分享到:

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液体发酵条件

20世纪60年代以来,化学农药引起的环境污染和在农产品中的残留以及病原物产生抗药性等一系列问题日益引起各国政府广泛的关注,寻找对环境友好的无公害、高效的生物农药受到普遍重视[1,2]。生物防治被认为是最具有发展潜力的防治作物病害的方法并发挥着越来越重要的作用,而获得高效拮抗菌是生物防治的基础[2,3]。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是土壤和植物微生态的优势种群,能够忍受极端的外部环境而长期存活,作为植物根际有益微生物,通过分泌抗生物质和生长竞争,在防治植物病害方面发挥多种有益作用[4 ̄6]。剂型以活体芽孢为主,田间施用可以较长时间的发挥抑制病原菌作用[7,8]。第4期课题组采用现代分离技术筛选出一株对多种植物病原菌具有良好防治作用的枯草芽孢杆菌菌株,将该菌与课题组分离到的另一株生防真菌——拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii)用来协同防治蔬菜作物的病害,效果非常显著[9]。芽孢杆菌...  (本文共6页) 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

枯草芽孢杆菌纤溶酶高产菌株选育、发酵条件优化及其分离纯化

血栓栓塞性疾病是当前致死率高的病因之一,而溶栓疗法是治疗这类疾病的重要手段;纤溶酶可催化血栓的主要基质纤维蛋白水解从而化解血栓,因此纤溶酶作为血栓的特效治疗药剂而成为研究焦点。微生物是纤溶活性酶类的重要来源,日本学者从纳豆中发现纳豆激酶具有良好的纤溶活性;我国和韩国学者则从枯草芽孢杆菌发酵液中分离出相应的血栓溶解酶。由于野生型菌株产酶能力低,本文对一株枯草芽孢杆菌纤溶酶产生菌Bacillus subtilis XZ3④进行N~+离子注入诱变,获得了高产菌株Bacillus subtilis XZI125,并对该菌的发酵条件进行优化,同时研究了枯草芽孢杆菌纤溶酶的分离纯化,旨在为枯草芽孢杆菌纤溶酶的开发应用提供直接理论依据。主要结论如下:1.以能量20 KeV,入射剂量为30×2.6×10~(13) ion/cm~2~200×2.6×10~(13) ion/cm~2的N~+注入枯草芽孢杆菌纤溶酶产生菌B. subtilis XZ3...  (本文共99页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

脱毛蛋白酶产生菌的选育及其碱性蛋白酶基因的克隆与表达

皮革工业在创造巨大经济价值的时候,也给环境带来了严重的危害。制革污染主要来自于灰碱法脱毛过程,采用蛋白酶进行酶法脱毛是从根本上解决制革工业严重污染的有效途径。本论文进行了脱毛蛋白酶产生菌的分离、碱性蛋白酶基因的克隆及表达、蛋白酶基因的定向进化等方面的研究工作。针对用于生皮脱毛这一特定目的,以脱毛效果和质量作为标准,进行了脱毛蛋白酶产生菌的筛选。从多个富含蛋白质的土壤样品中筛选获得6株胞外蛋白酶活力在500 U/mL以上的细菌。用这6株菌的发酵液进行的生皮脱毛实验表明,菌株BA06产生的蛋白酶具有最好的脱毛质量,脱毛后皮的胶原结构保持完整。通过形态观察、生理生化性质分析和16S rDNA序列比较,该菌株被鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。短小芽孢杆菌BA06只分泌一种胞外碱性蛋白酶,分子量约30 kDa。为了进一步提高菌株的蛋白酶产量,采用紫外线、亚硝基胍、加热及Co~(60)辐照等方法对BA06进行复合诱变...  (本文共176页) 本文目录 | 阅读全文>>

