分享到:

番茄灰霉病分子诊断方法研究

番茄灰霉病由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)侵染引起,在我国保护地蔬菜中发生普遍,危害性较大,严重时减产达20% ̄30%以上。灰霉病菌主要通过空气传播,较难预防,发病初期肉眼很难判定[1],应用分子特征检测病菌,建立该病害的早期诊断技术,无疑是理想的方法之一。笔者通过对灰葡萄孢的分子特征研究并结合相关文献,发现P729分子片段是灰葡萄孢种特异标志,该片段是Rigotti等应用RAPD方法从21种真菌中筛选获得[2 ̄3]。本研究基于扩增灰葡萄孢的P729种特异片段,旨在建立早期分子诊断灰霉病的方法,并对该法在实验室和大田进行了初步评价。1材料和方法1.1样本及来源实验室研究所用的灰葡萄孢由广西农科院赠送,或采自蔬菜保护地番茄病株,由上海交通大学农业与生物学院植物病理研究室分离、培养(表1)。阴性对照的黄瓜霜霉病菌(Pseudoperonospora cubensis)和黄瓜白粉病菌(Sphaerotheca cucur...  (本文共5页) 阅读全文>>

陕西师范大学
陕西师范大学

三种蔬菜病害病原体的分子特征分析和分子检测研究

番茄和黄瓜是我国广泛栽培的蔬菜种类,若受到病害的侵染,则严重影响其产量和质量。其中番茄灰霉病、黄瓜霜霉病及黄瓜白粉病是栽培地较为常见的病害,发生普遍且危害严重,其病原体均为真菌,在发病初期以常规方法难以诊断,常由于诊断的不及时而造成严重后果。番茄灰霉病的病原菌是灰葡萄孢(Botrytis cinerea),黄瓜霜霉病的病原菌为古巴假霜霉病菌(Pseudoperonospora cubensis)。黄瓜白粉病的病原菌据《中国真菌志,白粉菌目》记载存在两种,分别为瓜类单囊壳(Sphaerotheca cucurbitae)和葫芦科白粉菌(Erysiphe cucurbitacearum),但上海地区致病的病原菌据上海交通大学农业与生物学院植物病理研究室形态鉴定为Sphaerotheca fuliginea。本项课题从病原菌入手,分析、筛选番茄灰霉病、黄瓜霜霉病及黄瓜白粉病3种病原菌种特异的分子特征,并建立和评价了分子检测的方法,通过...  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

《畜牧与兽医》2018年06期
畜牧与兽医

山羊传染性胸膜肺炎分子诊断方法的研究进展

山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuro-pneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumonia,Mccp)引起的一种接触性传染病,其死亡率和发病率高达60%和90%,被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告的疫病之一[1]。早在1873年,国外就有关于CCPP的记载,但对其病原的认识一直比较模糊[2]。直到100多年后的1976年,Mc Owan等[3]分离到1株病原体Mccp,并证明了其致病性。国内在分离到Mccp之前,有学者从患CCPP的山羊肺脏中分离出丝状支原体山羊亚种(M.mycoides subsp.capri.,Mmc)和绵羊肺炎支原体(M.ovipneumoniae,MO)[4]。此后一直认为二者是CCPP的主要病原[5-6]。造成这种对病原认识不清的主要原因是由于Mccp的分离培养比较困难、对培...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中华检验医学杂志》2004年07期
中华检验医学杂志

遗传性高铁血红蛋白血症分子诊断方法的研究

遗传性高铁血红蛋白血症(OMIM登录号:MeKusiek no.250800)是一种常染色体隐性遗传病,绝大多数是由患者的NADH一细胞色素b5还原酶(NADH一eytoehrome bs reduetase,b5R)遗传缺陷所致川。编码b5R的基因全长约31kb,有9个外显子和8个内含子,定位于22号染色体22q13一qter(GenBank参考序列登录号:NM习00022):其mRNA长1921 bp( GenBank序列登录号:NM刃00398)。迄今为止,国内外在遗传性高铁血红蛋白血症患者中已发现33种不同的b5R基因突变,包括我科在中国人患者中发现的3种基因突变(R57Q,L72P和c203y)〔’巧〕。最近,我们又在福建省3名遗传性高铁血红蛋白血症I型患者中发现了3种新的、以复合杂合子形式存在的b5R基因突变。对象和方法 一、对象 患者A,女,23岁,汉族,福建省福鼎市人,已婚并生一女孩。患者B,女,13岁,汉族,福...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中华检验医学杂志》2007年10期
中华检验医学杂志

