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酶催化合成L-茶氨酸的研究进展

L-茶氨酸是茶叶中的特征氨基酸,具有改善食品风味、放松减压、增强抗肿瘤药物疗效等多种功能。本文介绍了L-茶氨酸的生理功能及其  (本文共7页) 阅读全文>>

南京大学
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谷氨酰胺酶和γ-谷氨酰转肽酶酶法合成L-茶氨酸的研究

L-茶氨酸(L-Theanine)是存在于茶叶内的一种主要氨基酸,为茶叶的主要呈味物质,广泛应用于医疗、保健、食品领域。近年来,不断有研究报道L-茶氨酸具有降血压、抗肿瘤、神经保护等作用,其市场需求日益增长。目前L-茶氨酸的制备主要包括从茶叶中直接分离提取、化学合成和生物合成等几种方法,从产品加工成本、产品质量以及产品安全性等方面考虑,生物合成是制备L-茶氨酸发展趋势,而且在植物细胞组织培养和微生物酶促合成等生物合成方法中,微生物酶促合成因具有成本低,周期短等优点,成为最具潜力的方法,应用前景非常广阔。现发现能催化茶氨酸生物合成的酶有:茶氨酸合成酶、谷氨酰胺合成酶、Y-谷氨酰甲胺合成酶、谷氨酰胺酶、γ-谷氨酰转肽酶。本实验的主要目的是优化谷氨酰胺酶和γ-谷氨酰转肽酶的肽酶催化合成的L-茶氨酸的条件下,提高谷氨酰胺的底物转化率,为进一步利用微生物发酵法工业化生产茶氨酸打下基础。1.优化重组谷氨酰胺酶催化L-谷氨酰胺和乙胺生成茶氨酸...  (本文共47页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京师范大学
南京师范大学

硝基还原假单胞菌谷氨酰胺酶基因的克隆、表达及其在L-茶氨酸酶法合成中的应用

L-茶氨酸(L-Theanine)是一种茶叶中特有的氨基酸,也是茶叶的主要呈味物质。近年来的很多研究结果证实茶氨酸具有许多有益的生理功能,例如:保护神经、降低血压、抗肿瘤、放松等。因此,茶氨酸的制备与应用受到越来越多人的关注,成为了一个研究热点。谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS; EC3.5.1.2),是催化L-谷氨酰胺水解成为L-谷氨酸和氨的水解酶。有研究表明某些谷氨酰胺酶在碱性条件下,可以像γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyl transpeptidase,γ-GGT;EC2.3.2.2)一样催化L-谷氨酰胺和乙胺合成茶氨酸。由于以往的茶氨酸制备方法存在诸如产率低或副产物多的问题,而研究运用谷氨酰胺酶合成茶氨酸能改善这两个难题。本研究的主要结果如下:1、本实验首次克隆了硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens)的谷氨酰胺酶(pnGLS)基因序列。pnGLS基因全长909bp,编码302...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

广东药学院
广东药学院

γ-谷氨酰转肽酶酶学性质及其催化应用研究

γ-谷氨酰转肽酶在生物体内广泛存在,是谷胱甘肽代谢的关键酶之一,随着生物技术发展的快速发展,利用γ-谷氨酰转肽酶制备系列γ-谷氨酰基类化合物的研究已成为生物催化领域的热点。目前,本实验室筛选到一株γ-谷氨酰转肽酶高产菌株,并已探索了以菌体作为酶源催化合成茶氨酸的生产工艺。在此基础上,我们作了进一步的研究。目的以Bacillus licheniformis C12菌株为γ-谷氨酰转肽酶制备的菌种来源,通过对其产酶发酵条件优化、提取工艺、酶学性质及固定化该酶催化底物生产茶氨酸进行系统研究,为固定化该酶工业化生产茶氨酸打下基础。方法1.产酶发酵的诱导条件研究:采用底物诱导作用,通过不同底物(甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺)对菌体产酶发酵进行诱导,提高菌体的产酶量。2.酶的提取及酶学性质研究:采用溶菌酶法、反复冻融法、超声波法破碎细胞壁,高速冷冻离心后获得γ-谷氨酰转肽酶粗酶液,经硫酸铵分级沉淀及透析脱盐初步纯化后,得到酶的提取物。采用γ-谷...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

湖南农业大学
湖南农业大学

安吉白茶高氨基酸性状相关基因的全长cDNA克隆及功能的初步研究

茶树(Camellia sinensis(L.) O. Kuntze)是我国重要的经济作物之一,为多年生常绿木本植物,其作为栽培作物在中国已有3000多年的历史。安吉白茶是茶树中的一个特异品种,其特异性主要表现在春季新梢叶色的可逆性白化现象,其在白化过程中伴随着新梢叶绿素含量的急剧下降与氨基酸含量的显著上升,氨基酸含量是普通茶树品种的2倍左右。茶氨酸(L-Theanine)是茶树的特征性成分,是一种非蛋白质氨基酸,占茶树氨基酸总量的50%-60%,为茶树中具有重要生理活性的次生代谢产物之一。前期研究以安吉白茶为材料,采用SSH、cDNA-AFLP等技术已筛选出一批可能与安吉白茶高氨基酸性状存在直接或间接关联的差异表达基因。本研究在此基础上仍以具有高氨基酸含量的珍稀茶树资源--安吉白茶为材料,克隆与安吉白茶高氨基酸性状相关的基因,并对其功能进行初步分析,旨在为调控茶树氨基酸生物合成及提高茶树氨基酸水平提供理论与技术支撑。本研究的主...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>

江南大学
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γ-谷氨酰转肽酶的纯化和性质及其用于L-茶氨酸的生物制备研究

L-茶氨酸是存在于茶叶内的一种主要氨基酸,是一种具有多种生理功能且不会产生任何副作用的一种功能因子,在食品、保健和医疗领域中具有重要的应用价值。因此,研究生物法合成L-茶氨酸具有重要的现实意义。目前生物法生产L-茶氨酸最有效的酶是γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyltranspeptidase, GGT, EC 2.3.2.2)。GGT是生物体内谷胱甘肽代谢途径中的关键酶,也是催化转移L-γ-谷氨酰基的特异性酶,可催化L-谷氨酰胺和乙胺合成L-茶氨酸(γ-谷氨酰基-乙胺),在催化合成方面正成为研究者关注的热点。本研究首先从发酵食品虾酱中通过发酵法产GGT实验和酶法合成L-茶氨酸实验两步筛选法分离得到一株可用来高效合成L-茶氨酸的菌株SK11.004。通过形态观察和生理生化特性实验,结合16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌,并将其命名为Bacillus subtilis SK11.004。其16S rDNA基因全...  (本文共95页) 本文目录 | 阅读全文>>