分享到:

SYBR Green实时荧光定量PCR技术平台的建立

目的建立SYBRGreen实时荧光定量PCR技术平台。方法通过摸索SYBRGreen工作液的配制方法,经典PCR检测HBVDNA方法转为SYBRGreen实时荧光定量PCR方法及建立大鼠TGF-bate1mRNA表达水平的SYBRGreen实时荧光定量PCR方法。结果SYBRGreenⅠ工作液,40×H2O溶液稳定性好,最佳反应浓度为1∶10000。HBVDNA的SYBRGreen实时荧光定量  (本文共3页) 阅读全文>>

河南农业大学
河南农业大学

PRRSV监测技术平台的建立及其在疫情预警系统中的初步应用

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的猪的严重呼吸系统与繁殖障碍疾病,是目前影响养猪业健康发展的最重要疾病之一。当前国内外采用的PRRS检测方法主要以ELISA及PCR为主。这些方法具有快速、省时等优势,但操作复杂、容易出现假阳性、假阴性。因此,建立一个快速、准确、高通量的检测技术平台用以PRRS流行预警至关重要。本论文以出入境生猪为研究对象,在前人的基础上建立了两种实时荧光PCR方法,并在国内首次建立、报道了PCR-DHPLC检测方法,将其用于出入境生猪PRRS的监控检测,对PRRS预警体系的建立和应用进行了探索,并在PRRS的防控中取得良好效果。1.建立PRRSV SYBR GreenⅠ实时荧光...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

PRRSV高致病株和经典株SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR鉴别方法的建立

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, PRRSV),属于套式病毒目、动脉炎病毒科、动脉炎病毒属的单股、正链RNA病毒。根据其基因组序列的差异,可分为欧洲型和美洲型。自1996年我国首次分离到美洲型CH-1a株以来,我国流行的PRRSV毒株均属于美洲型。猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome , PRRS)不仅是我国猪群中常见的重要疫病,也是国家兽医行政部门规定的强制免疫的疾病之一。2006年春夏季节,我国南方大部分地区猪群出现了以高热、厌食或不食、眼结膜炎、咳嗽、气喘等呼吸道症状、后驱无力以致无法站立或摇摆等神经症状及高死亡率为主要临床特征的高致病性猪繁殖与呼吸综合征,该病已给养猪业造成了巨大的经济损失。经基因组序列分析得知,高致病性PRRSV为美洲型、且Nsp2基因...  (本文共53页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)
中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)

检疫性实蝇分子生物学快速鉴定技术的研究

实蝇科Tephritidae 昆虫是双翅目Diptera 的大科之一,全世界已描述的种类超过450 属4300 余种,其中包括地中海实蝇Ceratitis capitata 在内的70 余种是农业上有重要经济意义的害虫。实蝇的鉴定是国际果蔬贸易中最突出的技术问题之一,建立检疫性实蝇特别是未成熟虫态快速可靠的鉴定方法在植物检疫上有重要的意义。本项研究以国内外普遍关注的检疫性实蝇为研究对象,测定了果实蝇属Bactrocera 和小条实蝇属Ceratitis 共10 亚属28 种检疫性实蝇的mtDNA COI 基因部分序列,获得32 条基因片段(长约670bp);对这些基因序列与已公开报道的其它同源序列进行比较分析,自行设计和筛选特异引物14 对(亚属特异引物2 对,种特异引物12 对)和TaqMan MGB 探针4 条,用于检疫性实蝇的分子生物学快速鉴定研究。主要研究结果如下: I.首次建立了SYBR Green 实时荧光PCR 快...  (本文共136页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生命的化学》2004年01期
生命的化学

实时荧光定量PCR技术及其应用

实时荧光定量PCR技术是一种多色荧光检测核...  (本文共3页) 阅读全文>>

《肿瘤》2004年02期
肿瘤

实时荧光定量PCR在肿瘤研究中的应用

聚合酶链式反应(polymerasechainreaction ,PCR)的出现使得人们对微量甚至单个细胞DNA的分析成为...  (本文共2页) 阅读全文>>

权威出处: 《肿瘤》2004年02期
《中国现代教育装备》2018年21期
中国现代教育装备

实时荧光定量PCR技术的原理及其应用

实时荧光定量PCR技术是在定性PCR基础上发展起来的一项新兴技术。通过在PCR反应体系中加入荧光基团,在整个PCR过程中实...  (本文共3页) 阅读全文>>