分享到:

孕早期绒毛膜细胞直接制备染色体的研究

近年来,利用绒毛为材料进行产前诊断染色体病、性连锁遗传病与基因病,已成为优生科学和予防医学的新方向.1984年10月份以来,我们在学习Siinoni‘·2和周宪庭’资料的基础上,在方法学上进行了一系列的摸索和研究,建立了我们的低温常规操作法,结果较满意,现报告如下。材料和方法 一、材料 选取停握42~81天要求人流的孕妇,挫询问病史、妊娠史,服药史及妇检.从刮出组织中选取新鲜绒毛组织,盛无菌生理盐水内及时检查。每例制片4张以上,8。例共制片572张。 二、制备染色体的方法 (一)常规法:1.将新鲜绒毛组织在无菌生理盐水中漂洗,从中挑选剪取约Zomg绒毛组织,置含有3 rnl RPMI 1640营养液中,pH7.2。2.用虹膜剪剪6一7次,加秋水仙素,使其最终浓度为 0.2卜g/,nl,置37℃恒温箱中l,j‘时.3.吸弃营养液,加3ml 1.5肠拘栋酸钠溶液,再置37℃温箱中低渗15分钟.4.每瓶加数滴3:l甲醇冰乙酸固定掖,予...  (本文共3页) 阅读全文>>

《广西医学》1987年03期
广西医学

孕早期绒毛细胞直接制备染色体简易法的研究

绒毛膜细胞直接制备染色体是孕早期宫内诊断的新方法,目前正日益为国内外人们所关注.研究的重点是探索一种简单、快速、准确、成功率高的诊断方法.我们受Sim。ni等人用早期滋养层细胞进行产前诊断的启发,它是根据绒毛细胞具有自发的有丝分裂,且能反映胎儿的染色体组成的特点,作为染色体畸变宫内诊断的理论依据.我们结合我院遗传室现有的条件,从1984年6月开始,对孕早期绒毛细胞直接制备染色体的方法进行研究,我们采用simoni方法共做79例,4例无染色体,染色体出现率7别79,能进行分析者21例,但染色体形态不好,弯曲,带纹不清晰,针对存在问题,我们对Sirnoni方法进行改良,改变Simoni方法的低渗液、解离液,业增加预固定.简易法的特点:①低渗液使用o.075MKCI与1肠柠檬酸钠l:l低渗,这样使染色体轮那清楚,染色性强,带纹清晰,且分散好.②低渗后增加预固定.③不用解离液,仅改变甲醉与乙酸的比例.应用反固定的简易烤,根据湖北省197...  (本文共2页) 阅读全文>>

《同济医科大学学报》1986年01期
同济医科大学学报

孕早期直接制备染色体方法研究

本文介绍作者于1983年9月至1984年3月用295例妊娠6一11周人工流产术或在B超指示下经宫颈抽吸的绒毛组织制片“6份(每份组织湿重10~20mg),不经培养直接制备染色体的方法。文中详细介绍了制备方法,’并对其中270份进行各项分析:发现以妊娠7~8周时分裂相出现率最高(10。肠)且最多,以后逐渐减少;绒毛组织用量以10一20mg为宜;秋水酞胺最终浓度和作用时间宜为。.04一。.4林g/ml,作用1小时.比较了不同保养液,认为...  (本文共1页) 阅读全文>>

《第四军医大学学报》1986年01期
第四军医大学学报

绒毛细胞直接制备染色体方法

近年来,利用妊娠早期绒毛直接制备染色体的方法以诊断胎儿有无染色体病,已广泛引起人们的注意。经宫颈采集绒毛通常在孕40一、一50天进行,直接制备染色体需时较短,从而使产前诊断染色体病的时间较羊水细胞培养提前10一12周,在推行优生工作中具有重要意义。 自1973年韩安国[1]首先并q用盲吸法取绒毛以检查胎儿性别以及1984年意大利Sjm。nj[2]用早孕绒毛直接制备染色体以来,国内外纷纷开展了该项研究,所获G显带皆不够满意。[3—8]1985年1月至9月初,我们共做绒毛细胞直接制备染色体lD0例,获得清晰的G显带,接近外周血染色体水平。成功率与Simoni所做接近。 材料与方法 取材选择闭经6—8周的健康孕妇100例,采用内径1.5mm,外径2mm的无毒塑料管,在无菌条件下,白宫颈缓缓插入官腔约5—6 cm,用20ml空针抽吸绒毛(盲吸法),吸出的绒毛立即放入含生理盐水的无菌平皿中,在40倍显微镜下挑选绒毛,弃除蜕膜,洗去血液。将...  (本文共5页) 阅读全文>>

