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蛇肌果糖-1,6-二磷酸酯酶的别构部位

鼠肝的果糖1,6一二磷酸醋酶(EO.3 .1 .1.3.n简称FruP,ase)可以被AMP强烈地抑制〔1」。兔肌FruP,细对AMP的抑制作用更为敏感圈。前文报道了兔肝酶别构部位和催化部位的赖氨酸残基分别处于酶的一级结构的137、138和从C端开始计算的第54位置〔a一的,两者相隔约有150个氨基酸残基左右。蛇肌的F:uP声阳的分子量〔们,和用枯草杆菌蛋白酶限制性酶解的凝胶电泳图谱以及它的枯草杆菌蛋白酶水解后得到的S--肤的一级结构都和兔肝F1’u玖姗以及兔肌的FruP声阳极为相似。因此可以认为不同来源的外uP习韶。的一级结构是相当保守的。研究别构和催化部位的结构以及二个部位之间是如何相互作用的将有助于深入理解别构酶的作用机制。 我们已经报道了蛇肌Fru玖a阳的别构部位有一个必需的精氨酸侧链肌基与AMP的结合有关。本文用AMP的类似物观察它们对FruP,a印的抑制作用,并用对梭基比较专一的修饰试剂对蛇肌FruP:ase进行修饰...  (本文共7页) 阅读全文>>

《生物化学杂志》1992年04期
生物化学杂志

磷酸吡哆醛修饰的蛇肌果糖1,6-二磷酸酯酶的时间分辨荧光分析

生物大分子的构象是在动态平衡过程中,存在一定的波动性,其内部的荧光发射基团随着构象状态之间的转变,必然经历不同的取向和外周环境。荧光发射基团的荧光发射对于其周围环境的物理、化学性质十分敏感,处于不同瞬间取向和环境的荧光发射基团的荧光衰减速度可能不同,表现为荧光寿命的非均一性。1985年James等人把寿命分布的理论引人到荧光寿命分析中t6J,已有人应用该理论分析了蛋白质分子的柔性〔‘一5,。如果荧光发射基团所处部位的柔性越大,其经历的环境变化就越复杂,荧光寿命的分布宽度也就越宽。据此,我们测定了标记在蛇肌FruPZose的活性部位及别构部位的PLP的荧光寿命分布宽度,推测该酶分子的活性部位柔性大于别构部位的柔性。材料与方法 蛇肌FruPZase从新鲜的乌梢蛇肉中提取[71,蛋白质浓度按每毫升每毫克酶蛋白在280nm处的吸收值为0.72计算,酶活力测定采用偶联法[8]。NADP、PLP、葡萄糖一6一磷酸脱氢酶为sigm。公司产品,...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国科学C辑:生命科学》1997年03期
中国科学C辑:生命科学

猪肾果糖1,6-二磷酸酯酶N-端60肽的溶液构象

猪肾的果糖1,6-二磷酸酯酶(Fructose-1,6-bisphosphatase,E.C.3.1.3.11,简称Fru,6.PZase)是糖原异生过程中的一个关键酶,由 4个亚基组成,每个亚基分子量为 36 000.其 N-端能被枯草杆菌蛋白酶限制性酶解,产生 N.端60个氨基酸组成分子量为 6 500的 S肽和剩余C-端分子量约为 29 000的S蛋白.不同来源的 Fru,6-pZase如猪肾、鼠肝、兔肝、肌肉酶的N-端60个氨基酸残基的S.肽,它们的一级结构表现出高度的相似性[‘·‘],表明这一区域在生194 中 国 科 学 K 辑)第27卷物功能上可能起着重要的作用.枯草杆菌蛋白酶处理后的酶解产物,虽然S.肽与S.蛋白之间的化学键已经破坏,但是它们并没有分离,依然缔合在酶的 4个亚基之中[门.被修饰的酶最适PH从中性转为碱性,同时别构抑制剂 AMP对它的抑制作用大大的减弱.S-肽与 S-蛋白可以通过用 9%甲酸平衡的 ...  (本文共5页) 阅读全文>>

《生理学报》1953年01期
生理学报

無机游子及幾種有机化合物對於綠荳芽磷酸酯酶之影響

褚言普通的磷酸醋酶有雨踵,一核是在pHg左右活勤的所韶“瀚活性”磷酸醋酶,在勤物界分怖甚魔,研究得特BlJ多;另一踵是在pH 5 .5左近活勤的“酸活,性”磷酸醋酶,魔泛存在在高等植物及糊菌艘内,勤物艘的有些器官像肝、肾、腊及前列腺等含量较多,一般研究得较少,因此阴朴适颊酶的知藏比较育乏。入椽登是普通的食用踵子,它的芽也是常用的食品,合磷酸醋酶颇焉登富,作者篇了要研究“酸活性”磷酸醋酶就遴了道踵市上随待可以员到的椽茎做材料。释登的芽较未登井的幢子含酶焉多,韭且蛋白鬓的合量较少,登芽也很容易;道些都是有利的像件,因此就决定用释登的芽作焉酶源。 酶的作用受很多物鬓的影婴而起燮化,有的抑制酶的作用,有的激活酶的作用,我们可以通遇道些影馨比较深入地睐解一踵酶的性鬓。 酶的作用峙常和金厦登生阴保,已握蹬明必需某撞金屡游子作篇辅酶或激活浏的例子不在少教,“瀚活性”磷酸醋酶需要簇或另一踵二僧金履游子,也是捆魔琴知晓的事育,但是“酸活性”磷酸醋...  (本文共12页) 阅读全文>>