新型隐球菌性脑膜炎分子诊断方法的建立

新型隐球菌性脑膜炎(Cryptococcus neoforman“meningiti。,cNM)是新型隐球菌侵犯脑膜引起的中枢神经系统感染性疾病。近年发病率有所升高,由于早期极易误诊误治,晚期又缺乏有效的药物治疗,病死率很高。改善CNM预后的关键是早期明确诊断、早期治疗。本研究用荧光定量PcR(rQ一PcR)技术建立CNM的分子诊断方法,现报告如下。 一、材料与方法 1.试剂和仪器:X~Gal、I盯G、pMD18一T载体(大连宝生物公司),PCR产物纯化试剂盒(德国Qiagen公司),RESINcohimllTM小批量质粒DNA纯化试剂盒(华美生物工程公司),DNA分子量标准loobp(上海生工公司),Taq酶、dNTps、DH5a菌株、DNA提取液(达安基因公司),新型隐球菌标准菌株由本院微生物室提供。V一1206紫外分光光度计(日本Shimodzu公司),SCRZOB冷冻离心机(日本HITACHI公司),DF一3B GDST...  (本文共3页) 阅读全文>>

中国人民解放军军医进修学院
中国人民解放军军医进修学院

强直性肌营养不良1型的临床研究和分子诊断方法探索

目的:1.分析和总结DM1的临床特征,加深对本病的认识,提高诊断水平。2.探讨DM1的分子诊断方法。方法:1.回顾性分析26例由分子诊断确诊为DMl患者的临床资料。2.对29例临床诊断为DM患者采用常规PCR与Southern blot分析相结合的方法进行分子诊断。3.对29例临床诊断为DM患者采用TP-PCR方法进行分子诊断。结果:1. 26例由分子诊断确诊为DM1患者由12个家族史阳性的家系和12个散发病例构成。临床表现有肌无力、肌萎缩、肌强直和多系统受累。2. DM1的分子诊断:(1)使用PCR方法扩增DMPK基因CTG重复序列:在全部29例临床诊断为DM患者中有1例显示为两个正常大小的条带,其余均为一个正常大小条带;临床诊断为先天性肌强直患者显示为正常大小的两个条带,30名正常对照中有2人显示为一个正常大小条带,其余均为两个正常大小条带。(2)地高辛标记探针的Southern blot:所有检测的样本在3400bp左右出...  (本文共90页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国药物与临床》2019年11期
中国药物与临床

肾移植患者BK病毒相关性肾病分子诊断方法学比较

近些年来,随着分子生物学的发展,基于血或尿样本中病毒特异性核酸的分子诊断技术,因其无创性检测及高灵敏度、高特异性,而成为了BK病毒(BKV)检测的新方法。其中BKV DNA荧光定量检测是最常用的分子诊断方法[1]。但当前的BKV分子诊断或核酸分析技术没有国际或行业标准,具体病毒载量与BK病毒相关性肾病(BKVAN)进展情况的关系也无明确界定[2]。这就大大增加了单一利用外周血/尿BKV DNA定量检测进行BKVAN诊断的不确定性。研究认为,对肾移植患者尿液中BKV VP1基因mRNA的表达水平进行定量检测,是确定BKV激活状态的另一特异性方法。因为只有BKV启动复制后,VP1基因才会表达[3]。本文研究中,选取一定数量临床确诊的BKVAN及非BKVAN肾移植术后患者,分别检测其外周血样本中的BKV病毒载量及尿液样本中的BKV VP1基因表达水平。通过对这两种检测方法的比较,从而进一步完善BKVAN的分子诊断流程,构建可用于BKV...  (本文共2页) 阅读全文>>