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PCR技术在法医生物学中的应用

正.引论遗传学认为,DNA是人体性状及遗传变异的物质基础,它是遗传信息的携带者.DNA决定着我们的肤色、性别、身高、健康状况等个体特征.每个人的DNA都是不完全一样的。在法医学上,往往需要鉴别现场留下的物证是否同于犯罪嫌疑人.传统的方法主要是通过指纹、脚印、唇纹、化学物质等物证进行核对,这在一些憎况下能起到作用.然而,有时侯犯罪分子相当狡猾,或者现场被破坏的很严重,根本找不到上述痕迹.但是在理论上,只要犯罪分子在现场留下血渍、精斑、头发、阴毛、唾液等,通过分析其中的DNA,仍可查获真凶.另外,也可通过分析在现场找到的死者的残留物(如毛发、牙齿、骨骼等)中所含的DNA,来验明他们的真实身份。以前由于这些物证中DNA的含量甚微,再加上无法排除在分析时受到的干扰,DNA分析还或多或少是一种幻想。直到1985年,诺贝尔奖获得者Kapomultis[’]发明了聚合酶链反应(polpoerasechainreaction,PCR)。再加上1...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国卫生检验杂志》2005年11期
中国卫生检验杂志

聚合酶链反应检测水痘带状疱疹病毒DNA

水痘带状疱疹病毒(VZV)是引起人类水痘、带状疱疹的病原体。前几年我们曾建立了VZV蚀斑减少中和试验,VZV抗体ELISA及IFA等检测方法[1~3]。本文使用PCR检测VZV-DNA,取得了较好的结果,现报告如下:1材料与方法1·1病毒及病毒DNA的提取1·1·1 VZV1、VZV3、VZV6、VZV9毒株分别从水痘和带状疱疹病人水疱液中分离获得[4]。毒株接种Vero-E6细胞,37℃培养,带毒传2~3代,待细胞病变达70%以上时,用胰酶消化细胞,离心弃上清,收集细胞,加PBS重悬细胞,超声200 W10 m in,离心弃沉淀,取上清液用于DNA的提取。1·1·2水痘患者急性期水疱液、健康人血清离心后的上清液直接用于DNA的提取。1·1·3 Vero细胞DNA对照液提取方法同1·1·1。1·2主要试剂Taq酶、dNTP、10×PCR buffer、DNA M arkers购于上海生工生物工程技术服务有限公司。1·3引物设计及...  (本文共1页) 阅读全文>>

《青岛医药卫生》1998年05期
青岛医药卫生

应用PCR检测406例HBV-DNA与HBVM关系的初步观察

本文应用聚合酶链反应(PCR)技术,测定了406例患者的HBVM,HBV一DNA,对HBVM和HBv一DNA的关系作了深入分析,进一步探讨了HBv DNA对献血者体检与临床应用价值。1材料和方法 1.1检测对象:406份血清标本均为门诊及住I完病例。年龄5一70岁,男297例、女109例。标本均按顺序收集,未作任何选择。 1.2方法:HBV一DNA采用常规PCR法,试剂盒购自上海复华生物技术开发中心。 HBVM试剂盒均购自中国同位素公司北方免疫试剂研究所,采用ELISA分步法进行测定。2结果 2.1 HBvM和HBV一DNA检测结果的比较(见表l)。表1 HBV一DNA与HBVM检测结果比较HBVM HBV一DNAHa,勺杭一H价H氏Ag挽一H浅杭H】戈杭H压坛M例数 一+一+十107 一+一一一8阳性例数(%)?7(7 1.96)7(3,.50)31(3 1.63)17(30.36)2(28.57)3(5 .88) l(6 ....  (本文共2页) 阅读全文>>

《南华大学学报(医学版)》2006年05期
南华大学学报(医学版)

慢性乙型肝炎HBV-DNA与e系统的关系研究

本院于2001年3月~2003年6月采用聚合酶链反应法(PCR)和ELISA法,对95例慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA及乙型肝炎病毒标志物进行了检测,并给予了治疗,以探讨HBV-DNA与e系统的相关性,现将结果报道如下。1材料与方法1.1研究对象2001年3月~2003年6月在本院门诊及住院的慢性乙型肝炎患者95例,男78例,女17例,平均年龄36.8岁;其中轻度45例,中度30例,重度20例。临床诊断符合1995年5月北京第5次全国传染病寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案。所有病例均剔除合并甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染者,剔除合并酒精性肝损害、使用肝毒性药物、自身免疫性肝病或各种代谢性肝病的患者。1.2研究方法HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HCV、HDAg、抗-HD、抗-HAV-IgM、抗-HEV-IgM均采用ELISA法检测,HBV-DNA采用PCR法检测。操作步骤及结果判定按说明书进行。除抗...  (本文共3页) 阅读全文>>

《青岛医药卫生》1996年10期
青岛医药卫生

聚合酶链反应检测HBV-DNA及临床意义的再认识

聚合酶链反应〔PCR)是近年来建立的一种扩增日的基因序列的新技术,具有敏感而特异的优点‘”。我们应用PCR技术对114例肝病患者血清HBV-DNA进行了检测,并对其临床意义进行了探讨。I研究对象与方法 1.1研究对象114例均为1994年6、10月我院住院的肝病患者,根据1990年上海第六届全国病毒性肝炎会议修订标准,分别确诊为急性肝炎(AH)12例、慢性迁延性肝炎(CPH)42例、慢性活动性肝炎(CAH)41例、肝炎后肝硬化(LC)19例。 1.2方法PCR所用S片段保守区的·对引物由中国预防医学科学院病毒所提供,扩增产物为18obp。耐热DNA聚合酶及试剂均购自华美生物工程公司。PCR反应过程及扩增产物的检测均按陈渊卿‘3,等描述的方法进行。 HBVM检测应用ELISA法。试剂盒由上海实业科华生物技术有限公司提供。2结果 2.1 HBV一DNA阳性率114例肝病患者血清HBv一DNA阳性41例,阳性率为35.96%。 2.2...  (本文共2页) 阅读全文>>

《华北煤炭医学院学报》2000年02期
华北煤炭医学院学报

聚合酶链反应检测HBV-DNA的临床应用

目前,聚合酶链反应(PCR)技术在国内外已被公认为检测各种病原体的最佳手段,PCR在医学检验学中最有价值的应用领域,就是对感染性疾病的诊断。由于其灵敏度高,扩增产物污染致使其假阳性结果的可能性增加,特别在临床中对乙型肝炎病毒(HBV)的检测更易出现假阳性。对此,我们进行了ELISA法同步检测,对HBV-DNA在体内的复制情况有了进一步证实,为临床提供了更准确的依据。1 材料和方法1.1 标本来源 本院对外查体及各科室送检标本。男380例,女294例。取3ml静脉血离心取血清备用。1.2 试剂 西安第四军医大学基因研究所提供的HBV-DNAPCR诊断试剂盒。ELISA法试剂为上海科华生物制品公司产品。1.3 仪器 DTC-3型基因扩增仪,WP-92-1型紫外透射反射分析仪,DY-WZ型电泳仪。1.4 方法 1PCR法:按HBV-DNA,PCR诊断试剂盒说明书进行扩增、电泳。在紫处透射反射分析仪下观察结果:2%DP左右以红色段带为阳...  (本文共1页) 阅读全文>>