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里氏木霉(Trichoderma reesei)产纤维素酶液态发酵条件的研究

纤维素酶的来源十分广泛,其中来自微生物的有真菌、细菌,还有放线菌。迄今为止,产纤维素酶能力最强的微生物是木霉属的菌种,最常用的是里氏木霉(T.reesei)。目前,我国对里氏木霉产酶的研究报道较多,许多学者对影响里氏木霉液态深层发酵产酶的诸多条件进行了深入的研究,并不同程度地提高了酶活[1~6]。本研究选用纤维素酶高产菌株里氏木霉ZU03,通过对培养基中碳源组成等培养条件的优化,来提高纤维素酶的产率,降低产酶成本,并将优化结果扩大到中试水平。1实验材料与方法1.1实验材料1.1.1菌种里氏木霉(Trichodermareesei)ZU03,来自美国普渡大学(PurdueUniversity)可再生资源工程实验室,为纤维素酶生产菌种。将菌种移接到PDA斜面上,30℃培养7d后,于4℃冰箱中保存备用。斜面菌种每月转接1次。1.1.2斜面种子培养基PDA培养基:马铃薯去皮后,切碎煮沸30min,然后用双层纱布过滤,滤液内加入葡萄糖及琼...  (本文共4页) 阅读全文>>

江南大学
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里氏木霉纤维素酶的液态深层发酵生产及其应用的研究

随着能源危机的加剧,天然纤维质原料酶解生产燃料酒精成为当前研究的热点,然而,纤维素酶的使用成本是束缚此项研究的瓶颈所在。本实验旨在通过优化里氏木霉突变株WX-112液态发酵产纤维素酶的培养条件,寻求能更好降低纤维素酶使用成本的有效途径。用经过预处理的蔗渣代替微晶纤维素作为主要碳源用于纤维素酶的生产,既解决了环境污染问题,又可有效降低生产成本。通过机械粉碎、酸水解、碱水解、微波与碱联合处理、活性乳酸菌处理等方法预处理蔗渣后用于里氏木霉液态发酵生产纤维素酶。单因素试验结果显示:浓度为1%(w/v)的NaOH溶液水解蔗渣效果较好。在此基础上,结合微波辐射处理,由正交试验得出了最佳的预处理工艺为:用0.30mol/L的NaOH溶液浸泡蔗渣,在微波功率为160W下处理5min,在此条件下单位能耗的酶活净增值最大,后续发酵结束后,酶活较未经处理的蔗渣发酵后所得酶活有显著提高。其中,滤纸酶活和CMC酶活分别由原来的1.73IU/mL和60.2...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
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TrATG5基因对里氏木霉生长发育的影响

细胞自噬过程是真核生物中普遍存在的非选择性的蛋白降解过程,是真核生物中进化上保守的过程。在细胞的生长和发育过程中,细胞自噬在合成和分解代谢方面起着重要的平衡作用。在特定的条件下,如饥饿条件下,细胞自噬被诱导,胞内的长寿蛋白和细胞器被降解,降解的产物得到再循环利用。这一过程在从酵母到哺乳动物中是非常保守的,其中涉及到的基因的功能在许多真核生物中也非常保守。近来研究发现,在丝状真菌中,细胞自噬过程参与到对细胞外部饥饿条件的应答反应;另外也可能参与到细胞正常的生长和发育过程中。里氏木霉(Trichoderma reesei)是一种重要的工业菌株,在工业生产中主要用于纤维素和半纤维素酶以及其他一些酶类。对里氏木霉的研究主要集中在产酶相关基因上,对细胞自噬过程并未有研究。因此,我们在前人对丝状真菌细胞自噬相关基因的研究基础上,根据同源序列比对,对里氏木霉的细胞自噬相关基因TrATG5进行了克隆,并通过基因敲除的方法对该基因在细胞的生长发育...  (本文共113页) 本文目录 | 阅读全文>>

福州大学
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纤维素酶高产菌株—里氏木霉的选育及发酵生产条件研究

