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来自于变性链球菌的脱氧胞嘧啶核苷酸脱氨酶的表达,纯化,结晶以及初步晶体学研究(英文)

脱氧胞嘧啶核苷酸脱氨酶属于脱氧胞苷酸脱氨家族.对来自于变性链球菌UA159的脱氧胞嘧啶核苷酸脱氨酶进行了克隆,在大肠杆菌中进行了表达,最后纯化.快速液相分子排阻色谱分析表明这种酶在溶液中形成六聚体.利用悬滴气相扩散技术  (本文共4页) 阅读全文>>

《微生物学通报》1989年04期
微生物学通报

米曲霉在产脱氨酶过程中的超微结构动态

腺苷酸脱氨酶(AMP deaminase,EC 3.5.4.6)催化5′一腺苷酸脱氨生成5′一肌苷酸。核酸经5′-磷酸二酯酶降解后,用AMP催化其中5′一腺苷酸使其生成5′一脱苷...  (本文共4页) 阅读全文>>

《上海调味品》1989年04期
上海调味品

双酶法呈味核苷酸的研制 第2报 高产腺嘌呤核苷酸脱氨酶菌种筛选、酶的形成及其作用条件的研究

酵母 RNA 经 PD 酶降解,产生4种5′—核苷酸,其中5′—AMP 需脱氨后才能转化为具有鲜味的5′—IMP。脱氨作用可用化学方法或者生物化学方法来完成...  (本文共4页) 阅读全文>>

江南大学
江南大学

定向进化L—氨基酸脱氨酶转化合成α—酮戊二酸

α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid,α-KG)是一种二元短链羧酸,也是连接碳-氮代谢的关键节点,是微生物体内多种化合物的重要前体,广泛应用于食品、医药、精细化工等领域。目前,α-KG的生产制备方法主要有化学合成法、微生物发酵法和酶催化转化法。其中,化学合成法使用大量有害试剂,严重污染环境且限制其在食品等行业的应用。微生物发酵法存在副产物过多,发酵周期长等弊端。酶催化转化法具有催化反应条件温和、转化率高、反应副产物少,产物易分离等优点,适合α-KG的生产。本研究利用异源表达来源于Proteus mirabilis的L-氨基酸脱氨酶基因(pm1)的E.coli BL21(DE3)重组菌株催化底物L-谷氨酸钠合成产物α-KG,并从分子改造、表达载体优化、摇瓶和罐上发酵及全细胞转化条件优化等方面提高L-氨基酸脱氨酶合成α-KG的效率。论文主要内容如下:(1)将异源表达来源于Proteus mirabilis的L-氨基酸...  (本文共52页) 本文目录 | 阅读全文>>

新疆大学
新疆大学

盐穗木根际产ACC脱氨酶细菌的筛选及促生作用的初步研究

盐穗木(Halostachys caspica)属于藜科(Chenopodiaceae)、盐穗木属,是新疆盐碱地的优势植物种属,生长于盐碱化程度高的贫瘠土壤地区。根际促生菌(PGPR)是既可促进植物生长与植被对矿物质元素的消化吸收,又能抑制有害的微生物繁殖的一类有益菌类;ACC脱氨酶能够降解植被体内合成乙烯的直接前体物质—ACC为a-丁酮酸和氨,进而降低乙烯含量。研究人员发现PGPR中一些细菌可以分泌ACC脱氨酶这种活性物质,产ACC脱氨酶活性的细菌可以分解植物在逆境条件下产生的ACC,减少植被生长的障碍,提高植被的存活率。本研究以新疆盐穗木根际的土壤作为样品,采用定向富集的方法,分离筛选产ACC脱氨酶的促生菌,对筛选的菌株进行鉴定;生长特性的研究;产ACC脱氨酶酶活的测定及耐盐耐碱特性的研究;同时还对筛选菌株促生潜力的测定;不同浓度的菌液对小麦,玉米促生的影响;盐胁迫下筛选菌株对小麦,玉米促生的影响,结果如下:(1)从盐穗木的...  (本文共76页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
广西大学

不同表达系统对AMP脱氨酶表达的影响

AMP 脱氨酶(AMP deaminase;AMPD;EC 3.5.4.6)是一种氨基水解酶,可高效催化腺苷一磷酸(AMP)转变为NH3和肌苷酸(IMP),被广泛应用于食品及医药等行业。针对微生物直接发酵合成AMP脱氨酶遇到的成本高、酶活低且酶活不稳定、提取纯化困难等关键问题,通过分子生物学手段扩增来源于米曲霉的AMP脱氨酶基因,从而实现AMP脱氨酶在大肠杆菌、毕赤酵母及枯草芽孢杆菌中的高效表达,为实现其在食品工业中的规模化生产提供一定的理论指导和技术支持。首先,本研究以米曲霉基因组为模板,通过引物设计进行PCR扩增获得AMP脱氨酶的基因序列。该基因ORF为2964bp,编码987个氨基酸,预测蛋白分子量111.25266 KDa,理论等电点5.94。系统发育树分析表明该基因与Aspergillus oryzaeRIB40DNA对应的序列的同源性达99%。同时,为实现其高产的表达,分别设计引物构建重组表达载体pET30a-AMP...  (本文共80页) 本文目录 | 阅读全文>>