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胞外青霉素酰化酶产生菌的自然分离

青霉素酸化酶(Pe。icilli。,acylase)能水解青霉素生产6一氨基青霉烷酸(6-aminopenicillanteacid)简称6-APA。6-APA是半合成青霉素的中间体,随着固定化技术的不断发展,青霉素进化酶已广泛应用于半合成抗生素的工业生产中。跑外青霉素硫化国的产生首,巨大芽抱杆菌OadLI缸s。。ga【。劝。)是制备固定化酶生产6—APA的理想菌种。此菌种是中科院微生物所,经自然分局分诱少有种得到的81#优良菌种。本文着重报茫云药厂大生产中进行菌种自然分离的研究结果。1材料和方法l·l待分离菌种从高单位的发酵液中获取胞外青霉素同化酶的产生留n。1.2材料大豆蛋白跑(浙江生化)、苯乙酸(河南衡阳)、酵母膏(上海酵母厂)、发酵用水(哈药无盐水)、葡萄糖(牡丹江)、牛肉膏。石蜡(试剂)1.3培养基和配比1·3·l平M和斜面培养基牛肉青0。5%、酵母育队8%、葡萄糖队6%、氯化钠05%、大豆蛋白陈1.15%、琼脂l.6...  (本文共4页) 阅读全文>>

《基因组学与应用生物学》2014年03期
基因组学与应用生物学

D-氨基酰化酶的研究进展

随着氨基酸衍生剂、手性色谱柱和分析方法的发展,人们相继在微生物、植物和动物中发现了多种D-氨基酸(Wakayama et al.,2003)。目前,D-氨基酸已成为制备半合成抗生素、药物、杀虫剂、生物活性多肽和食品添加剂等的关键中间体,其开发利用成为氨基酸产业的一个新热点。D-氨基酰化酶(N-酰基-D-氨基酸酰胺水解酶)是一类能专一性水解N-酰基-D-氨基酸(图1),得到高纯度D-氨基酸的水解酶。此外,由于传统的提取和发酵法生产D-氨基酸的效率低,利用D-氨基酰化酶生产D-氨基酸受到工业界的日益重视。国内外学者对D-氨基酰化酶已进行了大量研究。早在1952年Kameda等(1952)首次在假单胞菌KT83中发现了D-氨基酰化酶,1978年又在另一株假单胞菌中发现了D-氨基酰化酶(Yukioetal.,1978)。Sugie和Suzuki(1978)在1978年也报道了产D-氨基酰化酶的Streptomyces olivaceus...  (本文共5页) 阅读全文>>

《发酵科技通讯》2010年01期
发酵科技通讯

米曲霉产氨基酰化酶最佳活力条件的研究

氨基酰化酶(Aminoacylase EC3.5.14)是生物体内进行氨基酸代谢的一种重要的水解酶[1]。它能立体选择性地将N-酰基-L-氨基酸水解,适合于多数外消旋氨基酸的拆分,得到L-氨基酸和N-酰基-D-氨基酸的混合反应液,然后利用二者溶解度差结晶分离,可以得到L-氨基酸[2]。酶法制备L-氨基酸是在有机合成与发酵法基础上发展起来的一个新工艺。氨基酰化酶最早是从动物的肝脏和肾脏中发现的,并且也从中提取到了酰化酶,但其酶的来源受到很大限制,所以人们开始尝试用微生物发酵提取酰化酶。经过对细菌、曲霉等菌试验,发现从曲霉菌发酵液中提取到的酰化酶,活力较高,并且通过在培养基中加入蛋白水解物,可将胞内酰化酶诱导到胞外,得到胞外酰化酶。因此,现在的氨基酰化酶都是由曲霉发酵得到的胞外酶。目前的研究热点多集中在从米曲霉中提取氨基酰化酶及该酶的固定化上,但其酶活力有待提高。我们对米曲霉所产生的氨基酰化酶的最佳活力条件进行了研究,通过在不同的反...  (本文共4页) 阅读全文>>

