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牛分枝杆菌单基因及双价融合基因DNA疫苗免疫效果的研究

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种人畜共患慢性消耗性传染病,本病在许多国家尤其是发展中国家仍然广泛流行,严重地影响到畜牧业的持续健康发展,每年给世界农业带来约30亿美元的损失,它不仅造成奶牛乳房炎、结核性胸膜炎等疾病,还会造成产乳率和乳质下降,更严重威胁着人类的健康。大多数国家对于牛结核病均采取检疫后扑杀的策略,这必然会造成巨大的经济损失。目前许多学者正在致力于牛结核病疫苗的研究,但迄今为止临床上还没有任何一种可用的疫苗。传统的卡介苗(BCG)是预防人结核病的惟一疫苗,但BCG的免疫效果极不稳定,不同地区的人群接种BCG后免疫保护效果差异极大(0%~80%)[1]。虽然有实验表明BCG可诱导牛产生抗牛分枝杆菌攻击的保护力,但BCG免疫后可使免疫牛产生PPD(结核菌素)试验阳性反应而干扰本病的诊断[2,3]。因此研制新型抗牛结核疫苗势在必行,正在研究的疫苗主要有减毒或增强的活疫苗、全菌体灭活疫苗、亚单位疫苗、初免-加强疫苗、DNA疫...  (本文共6页) 阅读全文>>

《植物研究》2007年02期
植物研究

山茶花叶片DNA提取及RAPD反应体系的研究

山茶花(Camellia japonicaL.)为山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)的常绿灌木或小乔木,是我国特产的名贵花卉之一,不但具有很高的观赏价值,而且在药用方面用途也很广泛,因而深受人们的喜爱。山茶花品种繁多,目前全国园艺品种已达500种左右,欧、美各国也先后培育出5000多个品种[1],这给山茶花系统分类和品种鉴定带来了一定的难度。RAPD(randomamplified polymorphic DNA)即随机扩增多态DNA技术,是建立在PCR基础上的一种DNA多态标记技术[2,3]。它不需要预先知道基因组序列,无需使用同位素或其它非放射性标记,在病原微生物的分型鉴定、物种的亲缘关系分析、遗传育种研究和特异表达基因的克隆与鉴定等诸多方面得到迅速而广泛的应用[4]。贾建航等运用RAPD标记对紫菜进行了遗传多样性检测和种质鉴定[5],罗素兰等利用RAPD对中国野生葡萄遗传多样性进行了分析[6],祁建民等应...  (本文共6页) 阅读全文>>

《生态环境》2007年01期
生态环境

活性污泥总DNA不同提取方法的比较

活性污泥是活性污泥法污水生物处理技术的主体,而研究活性污泥中的微生物群落对于探讨废水处理的反应机理、工艺改进、优化控制都具有重要意义[1]。传统的微生物培养周期长,工作量大,且被分离培养的微生物种类只占自然界微生物总量的1%左右,故其应用受到了很大的限制。近十余年来日益成熟的分子生物学技术给活性污泥的研究带来了新的希望。借助分子生物学技术可以进行特异的微生物的检测和鉴定,分析微生物群落的组成、结构和种群演替状况,建立高效、可靠的微生物总DNA提取方法是进行微生物分子生态学研究的基础,有关从土壤、水体、海洋沉积中提取DNA的方法已得到较好发展[2-3],但对从活性污泥中提取DNA的方法研究较少。DNA的提取根据破壁方法的不同可分为物理、化学和生物等多种破壁方法[4],而不同的破壁方法裂解细胞,释放DNA的效率是不相同的,适宜的裂解方法是DNA提取成功与否的关键。由于活性污泥中除具有带有代谢活性的微生物群体外,还具有内源代谢、自身氧...  (本文共3页) 阅读全文>>

《广东农业科学》2007年03期
广东农业科学

用于RAPD分析的树莓基因组总DNA提取初报

树莓由于含有大量人体所需要的糖分、有机酸、氨基酸、维生素、超氧化物歧化酶(SOD)[1-2]而备受人们的青睐。目前我国栽培的树莓品种大多数是从国外引进的[3-6],而我国拥有丰富的树莓野生资源,且多处于野生状态[7]。因此从分子水平方面研究其亲缘关系、分析进化过程,可以为我国树莓优质、高产、高效发展提供科学依据。分子生物学的诞生和发展带来了植物基因组分析技术的革命,而被分析的基因组DNA的质量则严重影响分析的结果。依据所采用的试剂不同,植物DNA提取的方法分为CTAB法[8]和SDS[9]法。树莓的叶片及其他组织含有大量的酚类、多糖等次生物质,这些次生物质与核酸形成复合物,使DNA难于溶解或产生不同程度的褐变,影响所提DNA的含量和纯度。树莓在分子水平上的研究在国内还未见报道,本研究首次对CTAB法、改良CTAB法及SDS法进行比较试验,试图摸索出适合于树莓总DNA提取的方法,为其分子生物学研究奠定基础。1材料与方法1.1试验材...  (本文共3页) 阅读全文>>

《广西林业科学》2007年01期
广西林业科学

大叶栎总DNA两种提取方法的比较

大叶栎(Castanopsis fissa·)又名裂壳锥、黧蒴栲、乌叶子,壳斗科栲属,亚热带林区主要树种之一[1],天然次生林先锋树种[2],大叶栎生长快,对土壤要求不严。可多代长期萌芽更新,采伐后萌芽生长快,枯枝落叶多且易分解,有利于林地的可持续利用[3]。但在广西只有桂东地区的苍梧县一带有大面积连片分布,而其他地区均为较小面积或零星分布,大叶栎的种质资源保护面临严峻的考验,为了利用ISSR标记对广西大叶栎的遗传多样性进行研究,为大叶栎种质资源的保护和利用提供科学依据,本文对大叶栎总DNA的两种提取方法进行对比试验,以期找到适合ISSR标记的DNA提取方法。1材料方法1·1材料用硅胶干燥法保存大叶栎的叶样,采5~10 g新鲜发育近乎完全的鲜嫩叶子放到带拉锁的自封袋中,加入50~100 g干燥的硅胶,保证硅胶的质量为新鲜叶子的10倍,摇动袋子使硅胶与叶子充分接触,叶子12小时内干燥,野外采样过程中一旦发现硅胶变粉红色要及时更换,...  (本文共3页) 阅读全文>>

《微生物学杂志》2007年01期
微生物学杂志

DNA指纹图谱技术在土壤微生物多样性研究中的应用

微生物是土壤生态系统中重要的组成部分。土壤中的微生物在生物圈中的生命元素(N、P等)和许多痕量元素(Fe、Ni等)的生物地球化学循环中发挥着至关重要的作用,它们参与土壤中能量和营养交换,对维持生态系统的平衡起着不可替代的作用。同时土壤微生物在土壤形成、发育、土壤肥力保持及高等植物生长方面也起着重要作用。土壤微生物是陆地生态系统中重要的生命体,其群落结构组成及其变化在一定程度上反映了土壤的质量及其健全性,因此对土壤微生物多样性研究具有重要意义[1]。1土壤微生物学多样性研究现状依赖于显微镜技术和纯培养技术的传统微生物学研究方法对土壤微生物多样性的描述与研究存在一定的局限性,据估计土壤中约有99%的微生物还不能在实验室被成功地培养出来[2]。20世纪中后期随着土壤微生物多样性研究向多方面发展,人们也尝试利用分析微生物细胞中某种指示成分(如磷脂脂肪酸PLFA)来研究土壤微生物的种群组成,但是这些方法的缺陷是无法保证细胞中某种指示成分在...  (本文共5页) 阅读全文>>