《哈尔滨医科大学学报》1986年04期
哈尔滨医科大学学报

应用孕早期绒毛细胞直接制备染色体标本50例

近年来,用绒毛为材料直接制备染色体,为国内外科研工作者所瞩目。1983年意大利simoni等报道,绒毛直接制备染色体技术具有简易、快速、准确,对孕妇损失小等优点,是产前诊断的一大突破,是优生科学和预防医学的新进展。为此,我们参考Simoni和国内有关文献,从人工流产物取材6一n周的绒毛组织直接制备染色体。从1 986年1月至1986年6月共做50例,现介绍如下。再加入6 ml固定液.持续40分钟.(8)去固定液,加入lml60%冰醋酸,2~3分钟,用吸管轻轻搅动,不用吸管吹打。(9)加入甲醇3ml,从管底慢慢加入,用吸管轻轻打匀,静止10分钟.(10)离心,800转/分,去上清液.(11)再加入少许新鲜固定液,混匀,滴入预冷的冰冻玻片上(每张3滴)在酒精灯上过火焰2次. 烤片(56℃)12小时,胰酶一Giemsa染色.每例分析3~5个细胞. 材料和方法 一、材料 选自50例月经周期正常,孕龄6~n周, 要求人工流产的孕妇。32份...  (本文共3页) 阅读全文>>

《重庆医药》1986年06期
重庆医药

绒毛直接制备染色体的改良方法

山丁绒毛直接法0d此u备染色体简使、加入秋水仙胺,们顺终浓度为0.扣y。1)快速,在产前诊断染色体疾病方而己得到J’”在37℃水浴箱中低渗15~20分钟。加入3:1泛应m。我守〔11985年 4月开始绒毛直按低 同定液(甲惭乙酸)lfu乙 预固定 5分种,渗法制备染色体的试验,汁于同年在《重庆 离心5分忡,800~1000rPm。弃上清液(下优生》杂志上作了报道。但该法存有分裂相 同)换入3:IN定液4d置入冰箱土2℃过质汾不稳定的缺点,从而影响染色体核捌分 夜。离心5分钟,800~1000rpm,换入60%析。为此删三又于M年二2川个1986年3厂 冰乙酸lin二,静耸3分帅,即加入甲醉3~进行了多次试验,H卯.版ift作川时间延K,4 nil,离心10分种,1000rP。。。换入 3:1闪从而获衬染色体形态、分放【.卜兄较以前有阶 定液4m1N冰箱过夜或冈定3小叮。离心10改进。现将该汕报X如下:分钟,800~1...  (本文共2页) 阅读全文>>

《细胞生物学杂志》1987年04期
细胞生物学杂志

绒毛滋养层细胞直接制备染色体方法

绒毛与胎儿是由同一个受精卵分化发育而成,它是胚胎的附属结构,因此其细胞染色体与基因组成同胎儿细胞是一致的。吸取绒毛比抽羊水细胞可提前八周左右进行遗传病的产前诊断,这样可以减少孕妇的精神负担,并可避免中期引产的并发症。 韩安国〔‘’早在1973年已吸取绒毛进行产前性别预测,直至1984年S涌。ni等[2J才报道100例绒毛细胞直接制备染色体方法。这一方法的最大优点,是其分裂相来自绒毛的细胞滋养层细胞的自发分裂(SPontaneous MitOSis)在培养l小时后即可进行制片,因而可以避免母体细胞污染。该文报道后立即受到普遍重视,认为这是一项开拓性工作,使产前诊断进入一个新领域。但以直接法作绒毛染色体制备是一个新问题。根据我们的经验要比羊水细胞制片难度大得多,例如分裂相少,染色体容易丢失且形态不佳,多呈弯曲和缩短,染色单体分开,G带的带纹不够清晰等。Perry等(1985)1“’认为绒毛直接法显带质量不如羊水细胞,核型分析成功率为...  (本文共3页) 阅读全文>>