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阿尔茨海默病相关转基因小鼠模型的构建

淀粉样前体蛋白 (Amyloid Precursor Protein,APP)是一种存在于全身组织细胞膜上的 I类跨膜蛋白 .在细胞内部 ,APP通过降解形成β-淀粉样蛋白 (β- Amyloid,Aβ) .Aβ沉积是人类阿尔茨海默病发病中的早期及关键性事件 [1] .APP基因定位于人类 2 1号染色体长臂 ,全长约 40 0 kb(1 kb=1 0 0 0bp)具 1 9个外显子[2 ] .突变的 APP基因使 APPm RNA剪切异常 ,从而导致 Aβ分泌增加并产生 Aβ沉积 [3 ] .瑞典型 APP突变是在瑞典 2个患早发型阿尔茨海默病的家系中发现的 ,即 APP6 70 /6 71 KM→ NL,通常称为 APPSW突变 [4 ] .APPSW突变可以单独使动物出现人类 AD样病理改变 ,携 APPSW突变转基因小鼠是目前世界上最常用的模型之一 [3 ] .为了解 AD的发病原因及机理 ,本实验拟将人类血小板衍生的生...  (本文共4页) 阅读全文>>

山东中医药大学
山东中医药大学

阿尔茨海默病同病异证tau蛋白异常磷酸化机制研究

目的:在建立阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)肾精亏虚证、痰浊阻窍证、瘀血阻络证病证结合动物模型的基础上,通过应用蛋白免疫印迹法、免疫组织化学、免疫荧光等方法,探讨AD不同证候类型在tau蛋白异常磷酸化位点的差异及相关生物学机制,部分阐释AD同病异证在tau蛋白异常磷酸化方面的微观病理改变,为同病异证理论提供现代生物学依据。方法:1.构建AD三典型证候病证结合模型、AD疾病模型及假手术组模型。(1)AD肾精亏虚证病证结合模型的构建:该组大鼠颈背部皮下注射D-半乳糖(D-gal)持续48天,构建亚急性衰老大鼠模型,模拟肾精亏虚证;并于行为学检测前一周在大鼠大脑双侧海马CA1区注射凝聚态Aβ25-35毒性片段,复合构建AD肾精亏虚证病证结合模型(简称肾精亏虚组)。(2)AD痰浊阻窍证病证结合模型的构建:该组大鼠颈背部皮下注射D-gal持续48天,构建衰老期肾精亏虚的大鼠模型,同时给予高脂饮食喂养,于行为学检测...  (本文共134页) 本文目录 | 阅读全文>>

北京协和医学院
北京协和医学院

阿尔茨海默病中microRNA29c对APP、BACE1蛋白的负性表达调控

阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)是老年人最常见的中枢神经系统退行性疾病。1907年由德国精神科医生Alois Alzheimer首先提出并以他的名字命名。临床表现为隐袭起病,逐渐出现记忆力减退、认知功能障碍、行为异常和社交障碍。病情呈进行性加重,逐渐丧失独立生活能力,发病后10-20年因并发症而死亡。AD可分为家族性(FAD)和散发性或迟发性(SAD/LOAD).主要三大病理变化是神经细胞外老年斑沉积、神经元内神经纤维缠结和神经元缺失等。阿尔茨海默病的发病机制尚未完全明确。四个突变基因在AD中起重要作用,APP、PS1、PS2家族性AD中发现的3个基因,及一个在散发性AD中的危险因素基因ApoE。目前,虽然在基因水平对家族性阿尔茨海默病已经有了深入地了解。但是,我们对AD从基因突变到Aβ沉积、神经原纤维缠结、神经元丢失、神经突触可塑性改变、记忆学习能力缺失等病理发生机制并不了解。Aβ、Tau、PS和Ap...  (本文共120页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
广西大学

