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转染抑癌基因KLF6对前列腺癌PC-3细胞的作用研究

目的:研究抑癌基因KLF6对人前列腺癌细胞系PC-3细胞的生长增殖、细胞周期和对Bc l-2和Cyc lin D1蛋白表达的影响及其可能的作用机制。方法:利用RT-PCR法克隆目的基因KLF6,采用阳离子脂质体介导将含或不含KLF6的pEGFP-C1质粒转染入PC-3细胞,分别作为转染组和对照组。分别进行噻唑蓝(MTT)法观察PC-3细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期比例变化和凋亡率,免疫组化法观察PC-3细胞Bc l-2和Cyc lin D1的表达水平变化。结果:转染  (本文共4页) 阅读全文>>

四川大学
四川大学

转染抑癌基因KLF6对前列腺癌PC-3细胞作用的实验研究

近来发现野生型抑癌基因KLF6在前列腺癌中的突变率高达77%,且有高度特异性。本研究克隆了野生型KLF6基因,将其重组质粒转染入前列腺癌PC-3细胞,观察了KLF6对PC-3细胞生长增殖、细胞周期、对Bcl-2和Cyclin D_1蛋白表达的影响等,分四个部分简述如下。第一部分:抑癌基因KLF6的克隆及质粒的构建[目的] 从正常人体中提取总RNA,利用RT-PCR法反应获得目的基因野生型KLF6的cDNA片断,构建具备可进行细胞转染和容易被识别筛选的KLF6-pEGFP-C_1质粒载体。[材料和方法] 应用Trizol法从人体正常肝脏细胞中提取mRNA,按GeneBank公布的野生型KLF6基因序列及文献设计引物序列:5’端引物:5’-AAGGTACCATGGACGTGCTCCCTATGTGC-3’;3’端引物:5’-CGTCTAGATCAGAGGTGCCTCTTCATGTG-3’。RT-PCR反应在94℃lmin,60℃1.5...  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军医学院
中国人民解放军医学院

KLF6基因表达下调在肾透明细胞癌远处转移中的作用及其机制研究

目的:肾细胞癌是泌尿系统最常见的恶性疾病之一,在所有的泌尿系统肿瘤中,肾癌的发生率和死亡率为第二位。肾透明细胞癌是肾细胞癌中最常见的病理类型,对放化疗不敏感,临床上缺乏有效的预测指标及治疗靶点。前期芯片结果提示在转移性肾透明细胞癌原发灶肿瘤组织中转录因子KLF6的表达下调,E2F1的表达升高。因此本课题探讨了KLF6和E2F1在肾透明细胞癌远处转移中的作用和可能的作用机制。方法:①将配对的4例原发转移性肾透明细胞癌以及5例原发未转移肾透明细胞癌组织样本,使用Affymetrix Human Genome U133 Plus 2.0 Array进行]mRNA微阵列芯片筛选。t检验筛选分组间具有明显表达差异的基因(P0.05)。随后利用实时定量PCR和western blot在扩大的样本量中检测差异基因KLF6 mRNA表达水平和蛋白表达水平,验证芯片结果。②肾癌细胞系(769-P,786-O,Caki-2,以及OS-RC-2)的体...  (本文共80页) 本文目录 | 阅读全文>>

《右江民族医学院学报》2015年01期
右江民族医学院学报

KLF6在非小细胞肺癌组织中表达的探讨

目的研究Kruppel样因子6(Kruppel-like factor6,KLF6)蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中表达情况,探讨其与NSCLC临床病理特征的关系。方法收集NSCLC标本92例为NSCLC...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国当代医药》2012年34期
中国当代医药

KLF6在口腔癌细胞恶性生长中的作用机制的实验研究

目的探讨KLF6在口腔癌细胞恶性生长中的作用机制。方法应用免疫组化法检测95例口腔鳞癌组织和95例正常口腔黏膜组织中KLF6、p21和cyclin D1的表达。结果 KLF6、p21,和cyclin D1在...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国实用神经疾病杂志》2014年08期
中国实用神经疾病杂志

KLF6在帕金森病体外模型中对多巴胺能神经元存活的影响

目的在帕金森病体外模型的多巴胺能神经元中,探讨KLF6的变化及意义。方法用100uM的MPP+处理多巴胺能细胞系SN4741细胞,制造帕金森病体外模型。用实时定量PCR和western blot检测KLF6的mRNA以及蛋白水平的变化。通过慢病毒感染在SN4741细胞中过表达KLF6,然后用western blot检测病毒感染后KLF6的表达量。在SN4741细胞中过表达...  (本文共3页) 阅读全文>>

《生物学杂志》2012年01期
生物学杂志

大黄鱼KLF6基因分子克隆和特征分析

KLF6具有抗细胞增殖的特性,在抑制肿瘤细胞方面起着重要作用。在获得KLF6基因EST序列的基础上,克隆到了KLF6基因,全长1185 bp,其中5'端198 bp,3'端333 bp,开放阅读框654 bp,编码217个氨基酸。与K...  (本文共4页) 阅读全文>>