内蒙古农业大学
内蒙古农业大学

枯草芽孢杆菌B908发酵工艺优化研究

枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis (Ehrenberg)Cohn B908是中国农业大学植物病害生物防治研究室从水稻根际土壤中分离获得的有益菌株,它对水稻纹枯病、棉花枯萎病、小麦赤霉病等多种植物病害有明显的防治效果。该芽孢杆菌已经制成制剂而应用于农业生产。制剂中的芽孢含量是影响制剂应用效果的关键因素。本研究的目的是通过优化发酵工艺,提高发酵液中芽孢含量,降低生产成本,提高制剂的生防效果。本项研究收集到应用于芽孢杆菌发酵的培养基配方16种,通过摇床培养筛选出较适宜于枯草芽孢杆菌B908发酵的培养基配方(玉米粉10g,葡萄糖5g,豆饼粉15g,鱼粉5g,CaCO_35g,(NH_4)_2 SO_4 1g,K_2HPO_4 0.3g,MgSO_4·7H_2O 0.2g,MnSO_4·H_2O 0.2g,水1000ml。)作为下一步优化的初始发酵培养基。并应用Plackett-Burman设计和响应面分析法设计相结合的优化...  (本文共47页) 本文目录 | 阅读全文>>

安徽农业大学
安徽农业大学

一株高产纳豆激酶的纳豆枯草芽孢杆菌的研究

纳豆,是指以大豆为原料经纳豆枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)发酵而成盛行于日本的传统发酵大豆食品。纳豆周围的黏性物质聚谷氨酸中含有一些具有生理活性的物质如纳豆激酶(Nattokinase,NK)、纳豆菌、血管紧张肽转化酶抑制剂、维生素K2、吡啶二羧酸、异黄酮等,具有抗肿瘤、溶血栓、降血压、抗氧化性、防止骨质疏松、抑菌等多种保健功能。纳豆枯草芽孢杆菌是从日本传统食品中分离出来的菌种,其原始菌株与枯草芽孢杆菌相同,是枯草芽孢杆菌的一个亚种。纳豆激酶是由纳豆枯草杆菌产生分泌到细胞外的具有强烈溶栓功能的碱性丝氨酸蛋白酶,是一种枯草杆菌蛋白酶。纳豆激酶具有很强的纤溶活性和良好的溶栓能力,可用于治疗和预防心血管疾病。纳豆激酶来源于传统发酵食品,无副作用,安全性高,符合治疗血栓病的药品和功能性保健食品基料的要求。本文主要进行了纳豆枯草芽孢杆菌菌株的筛选、纳豆激酶酶活的测定方法的探索、纳豆固体发酵产纳豆激酶的条件优...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

武汉大学
武汉大学

通过培养基优化和相关基因敲除提高枯草芽胞杆菌的产量

枯草芽胞杆菌芽胞制剂是一种广泛用于植物、动物及人类的益生菌和生物防治剂产品。然而当前过高的生产成本,限制了枯草芽胞杆菌在农业上的广泛应用。如何提高现有工业芽胞菌株的产量,特别是芽胞产量,进一步提高产品质量,降低该制剂的生产成本,成为开发价廉、高芽胞含量枯草芽胞杆菌制剂的关键之一。本研究的目之一是运用统计实验设计方法,优化工业生产用枯草芽胞杆菌WHK-Z12的培养基来提高芽胞产量,降低该制剂的成本。我们的预备试验表明,淀粉、玉米粉、麸皮是最佳的碳源,玉米浆、豆粕及酵母抽提物是最佳的氮源。随后的Plackett-Burman筛选试验表明,玉米浆、豆粕及酵母抽提物是影响芽胞产量的关键成分,它们被用于后续的响应面优化试验。最后我们得到这三种关键培养基成分的最佳浓度分别为:玉米浆16.18g/l、豆粕17.53g/l、酵母抽提物8.14g/l,此时预测的芽胞产量最高。验证试验表明在摇瓶条和在小规模发酵罐(301)条件下,上述优化培养基的实...  (本文共164页) 本文目录 | 阅读全文>>