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孕早期绒毛膜细胞直接制备染色体的研究

近年来,利用绒毛为材料进行产前诊断染色体病、性连锁遗传病与基因病,已成为优生科学和予防医学的新方向.1984年10月份以来,我们在学习Siinoni‘·2和周宪庭’资料的基础上,在方法学上进行了一系列的摸索和研究,建立了我们的低温常规操作法,结果较满意,现报告如下。材料和方法 一、材料 选取停握42~81天要求人流的孕妇,挫询问病史、妊娠史,服药史及妇检.从刮出组织中选取新鲜绒毛组织,盛无菌生理盐水内及时检查。每例制片4张以上,8。例共制片572张。 二、制备染色体的方法 (一)常规法:1.将新鲜绒毛组织在无菌生理盐水中漂洗,从中挑选剪取约Zomg绒毛组织,置含有3 rnl RPMI 1640营养液中,pH7.2。2.用虹膜剪剪6一7次,加秋水仙素,使其最终浓度为 0.2卜g/,nl,置37℃恒温箱中l,j‘时.3.吸弃营养液,加3ml 1.5肠拘栋酸钠溶液,再置37℃温箱中低渗15分钟.4.每瓶加数滴3:l甲醇冰乙酸固定掖,予...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国计划生育学杂志》2006年01期
中国计划生育学杂志

孕早期绒毛膜细胞原位培养和染色体制备方法的初步研究

稳定的孕早期绒毛体外培养方法,对进行遗传、生化等相关方面的研究可提供好的实验材料,特别是作为一种胎儿产前诊断的标本有着很大的应用前景。长期以来,由于各培养方法的不完善、不稳定、分裂相少、形态差、细胞损耗大等诸多难点,给实验室实际应用带来困难,因此建立一种稳定且成功率高,操作简便的绒毛膜细胞培养方法对优生优育相关的研究有着重要的意义。材料和方法一、标本来源及采集在本中心进行人工或自然流产的孕8~12周孕妇35例,在B超引导下经阴道抽取绒毛膜细胞置于装有5ml培养液的10ml无菌试管中。二、实验器材、试剂1.培养器皿CO2培养箱、一次用无菌25ml方形培养瓶、无菌吸管、低速离心机、倒置显微镜或体式显微镜。2.试剂绒毛膜细胞培养基(Com pleteAmnioMaxTM-Ⅱ,由美国GIBCO公司提供)、固定液甲醇乙酸=31、秋水仙素终浓度24ng/ml、低渗液0.8%柠檬酸三钠、胰酶终浓度0.025%、吉姆萨染液、胶原酶Ⅱ(美国s...  (本文共3页) 阅读全文>>

《石河子医学院学报》1986年01期
石河子医学院学报

孕早期绒毛膜细胞直接制备染色体的畸变观察

绒毛滋养层细胞是受精卵有丝分裂的衍生物,它准确反映了胎儿的遗传特性.而孕妇与其胎儿在某种意义上,可视为一个整体的两个部份。人类长期遭受有害物质地浸袭,有些又可透过胎盘屏障影响胎儿.利用孕早期绒毛膜细咆直接制备的染色体,进行畸变观察,无疑是进行围产医学、产前诊断研究的有效途径之一。鉴于目前缺乏孕早期绒毛膜细胞畸变的资料报道,现将我们所观察的76例结果报告如下,以供参考.材料和方法 一、材料 选取停经42~81天要求人流的孕妇,经询问病史、妊娠史、服药史及妇检.从刮出组织中选取新鲜绒毛组织,盛入无菌生理盐水内及时送检。 二、制备染色体方法 详见孕早期绒毛膜细胞直接制备染色体的研究‘.附表绒毛细胞与周血染色体畸变的比较亚二倍体l276 344其它畸变多倍体1 2 126 7 15 40内复制12八甘八01Q︸n乙月咬i’6例}肠1 00_0 197_91 3 481 70_64,].几咋山64100405超二倍沐1217822 0.4...  (本文共4页) 阅读全文>>