纤维素酶是一个水解纤维素的复杂酶系,主要包括内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶,在饲料、食品、纺织和生物能源等领域具有巨大的市场潜力。在纤维素酶的工业化生产过程中,纤维素酶活力水平及成本问题是制约其实际应用的一个重要因素。本文对里氏木霉T306进行传统诱变及全基因组重排育种,并对选育获得的纤维素酶高产菌株进行5L罐发酵工艺条件研究,研究结果如下:1、优化了高产纤维素酶突变菌株的筛选培养基,确定初筛培养基中添加0.1%(w/v)乳糖、蛋白胨及脱氧胆酸钠有利于菌株的筛选;摇瓶培养基碳、氮源及添加量(w/v)为:乳糖1.50%,硫酸铵0.14%,尿素0.05%,蛋白胨0.10%,初始pH自然,添加0.6%(v/v)吐温-80有利于产酶;最适发酵条件为:发酵7d,装液量30mL/150mL,转速180 r/min,接种量50μL/30mL。通过紫外和微波诱变,筛选获得6株酶活力较高的突变菌株0409、0505、0506、0516...  (本文共89页) 本文目录 | 阅读全文>>

《江西科学》1997年03期
江西科学

液态发酵技术培养食用菌的研究概况

野生食用菌向来为消费者所喜爱,主要是它具有特殊的鲜香风味、脆嫩的质地、丰富的营养和较高的药用价值。在我国已知可食用的真菌有850多种,其中味鲜而优良的种类至少100种,可药用的有so余种,有抗癌作用的达90多种【门。食用菌已引起全世界人们的喜爱,在我国被称为“山珍”,在美国蘑菇(Agdricu。bisporus)被誉为“上帝的食品”,在日本香菇(Ixntinulaedde)被称为“植物性食品的顶峰”①。由此可见食用菌在世界人们心目中的地位。但长期以来人们对食用菌利用的途径除了采集野生的之外就是靠人工栽培,而人工栽培有很大的局限性,一是周期长.产量低,满足不了人们的需求;二是许多珍贵的野生食用菌目前还无法进行人工栽培,限制了人们的利用。因此,开辟食用菌生产的另一途径——液态发酵生产i势在必行。液态发酵生产食用菌具有如下优点【‘1:(l)周期短,产量高;(2)占地面积少,便于操作和控制;(3)生产条件较稳定,有利于机械化自动化生产;...  (本文共6页) 阅读全文>>

江南大学
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樟芝多糖的液态发酵、结构分析及体外抗氧化活性研究

樟芝是我国台湾特有的珍稀药食两用真菌,已发现具有多种生理活性物质,其中多糖是极具开发潜力和研究价值的主要活性成分之一。近年来对于樟芝多糖的研究多在抗癌保肝等活性,而系统的对比其细胞壁多糖和胞外多糖结构与活性差异的研究未见报道。本文首先优化樟芝液态发酵产胞外多糖的工艺条件,然后分析两种来源的樟芝多糖结构上的差异,最后对其体外抗氧化活性进行研究。为提高樟芝液态发酵胞外多糖产量,本实验对发酵条件进行优化。首先对11种氮源和5种碳源进行初选;然后在单因素实验的基础上,设计了Plackett-Burman试验,筛选出显著影响胞外多糖产量的因素;最后采用四因素三水平的响应面法优化胞外多糖的产量。优化得到最佳发酵条件为:葡萄糖60 g·L~(-1)、酵母浸粉16 g·L~(-1)、维生素B_1 1 g·L~(-1)、KH_2PO_4 0.75 g·L~(-1)、MgSO_4·7H_2O 0.77 g·L~(-1)、初始pH=5.0、装液量12...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

江苏大学
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辅助因素强化Bacillus subtilis 10160豆粕液态发酵制备多肽研究

豆粕是大豆榨油后的副产物,蛋白含量较高(45%~55%),然其利用率很低。豆粕作为高性价比的优质植物蛋白资源,充分合理的利用它制备功能性蛋白和多肽可以大大提高其价值。本论文以多肽含量和得率为考察指标,在前人已对种子和发酵培养基研究的基础上进行单因素设计,并对发酵条件进行正交优化试验;再通过菌酶协同发酵及复合菌种发酵技术对豆粕的枯草芽孢杆菌液态发酵效果进行强化;并且利用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术对枯草芽孢杆菌进行诱变,提高其产蛋白酶的能力,进一步强化发酵效果。主要结论如下:(1)以制备高含量大豆多肽为目的,最终确定了Bacillus subtilis 10160豆粕液态发酵的最佳参数条件为:20%豆粕、0.5%KH_2PO_4量、1%玉米黄粉、10%接种量、发酵温度32℃、自然pH(5.8)和发酵时间24 h。在此最优条件下,发酵产物多肽的得率和含量分别为12.15%和56.26%。对发酵产物进行分析得出,豆粕液态发酵制...  (本文共86页) 本文目录 | 阅读全文>>