈菌免疫,受体对小麦条锈菌各生理小种严重感染,共筛选获得对条锈病抗性较好品系5个。这些结果证明供体燕麦...  (本文共48页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北农业大学
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外源DNA直接导入高梁的研究

将具有植株高大、茎秆多汁、含糖量高、抗病、生物产量高且生育期长等特点的热带高粱DNA通过花粉管通道导入到黑龙江省当地高粱品种中,以探讨此项技术用于高粱育种的可行性。于受体开花受粉后60min左右剪掉柱头,将供体DNA滴于切口处。导入后代出现了数量性状及质量性状等诸多性状的变异,变异性状包括农艺性状、育性、抗病性、含糖量及籽粒品质性状等。各性状的变异比率不同,且D_2代的质量性状分离比例不符合孟德尔遗传规律。对导入后代的品质性状的测定表明,有4个导入后代的淀粉含量高于受体,占总数的6.9%;3个导入后代的支链淀粉含量高于受体,占总数的5.2%;8个导入后代的单宁含量低于受体,占总数的11.4%。且出现了后代含量均高于或低于供体与受体的结果。将含糖量高的高粱DNA导入后,获得了15个高于受体含糖量的导入后代,占总数的7.9%。其中有8个导入后代的含糖量既高于受体,又高于供体,这是常规育种所不能得到的。将抗病性高于受体的DNA导入后,...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>