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RNA干扰

RNA干扰(RNA interference,RNAi)现象是指,当与内源性InRNA编码区某段序列同源的双链RNA(dsRNA)导入细胞后,  (本文共6页) 阅读全文>>

广州中医药大学
广州中医药大学

基于肠细胞生长及健脾中药效应的RPS20基因功能鉴定

研究背景和目的脾虚证是中医辨证的常见证型,现代医学认为脾虚证的临床表现多与消化吸收和代谢功能异常相关,国内外学者从消化系统、免疫系统、物质能量代谢等角度对脾虚证进行了大量的探索研究,初步阐释脾虚证的现代病理生理学基础。由于中医证候具有系统性和复杂性,局部的研究难以全面地反映脾虚证的本质。近年来,基于基因组学技术的中医证候基因差异表达谱研究,可从整体水平反映中医证候的生物学基础,应用基因芯片等技术对中医证候差异表达基因的探讨分析为阐明中医证候的本质提供了新的思路和方法,并取得了一定的进展。本实验室在前期课题对慢性浅表性胃炎脾虚证患者胃粘膜基因差异表达谱的研究中发现,脾虚证患者核糖体蛋白S20(RPS20)等基因表达出现下调趋势,并通过荧光定量PCR验证了RPS20等基因的表达下调呈阳性结果。后续对RPS20基因的体外功能研究结果初步表明核糖体蛋白基因在脾虚证发生发展过程中可能具有重要作用,RPS20基因RNA干扰后大鼠小肠上皮细胞...  (本文共125页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

小鼠中RNA干扰负调控机制初探及RNA干扰在肿瘤治疗应用中的初步研究

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是广泛存在于各种生物中,在进化上非常保守的一种转录后基因表达沉默的机制。随着RNA干扰技术的不断发展,大量的研究小组将RNA干扰作为高效实用的工具来对基因功能、信号传导通路以及疾病的发生机制进行研究。但是对于RNA干扰的调节机制却研究的很少,虽然有一些可以调控RNA干扰信号的蛋白质已经被鉴定并进行了功能的探讨。针对以前的一些研究工作我们进行了调查和整理,利用大肠杆菌发酵制备esiRNA(E.coli expressed and enzyme digested siRNA),在哺乳动物细胞体系和动物体系中进行了RNA干扰负调控机制的初步研究;继而使用两种esiRNA针对两个靶位以联合给药的方式分别在细胞实验和动物实验中抑制了小鼠黑色素瘤细胞的生长。本论文首先发现大剂量的esiRNA进入体内后,干扰HBV病毒复制的效率反而不如剂量小的esiRNA,并且发现esiRNA进入细胞后...  (本文共115页) 本文目录 | 阅读全文>>

湖南师范大学
湖南师范大学

siRNA的非对称结构对RNA干扰的影响研究

RNA干扰,又叫RNA干涉,RNA沉默,是一种广泛存在于真核生物的,能够在转录后水平负调控基因表达的生命现象。经典的RNA干扰是指:21~23bp双链RNA能够在RISC装载复合物(RISC Loading Complex,RLC)的帮助下进入RNA引导的基因沉默复合物(RNA Induced Silencing Complex,RISC),RNA 通过碱基互补配对原则引导RISC复合物识别靶标RNA,进而影响靶标RNA的功能,例如降解靶标RNA或者抑制信使RNA的翻译过程,最终造成靶标RNA与其翻译蛋白的整体下调。非对称RNA干扰(Asymmetric RNA interference)现象的发现刷新了人们对RNA干扰现象的的理解:完整的双链RNA并不是RNA干扰技术所必需的;siRNA的两条链不完全互补,长度不一致,也能够引发稳定的RNA干扰现象。与经典的siRNA相比,aiRNA表现出更精确的RNA干扰活性与更低的脱靶效应...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国科学技术大学
中国科学技术大学

秀丽线虫中小RNA介导产生的H3K27me3染色体修饰依赖于Nrde通路

小RNA分子指导染色质的修饰在植物和酵母中有着广泛的研究,然而在动物中直接证明小RNA可以指导序列特异性的染色质修饰的研究却相对缺乏。在秀丽隐杆线虫中,细胞核内RNA干扰通路可以介导小干扰RNA分子从细胞质中转运到细胞核内,从而调节转录的延伸,指导组蛋白H3第9位赖氨酸H3K9形成三甲基化修饰并实现RNA干扰的多代遗传。本文的研究发现外源性RNA干扰和NRDE内源性结合的22G小RNA分子都可以在靶标位置上通过Nrde通路介导序列特异性的组蛋白H3第27位赖氨酸H3K27的三甲基化修饰。这些产生的H3K27me3修饰可以通过后代在子代中多代遗传。piRNA和WAGO-1结合的小干扰RNA分子也可以介导H3K27me3的表达。有趣的是CSR-1结合的内源性小干扰RNA却并不能生成依赖于Nrde通路的H3K27me3表达,但是当对CSR-1靶标基因位置外源性引入双链RNA时,在靶标位置却可以出现依赖于Nrde的H3K27me3表达。...  (本文共98页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国科学技术大学
中国科学技术大学

NKG2D配体的多靶点RNA干扰在NK细胞介导的急性肝损伤中的保护作用

NKG2D,凝集素样的2型跨膜蛋白,是一种由NK细胞、NK1.1+T细胞,γδ T细胞,CD8+T细胞和一些髓细胞表达的刺激性免疫受体。NKG2D识别多种不同的配体,这些配体与MHCⅠ类分子远系相关,包括人的MICA/B、ULBPs和小鼠的Rae1、Mult1以及H60。这些配体虽然不是组成型表达的,但可以由压力诱导表达,如病毒感染、细胞恶性转化或者DNA损伤。NKG2D配体的表达,使得靶细胞对NK细胞的杀伤更为敏感,并且能促进NK细胞分泌INF-γ。NKG2D活化NK细胞,在炎症的起始和维持中发挥了重要了作用。据报道,NKG2D活化参与了NK细胞介导的过敏性气道炎症,使用NKG2D阻断性抗体能够延缓气道过敏;而在肾缺血模型中,NKG2D与配体之间相互识别,会引起局部的炎症和白细胞的聚集;通过注射非清除性的NKG2D单克隆抗体,阻断NKG2D的信号通路,不仅对由于细胞转输引起的SCID小鼠的结肠炎有帮助,而且还能够减缓胶原诱导的...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>