广西巴马小型猪Tau基因真核表达载体的构建及功能验证

Tau蛋白可促进微管蛋白聚集形成微管并保持其稳定性,过度磷酸化时会在神经元内形成神经纤维缠结,是阿尔茨海默病的标志性病变之一。本研究的目的是通过克隆广西巴马小型猪Tau基因,构建其真核表达载体,并对其功能进行验证,为广西巴马小型猪阿尔茨海默病模型的制作奠定基础。根据GenBank中猪的Tau基因预测序列设计引物,以广西巴马小型猪脑组织总RNA进行RT-PCR,获得的序列与参考序列相比缺少1134bp。应用巢式PCR和5'RACE进行缺失片段的验证,发现一处编码区缺失(+344~+1389bp)和两处选择性剪接(+191~+277bp、+1526~+1579bp),由此构成了四个可变剪接体。将4个序列提交至GenBank中,获得四个登录号KC473498、KC473499、KC473500、KC473501。参考人的PDGF-B基因转录起始位点上游序列设计两对引物,用于扩增PDGF-B基因的启动子,获得PDGF-β305和PDGF...  (本文共83页) 本文目录 | 阅读全文>>

《基因组学与应用生物学》2018年03期
基因组学与应用生物学

阿尔茨海默病转基因实验动物模型的构建研究

Construction of a Transgenic Animal Model for Alzheimer's DiseaseQu Honglin1,2Chen Jiaqin1*1 Sports College of Hunan Normal University,Changsha,410021;2 Sports College of Yichun University,Yichun,336000*Corresponding author,chenjiaqin28@sina.comShengwuxue(Genomics and Applied Biology),37(3):1071-1076(屈红林,陈嘉勤,2018,阿尔茨海默病转基因实验动物模型的构建研究,基因组学与应用生物学,37(3):1071-1076)阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)为当前临床上最为常见的老年期神经变性疾病,是一种以记忆...  (本文共6页) 阅读全文>>

《肿瘤学杂志》2018年02期
肿瘤学杂志

淀粉样前体蛋白在恶性肿瘤中的作用及研究进展

淀粉样前体蛋白(APP)是一种存在于人体各组织细胞上的单次跨膜蛋白,广泛表达于脑、心、肺、肾脏及肠道等器官组织中[1]。APP有两种高度同源性基因,类淀粉样前体蛋白1和2(amyloid precursor-like protein 1/2,APLP1/APLP2)三者共同构成APP基因家族。研究表明,APP裂解后可产生具有毒性作用的β-淀粉样肽(β-amyloid,Aβ),其聚集形成的老年斑是导致阿尔兹海默症(Alzheimer disease,AD)发病的直接原因[2]。近年来,在一些恶性肿瘤中发现APP或APLP2异常表达,而且,APP与其受体DR6可诱导内皮细胞的坏死,进而导致癌细胞的外侵和转移[3]。因此,APP在恶性肿瘤中的表达情况成为近年来研究的热点,有望成为癌症药物治疗作用的新靶点。1 APP的结构及生理功能APP基因位于人类21号染色体长臂,约240个碱基对,18个外显子。经转录、翻译和加工后形成3种不同长度肽...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国临床神经科学》2017年04期
中国临床神经科学

线粒体相关性β淀粉样前体蛋白及线粒体相关性β淀粉样蛋白针对阿尔茨海默病致病机制的研究

线粒体是维持正常细胞功能重要的细胞器之一,广泛阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种存在于胞质内并调节能量代谢,是细胞呼吸的主要场所。严重的神经退行性疾病,主要临床症状包括进行性记忆线粒体的典型形态为双层膜结构,分布于线粒体内膜的呼力减退以及语言、感知在内的多方面认知功能下降[4]。AD吸链复合物是其发挥生理功能的结构保障[1]。在多种病理是中老年人群中患痴呆最常见的类型,临床上约95%的状态下线粒体受损,主要表现在ATP产生减少、呼吸链复AD患者为散发型,常染色体显性突变引起的家族型AD合物活性下降、线粒体膜电位下降、钙离子代谢紊乱、活仅占总发病率的5%[5]。目前研究认为AD发病的危险因性氧的大量产生等功能障碍,甚至诱导细胞凋亡[2,3]。素包括年龄、性别、家族史、受教育程度、抑郁障碍、高血压病、糖尿病、高胆固醇血症、生活习惯、某些药物治疗分泌酶剪切而不形成毒性物质。由于线粒体也具有脂质等。散发型...  (本文共8页) 阅读全文>>