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不同波长激光对角膜细胞DNA的定量测定

随着近视眼发病率的上升,矫正近视的手术治疗逐渐推广,方法亦不断更新,激光角膜手术治疗近视眼已成为眼科医师十分感兴趣的新课题。以准分子激光作角膜手术的实验研究已有数年,近已初步开展临床应用。由于193nm准分子激光治疗机价格十分昂贵,氟气又是对人体有害的气体,且至今尚未能解决其光纤传递问题,并又有可能损害DNA,为此,不少学者又在寻找更为理想的波长,而中红外激光已开始被引起注意。 为了进一步了解波长对角膜细胞DNA的影响,我们选用紫外光和不同波长激光照射角膜,通过Feulgen方法染色,用显微分光光度计(microsPectroPhotometee卜MsP)检测,并作比较。 材料与方法 实验用3~4kg家兔16只(18只眼),其中3只眼作为正常对照,其余角膜分组受254nm,308nm,632.8nm和2.94“m波长照射,照射后经不同时间摘出眼球,分别作角膜上皮和内皮细胞涂片,经Feulgcn方法染色,用opTON UMSP-3...  (本文共4页) 阅读全文>>

《科技资讯》2012年15期
科技资讯

人角膜细胞在体外培养的研究进展

组织工程人角膜体外重建基本方法是取一定量种子细胞,将其成功迁入到生物相容性良好的载体中,形成结构与人角膜相似的组织工程眼角膜。来源于病人本身的自体细胞是最理想的种子细胞,其最大的优越性在于植入人体后不会引起个体的免疫排斥反应。如果能将自体细胞在体外持续扩增培养,将会对组织工程人角膜体外重建做出巨大贡献。本文拟对人角膜三种细胞在体外扩增培养的研究进展、目前存在的问题以及解决途径进行综述。1人角膜细胞概述人角膜细胞有三种:人角膜上皮细胞,人角膜基质细胞以及人角膜内皮细胞。形态结构各异的人角膜细胞在各自的区域行使着各自的生物学功能,共同维持角膜的透明度,厚度以及正常的生理功能。人角膜上皮细胞根据其形状不同分为鳞状细胞,翼状细胞以及柱状细胞。其中鳞状细胞位于表层,靠紧密连接和黏着带形成一半渗透性膜。中间为翼状细胞,细胞与细胞间靠桥粒结构连接。底层为单层的柱状细胞,三种细胞中只有柱状细胞尚有分裂能力,且它还可以分泌产生基底膜,柱状细胞靠半...  (本文共1页) 阅读全文>>

青岛大学
青岛大学

重组人IL-10基因表达载体转染角膜细胞及其抑制角膜移植排斥反应的实验研究

目的应用高免疫状态的人血液提取DNA,克隆人白介素-10(IL-10)基因,以真核表达载体pcDNA4/HisMaxB质粒构建重组的人IL-10表达载体(pcDNA4/hIL-10),体外转染培养的新西兰大白兔角膜上皮细胞、基质细胞和内皮细胞,研究人IL-10基因在角膜细胞的基因转移技术和基因转移后的蛋白质表达规律;采用pcDNA4/hIL-10在眼结膜下注射和眼前房内注射法转移基因,观察pcDNA4/hIL-10重组基因在角膜移植排斥反应控制中的作用,对角膜移植排斥反应的基因治疗进行探索性研究。材料和方法1、取高免疫状态的人血清提取人DNA,设计人白介素10(human interleukin-10,hIL-10)基因的特异性引物,进行hIL-10基因的克隆、提纯、鉴定,以pcDNA4/HisMaxB质粒为载体构建pcDNA4/hIL-10重组表达载体,纯化质粒。2、取新西兰大白兔角膜,分别培养角膜上皮细胞、基质细胞和内皮细胞...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