《氨基酸和生物资源》2009年01期
氨基酸和生物资源

米曲霉产氨基酰化酶最佳活力条件的研究

氨基酰化酶(Am inoacylase EC 3.5.14)是生物体内进行氨基酸代谢的一种重要的水解酶[1]。它能立体选择性地将N-酰基-L-氨基酸水解,适合于多数外消旋氨基酸的拆分,得到L-氨基酸和N-酰基-D-氨基酸的混合反应液,然后利用二者溶解度差结晶分离,可以得到L-氨基酸[2]。酶法制备L-氨基酸是在有机合成与发酵法基础上发展起来的一个新工艺。氨基酰化酶最早是从动物的肝脏和肾脏中发现的,并且也从中提取到了酰化酶,但其酶的来源受到很大限制,所以人们开始尝试用微生物发酵提取酰化酶。经过对细菌、曲霉等菌试验,发现从曲霉菌发酵液中提取到的酰化酶,活力较高,并且通过在培养基中加入蛋白水解物,可将胞内酰化酶诱导到胞外,得到胞外酰化酶。因此,现在的氨基酰化酶都是由曲霉发酵得到的胞外酶。目前的研究热点多集中在从米曲霉中提取氨基酰化酶及该酶的固定化上,但其酶活力有待提高。我们对米曲霉所产生的氨基酰化酶的最佳活力条件进行了研究,通过在不同...  (本文共4页) 阅读全文>>

《山西化工》2009年05期
山西化工

头孢菌素酰化酶的研究进展

引言近年来,由于头孢菌素类抗生素过敏反应小,对酸和β-内酰胺酶较稳定,具有抗菌谱广、疗效好、毒性低、同其他抗生素无交叉耐药性、与青霉素较少产生交叉过敏反应等优点[1],在医药合成工业中日益受到研究者的重视。研究发现,头孢菌素的抗菌部位为其母核7-氨基头孢烷酸[2](7-am inocephalospo-ranic acid,7-ACA),因此作为合成半合成头孢菌素的重要中间体,7-ACA的研究生产显得至关重要。目前,主要可以通过发酵产物头孢菌素C(cephalo-sporin C,CPC)经化学法或是酶法裂解得到7-ACA,见式(1)。化学法的反应条件较为苛刻,反应过程必须在超低温条件下进行,而且涉及到大量有毒有害的有机溶剂[3],会带来环境污染等问题。因此,对环境友好的酶法开始成为工业生产的新方向。在酶法制备7-ACA的过程中,无论是化学酶法还是一步酶法或两步酶法,都需要头孢菌素酰化酶的作用,才能最终得到产物7-ACA。因此,...  (本文共6页) 阅读全文>>

《微生物学报》2003年01期
微生物学报

一株产多种β-内酰胺类抗生素酰化酶菌株的筛选

头孢菌素酰化酶主要分为戊二酸单酰 7 氨基头孢烷酸酰化酶 (GL 7ACAAcylase,GA)和头孢菌素C酰化酶 (CephalosporinCAcylase,CPCAcylase ,CCA) ,分别催化戊二酸单酰 7 氨基头孢烷酸 (GL 7ACA)和CPC水解为 7 氨基头孢烷酸 (7 ACA) ,而 7 ACA是生产头孢菌素类抗生素的中间体 ,在医药工业中具有重要地位。GL 7ACA酰化酶已在工业上用于催化GL 7ACA水解产生 7 ACA。但是目前应用的GL 7ACA酰化酶种类有限且活力都不高 ,而CPC酰化酶的催化活力则更低 ,无法用于生产。因此 ,筛选新的高活力的头孢菌素酰化酶就显得尤为重要[1 ,2 ] 。寻找新型头孢菌素酰化酶的困难在于头孢菌素酰化酶产生菌在自然界中很少见 ,且此酶的表达量和活力均很低 ,另外在筛选技术上难以克服 β -内酰胺酶的干扰。因此建立快速 ,专一的筛选方法是关键所在[3,4] 。头孢菌...  (本文共8页) 阅读全文>>