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TGFα反义寡聚核苷酸对膀胱癌BIU 87细胞株的作用

TGFα反义寡聚核苷酸对膀胱癌BIU87细胞株的作用孙丛梅,王东,周爱儒(北京医科大学生物化学教研室,北京100083)摘要报道了23碱基组成的TGFα反义寡聚核苷酸和对照寡聚核苷酸对人膀胱移行细胞癌BIU87细胞增殖及其TGFαmRNA表达的作用,结果表明:TGFα反义寡聚核苷酸抑制体外培养的BIU87细胞的增殖、DNA合成和TGFαmRNA的表达,进一步证明了TGFα在BIU87细胞恶性增殖中的重要作用.关键词寡聚核苷酸,转化生长因子α,BIU87细胞株,反义寡聚核苷酸TheInhibitiouofBIU87CellProliferationandTGFαmRNAExpressionbyanTGFaAnti-senseOligodeoxynucleotide.SunCongmei.WangDong,ZhouAiru.(DeparrmentofBio-chemistry,BeijingMedicalUniversity.Bei...  (本文共5页) 阅读全文>>

《分析化学》2003年03期
分析化学

硫代反义寡聚核苷酸在线性聚丙烯酰胺-毛细管电泳中的分离行为

1 引  言反义寡核苷酸 (AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达、在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸 (phosphorothioateoligonucleotides ,简称PS ODNs) ,是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物 (图 1A) ,长度在 5~ 40核苷酸之间。它克服了寡核苷酸在血清中易被核酸酶降解的特性[1] 。在合成这一类反义寡核苷酸中 ,常常需要对合成产物的长度、纯度等进行准确测定 ,以免影响后一步的活性实验和使用效果。目前 ,毛细管凝胶或流动胶电泳方法已被广泛应用于单链或双链寡核苷酸的分离研究 ,能够较好地完成相差一个碱基的寡核苷酸的分离和分析[2~ 5] 。在许多人类肿瘤中常常可以见到基因的异常表达。通过设计并合成特定的反义寡核苷酸序列 ,与过度表达的肿瘤靶基因mRNA特异性的互补结合 ,从而抑制该基因的表达 ,逆转这类...  (本文共4页) 阅读全文>>

《上海第二医科大学学报》2003年03期
上海第二医科大学学报

反义寡聚核苷酸的化学修饰

反义寡聚核苷酸(antisense ol噜onucleotides,AS一0DNs)的概念最先提出于1967年,经过30多年的研究,人们已意识到在各种反义寡聚核苷酸的广阔领域里,有可能寻找到更有效的抗病毒和抗肿瘤新药。反义寡聚核苷酸 反义寡聚核苷酸是一类根据碱基互补原理合成的长约13~25bp的单链DNA片段,它能特异性地与mRNA靶部位杂交,阻断该基因的功能,从而抑制疾病相关基因的表达。反义寡聚核苷酸的作用机制包括:1.阻止mRNA的翻译过程:通过watson—crick碱基配对原则与靶mRNA分子上5’翻译区、mRNA启动一编码重叠区、核内hnRNA等区进行分子杂交,或通过干扰核糖体与mRNA的结合,或通过形成RNA—DNA杂合双链,形成空间位阻,抑制mRNA的翻译、剪接、转运。2.直接抑制靶基因表达:通过H00gsteen碱基配对原则在基因组的靶基因部位形成三链结构,阻止靶基因复制或转录。3,激活核糖核酸酶H(RNase ...  (本文共4页) 阅读全文>>

《眼科》2001年04期
眼科

反义寡聚核苷酸对兔角膜基质细胞的通透性

1 材料与方法1 1 实验材料异硫氰酸荧光素 (FITC)标记反义寡聚核苷酸(CyberSyn) ,Lipofectin (GIBCO/BRL) ,小牛血清(GIBCO/BRL) ,MEM营养液 (GIBCO/BRL)。1 2 实验动物新西兰白兔 (中国药品生物制品检定所 ) 3只 ,体重 2kg ,双眼检查无病变。1 3 兔角膜基质细胞培养兔以空气栓塞处死 ,将眼球取下 ,在手术显微镜下沿角膜缘取下角膜 ,剥离角膜基质层 ,剪碎为 1~2mm后放培养瓶中 ,加入含 10 %小牛血清营养液进行培养。细胞长满后进行传代培养 ,将其培养在 96孔板的小玻片上。1 4 脂质体的细胞毒性将Lipofectin用MEM配成 16 0、80、4 0、2 0和10 μg/ml的浓度 ,加入培养的角膜基质细胞中 ,继续培养 4小时。1 5 荧光 (FITC)反义寡聚核苷酸脂质体的制备用MEM将荧光反义寡聚核苷酸配成 10 0和2 0 μg/ml...  (本文共2页) 阅读全文>>

权威出处: 《眼科》2001年04期
《国外医学.眼科学分册》1997年05期
国外医学.眼科学分册

反义寡聚核苷酸抗单疱病毒及治疗单疱病毒性角膜炎的作用

根据分子生物学的中心法则和核酸结构的物理、化学特性的知识,人们研究了反义寡聚核着酸作为药物应用的可能性。已报道,它可抑制病毒的繁殖,同时可抑制很多癌基因的表达。所抑制的病毒包括人免疫缺陷病毒(HIV)、水泡性日炎病毒(VSV)、流感病毒、肝炎病毒、人水痘病毒(HPV)和单纯疮疹病毒(HSV)等。本文就其抗HSV作用和治疗单癌病毒性角膜炎的研究进展综述如下。一、反义寡来核容醒的概念核酸由核着酸以磷酸二酯键连接而成,由几个至几十个核奇酸组成的核酸称为寡聚核奇酸。双链DNA中可转译mRNA的单链DNA称为正义核酸,而另一条与之互补的单链为反义核酸。人工合成的反义寡聚核昔酸是一种仿基因物质,它在机体内有一定的生物作用。(-)仿基因物质(gene-mimeticsubsta。ces)[‘’基因治疗是在生物体内插入一个体内不存在的功能基因,或用一段基因片段影响生物体基因的表达。仿基因物质是人工合成的核酸一DNA或RNA片段的寡链,有些寡链经...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中华外科杂志》2000年03期
中华外科杂志

内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制血管平滑肌细胞增殖

血管移植或动脉腔内成形术后 ,常因内膜增厚致血管再狭窄。内皮素 (ET)在内膜增生中有重要的促分裂效应。我们设计合成含 18bp的内皮素Ⅰ型受体(ETA)和内皮素Ⅱ型受体 (ETB)反义寡聚核苷酸 (ODNs) ,探讨ODNs对平滑肌细胞 (SMC)上ET受体 (ETR)蛋白表达和SMC增殖的影响。1.材料与方法 :主要试剂有DMEM细胞培养液 ;胰蛋白酶 ;12 5I ET 1;抗α actin单抗 ;小牛血清 ;ETA ODNs和ETB ODNs。实验方法 :(1)细胞培养 :无菌状态取 3只家兔主动脉段 ,按文献 [1]方法培养SMC ,取 4~ 6代细胞。 (2 )SMC鉴定 :按 1× 10 4 /L的细胞浓度将SMC接种于含无菌载玻片的六孔板内 ,生长至一定密度取出 ,免疫组化法 (ABC)鉴定。(3)ODNs的设计合成 :从克隆的大鼠和人的ETA和ETB核酸序列 ,分别筛选设计特异性高的 2条含 18bp的反义片段...  (本文共1页) 阅读全文>>