《宁夏医学院学报》1985年03期
宁夏医学院学报

孕早期绒毛膜绒毛细胞直接制备染色体标本核型分析100例

近年来,医学领域中预防染色体病进行产前诊断的一个重要手段为羊水细胞培养染色体核型分析,‘但此法不能应用于孕早期,所需时间较长,无菌条件及操作技术要求较高;孕早期用绒毛膜绒毛细胞进行胚胎诊断则简便、快速,是当前国内外的一个重点研究课题。自从70年代我国韩安国等(鞍山,1975)「’二首创通过宫颈吸取绒毛膜绒毛细胞进行核型分析以来,国内外B ramba-t呈和Sin;on(1983)又、、R.H.T.Ward和B。Modell等(1983).一艺二以及孙念估等一3〕不少学者和单位相继开展了改进和完善本技术的研究;晚近Michel J.J.VekemanS等 (1985)的报道〔‘,,对绒毛膜绒毛细胞取样检测的临床经验、术时并发症及孕妇们的态度也有较全面详细的述介。 我们宁夏回族自治区宁夏医学院妇产科学教研室,参考1984年全国第二届优生会议上交流的各地经验和其它资料,于1985年2一5月,结合100余例人工流产,开展了在孕早期经宫颈...  (本文共4页) 阅读全文>>

《广西医学》1987年03期
广西医学

孕早期绒毛细胞直接制备染色体简易法的研究

绒毛膜细胞直接制备染色体是孕早期宫内诊断的新方法,目前正日益为国内外人们所关注.研究的重点是探索一种简单、快速、准确、成功率高的诊断方法.我们受Sim。ni等人用早期滋养层细胞进行产前诊断的启发,它是根据绒毛细胞具有自发的有丝分裂,且能反映胎儿的染色体组成的特点,作为染色体畸变宫内诊断的理论依据.我们结合我院遗传室现有的条件,从1984年6月开始,对孕早期绒毛细胞直接制备染色体的方法进行研究,我们采用simoni方法共做79例,4例无染色体,染色体出现率7别79,能进行分析者21例,但染色体形态不好,弯曲,带纹不清晰,针对存在问题,我们对Sirnoni方法进行改良,改变Simoni方法的低渗液、解离液,业增加预固定.简易法的特点:①低渗液使用o.075MKCI与1肠柠檬酸钠l:l低渗,这样使染色体轮那清楚,染色性强,带纹清晰,且分散好.②低渗后增加预固定.③不用解离液,仅改变甲醉与乙酸的比例.应用反固定的简易烤,根据湖北省197...  (本文共2页) 阅读全文>>

《天津医药》1985年04期
天津医药

关于孕早期绒毛膜细胞直接压片法快速制备染色体的方法学研究

自Mori夕s用Weistin试制的子宫镜,吸取孕龄8周以上妇女绒毛成功后‘,近30年来,随着优生和产前诊断的深入开展,不断探讨绒毛的产前诊断价值。在前20年,主要致力改进取材器械,原金属硬管已为有一定韧性的光导纤维内窥镜所取代,其直径也从2~smm缩小到1.smm,增加了绒毛取材的安全性,近10年,则致力于快速培养和直接制备染色体,.以提高绒毛取材产前诊断染色体疾病的有效性。制备绒毛染色体的时间己从数周缩短到4~7天,甚至5~6小时‘、“、卜’。。人们愈来愈认识到,能否改进绒毛膜细胞直接制备染色体的方法,观察自发性有丝分裂旺盛的滋养叶细胞,是进一步实现早期、快速、简易、安全和准确产前诊断的关键。 材料和方法 我们于1984年5月,选取5~15mg的人工流产孕早期绒毛膜细胞,用直接压片制备染色体法,观察孕早期自发性有丝分裂活跃的滋养叶细胞的染色体。至同年9月,已连续、无选择地应用压片法,直接快速制备染色体53例,压片265张,经...  (本文共2页) 阅读全文>>