《解剖学报》1982年04期
解剖学报

角膜的组织学研究——角膜细胞的立体定位及其与胶原纤维的位置关系

角膜实质层主要由胶原纤维、角膜细胞及基质所组成。胶原纤维系角膜细胞所合成,故二者在生理上的密切关系是不言而喻的。至于它们在解剖上的位置关系,迄今还不完全清楚。 多年来文献一直认为角膜实质层的胶原纤维平行排列成许多板层〔’一‘。〕,角膜细胞则位于板层之间或在板层间的基质中「2一4,“,’”,’3,’6一202,同一平面的细胞突起相互连接〔,4,2’,2,〕。此外,E川二eeB认为角膜细胞位于板层间相互连接的间隙系统内阅。有的作者指出,人类的角膜细胞前层(即面向上皮层的胞膜)常在板层内或板层间,而后层只在板层间〔“2〕。另一些作者则分别指出,角膜细胞沿胶原纤维束分布以3”,每条纤维都有一个扁平的细胞核.‘“;角膜细胞.夹在胶原纤维之I’ed〔,5〕或被胶原(蛋白)包围形成细胞胶原单位(Cell eollagen unit)〔’9二。显然这些观点不尽一致,而且近来资料表明,角膜实质层的胶原纤维亦非排列成“板层”〔,6习,因而进一步探讨...  (本文共5页) 阅读全文>>

华中师范大学
华中师范大学

应用重组人类眼角膜细胞模型评估眼暴露刺激与炎症反应

在办公室与其它类似工作环境中,眼暴露刺激是一种常见的健康症状。对眼暴露刺激的原因及其机制的深入了解有助于提高工作环境质量。同时,当今社会人们与各种可能含有刺激性化学试剂的产品例如化妆品,药剂,工业药品接触越来越频繁,在保证人类能安全地与这些化学试剂接触前,很有必要研究这些化合物的眼暴露刺激性。目前,关于人类眼暴露刺激性的实验室研究主要基于Draize兔子眼刺激性试验,但该方法目前已经受到诸多质疑,尤其是这种方法太残忍。同时,这种方法无法评估人眼的炎症过程,而且由兔子眼睛外推到人眼睛可能是一种比较困难的过程。在本试验中,使用人类眼角膜细胞模型作为体外模型,研究模式化合物脂多糖以及典型环境污染物灰尘暴露对人类眼暴露刺激和炎症反应的影响,主要试验过程与结果如下:Ⅰ.使用不同浓度脂多糖6h暴露人类眼角膜细胞,用MTT方法研究细胞活力变化以反映眼暴露刺激性,用ELISA方法研究培养基中IL-1β,IL-8和TNFα浓度变化以反应眼角膜炎症...  (本文共49页) 本文目录 | 阅读全文>>

滨州医学院
滨州医学院

共焦显微镜观察糖尿病性视网膜病变患者角膜细胞的变化

目的观察糖尿病性视网膜病变(DR)患者角膜细胞密度及形态的变化。方法选用以激光为光源的眼科用HRT-Ⅲ共焦显微镜对55例(110只眼)DR患者(DR组)和20例(40只眼)无糖尿病的老年性白内障患者(对照组)的中央角膜进行观察研究,依据2003年Wilkinson等提出的国际DR分期标准,充分散瞳眼底检查将DR组患者分为五组:DR-1期(1组)、DR-2期(2组)、DR-3期(3组)、DR-4期(4组)、DR-5期(5组),记录角膜上皮基底层、基质层及内皮层细胞的图像,并对DR组与对照组及DR组之间的结果进行比较、分析。结果共焦显微镜下可以观察到DR组与对照组以及DR组各组之间角膜各层细胞的变化,结果显示,DR各组与对照组相比,角膜上皮基底细胞、浅基质细胞、中基质细胞、深基质细胞以及内皮细胞的密度均有变化,内皮细胞变异率(CV)以及内皮细胞中六边形细胞比率(Hexagonality)差异有显著意义(P0.05);DR各组之间相比...  (本文共45页) 本文目录 | 阅读全文>>