分享到:

雷公藤内酯醇对小鼠前列腺癌细胞株RM-1的影响

有学者发现雷公藤内酯醇(Triptolide,TL)对数种肿瘤细胞的生长具有抑制作用,并推测该作用是通过诱导肿瘤细胞分化和凋亡而实现的,但对其确切的抗肿瘤作用机制尚不明确。为此,本项研究以前列腺癌细胞为实验对象,观察了TL的抗肿瘤作用,旨在阐明TL的抗前列腺癌的作用机制,为临床提供有效的治疗药物。1材料与方法1.1实验细胞小鼠前列腺癌细胞株RM-1由吉林大学前列腺疾病防治研究中心提供。1.2试剂Trizol试剂购自Invitrogen公司。M-MLV、Rnasin Ribonuclease Inhibitor为Promega公司产品。ExTaq酶(Takara公司)。PCR引物由上海生工生物技术有限公司合成。免疫组化SABC染色试剂盒,bcl-2、caspase-3抗体购自武汉博士德生物有限公司。TL(纯度为99.9%)购自中国医学科学院皮肤病研究所,用DMSO配制为2g/L储备液,微孔滤膜(0.22μm)滤过除菌,-20℃保存...  (本文共5页) 阅读全文>>

黑龙江中医药大学
黑龙江中医药大学

雷公藤内酯醇对小鼠前列腺癌作用及其机制的研究

目的:本实验在应用导师经验方治疗前列腺癌取得较好临床效果基础上,通过体内、体外实验,探讨方中有效抗癌成分雷公藤内酯醇对小鼠前列腺癌细胞株RM-1和小鼠前列腺癌模型的增殖抑制作用及其可能机制,以期为临床提供安全有效的抗前列腺癌药物。方法:体外实验采用小鼠前列腺癌RM-1传代细胞,用MTT实验检测TL对RM-1细胞的增殖抑制作用;用吖啶橙荧光染色检测TL对RM-1凋亡细胞形态学影响;用流式细胞术分析TL对RM-1细胞周期及凋亡峰的作用;用梯状电泳方法检测TL对RM-1细胞DNA的凋亡作用;用RT-PCR法检测TL对RM-1细胞caspase-3、bcl-2 mRNA表达水平的影响。体内实验采用C57BL/6小鼠皮下注射RM-1细胞,建立前列腺癌动物模型,检测肿瘤体积和重量计算肿瘤生长抑制率;TUNEL技术检测前列腺癌组织中凋亡细胞;免疫组化检测方法观察药物对实验动物肿瘤组织caspase-3基因及其蛋白bcl-2表达水平的影响。结果...  (本文共105页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国男科学杂志》2002年02期
中国男科学杂志

转单链鼠白介素12基因前列腺癌RM-1细胞的致瘤性观察

白介素 12 (IL 12 )呈独特的异二聚体结构 ,由P35、P4 0两个亚基组成 ,具有多种生物活性 ,在抗肿瘤、抗感染以及自身免疫疾病的治疗中具有重要的应用价值。本研究首次将单链mIL 12应用于前列腺癌的基因治疗 ,通过致瘤性观察 ,探讨其免疫基因治疗的可行性。材料与方法一、材料1.动物及细胞株 C5 7BL/ 6小鼠 ,雄性 ,6~ 8周龄 ,购自第二军医大学实验动物中心。2 .质粒 腺病毒穿梭质粒 pAdCMVmIL 12、为本室构建 ,重组腺病毒AdLacZ以及腺病毒大片段PBHG10由美国休斯顿AdersonCancerCenter惠赠。二、方法1.重组腺病毒AdmIL 12的收获 用脂质体法将穿梭质粒 pAdCMVmIL 12与大片段PBHG10共转染 2 93细胞 (可提供E1区蛋白 ) ,使大、小片段在 2 93细胞内同源重组 (9.8~ 15 .8mu) ,继续培养2 93细胞 ,观察病变效应。收集病变的...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中药材》2009年02期
中药材

天花粉蛋白诱导小鼠前列腺癌细胞RM-1凋亡的实验研究

天花粉蛋白(TCS)是中药天花粉的主要活性成分,从栝楼的根块中提取,通常认为它是一种核糖体抑制蛋白(RPI)〔1〕。TCS的抗肿瘤作用最早是发现它对绒毛膜滋养层细胞有选择性的杀伤作用〔2〕,后来发现部分肿瘤细胞株对TCS均较敏感,如胃癌、肝癌、结肠癌和血液肿瘤等等〔3〕。本研究通过将TCS作用于小鼠RM-1前列腺癌细胞,检测TCS诱导RM-1细胞凋亡情况,探讨其诱导凋亡发生的机制。1材料与方法1·1材料天花粉蛋白注射液购于上海金山制药有限公司。RPM I-1640、小牛血清、HEPES及二甲基亚砜(DMSO)、MTT购于上海实生生物科技公司。小鼠前列腺癌细胞系RM-1由中科院上海生化细胞研究所提供。Bax单克隆抗体购于Santa Cruz生物科技。1·2方法1·2·1细胞培养:将RM-1细胞置RPM I-1640培养液中,37℃、5%CO2培养箱中培养,48~72 h传代1次,0·25%胰酶(含EDTA 0·02%)消化。实验时...  (本文共4页) 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

20(S)-原人参二醇对小鼠前列腺癌RM-1细胞体外作用的实验研究

目的:观察20(S)-原人参二醇(以下简称PPD)对体外培养小鼠前列腺癌细胞系RM-1的影响并初步探讨其机制。方法:体外培养RM-1细胞,用不同浓度的PPD进行处理,MTT法检测PPD对RM-1细胞增殖的抑制作用,吖叮橙/溴化乙锭染色、流式细胞术、脱氧核酸末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。RT-PCR方法检测bcl-2、bax、caspase-3、AR基因的mRNA表达。免疫细胞化学染色观察caspase-3、bax的蛋白表达。结果:(1)MTT结果显示:PPD可抑制RM-1细胞增殖,呈剂量依赖性;(2)吖叮橙/溴化乙锭染色、流式细胞术、TUNEL实验结果显示:PPD可诱导RM-1细胞凋亡,呈剂量依赖性;(3)RT-PCR结果显示:PPD作用于RM-1细胞后,bax,caspase-3的含量明显高于对照组,而bcl-2,AR的含量明显低于对照组(p0.05);(4)免疫细胞化学染色结果显示:PPD作用于RM-1细胞后,cas...  (本文共54页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

20(S)-原人参二醇对小鼠前列腺癌RM-1细胞移植瘤的治疗作用

目的:观察20(S)-原人参二醇(protopanaxadiol,PPD)对小鼠前列腺癌RM-1细胞体内的抑制作用。方法:利用免疫组化、逆转录聚合酶链反应和Western blot等方法,从mRNA水平、蛋白水平观察Bcl-2、Bax、Caspase 3、Cyclin D1和AR在肿瘤组织中的表达。结果:①HE染色可见:模型组肿瘤细胞染色均一、结构完整、细胞间连接紧密,肿瘤组织中有较多小血管。PPD组肿瘤细胞核固缩明显,胞膜核膜界限不清,细胞间连接稀疏,肿瘤组织中血管明显减少。②免疫组化染色显示:与模型组比较,PPD组肿瘤组织Bcl-2表达下调,Bax表达上调,Caspase 3表达上调。③RT-PCR产物半定量电泳图谱显示:与模型组相比,PPD可使Bcl-2,Cyclin D1和AR基因表达明显下调,Bax和Caspase 3基因表达明显上调。④Western blot结果显示:与模型组比较,PPD组肿瘤组织中Cyclin D...  (本文共54页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国煤炭工业医学杂志》2008年05期
中国煤炭工业医学杂志

三氧化二砷诱导小鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡的研究

前列腺癌多发生于老年男性,美国自从进行PSA集团检诊以来,临床前列腺癌的检出率明显上升[1]。前列腺癌占泌尿系统肿瘤住院患者的比例由20世纪60年代的3.3%上升到90年代的13.4%[2]。另一组数据则认为其已位居泌尿系统肿瘤的第三位[3]。对该类患者的有效治疗的研究已日益成为临床上关注的热点。自我国学者发现应用三氧化二砷(As2O3)可有效治疗急性早幼粒细胞性白血病以来,对其药理作用机制的研究逐渐深入[4],研究范围正在扩大[5]。而对As2O3作用于前列腺癌的机制报道尚不多见[6]。故本研究的目的是探讨As2O3干预体外培养小鼠前列腺癌细胞凋亡与增殖的作用机制。1材料与方法1.1主要试剂As2O3购自Sigma公司,加入适量的NaOH和0.01mol/L PBS(pH7.4)配制成1.0mmol/L母液,4℃保存,使用时用RPMI1640培养液稀释成所需要的浓度;四甲基偶氮唑蓝(MTT)为美国Sigma公司产品。1.2细胞...  (本文共2页) 阅读全文>>