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L-Gln高产突变株发酵条件的统计优化

0引言L-谷氨酰胺对人体具有重要生理作用和药理作用,其研究得到国内外学者的很大重视。目前,L-谷氨酰胺的主要工业化生产国是日本,韩国也有少量生产,均采用发酵法。我国药用谷氨酰胺需求量较大,已有不少企业研究L-Gln的发酵生产工艺,但只限于实验室小试或中试规模[1],尚无大规模的工业化生产,主要原因是缺乏优良菌种,发酵工艺不够完善,下游分离技术也不够成熟。谷氨酰胺高产菌株是生产的前提和基础,其生物合成的前体物质是谷氨酸。本实验将在前期的研究基础上(利用谷氨酸高产菌株作为出发菌株,对其进行了紫外线、亚硝基胍等复合诱变处理并用磺胺胍、甲硫氨酸亚砜等物质进行了筛选,得到了遗传稳定性较好的高产突变株Corynebacterium.glutamicum N-U-6。纸层析法测其Gln产量为33.54g/L。比出发菌株的产胺量(15.64g/L)高出1.14倍[2]。并通过单次单因子方法对其进行了培养条件的初步优化,Gln平均积累量可达到37...  (本文共6页) 阅读全文>>

《四川师范大学学报(自然科学版)》2004年03期
四川师范大学学报(自然科学版)

用亮氨酸抗性法选育L-甲硫氨酸高产突变株

0 引言在工业微生物育种方面已有很多成功利用基因工程方法进行育种的报道,但传统的诱变育种方法仍是当前十分有效的育种手段,特别是对遗传背景不很清楚的研究对象,诱变育种显得更为重要.然而诱变育种存在着很大的盲目性和随机性,诱变后产生少数正突变株的同时,大量的非定向突变株会给筛选工作带来很大困难.要从数以千计的突变株中选出比较理想的菌株,需要投入大量的时间和精力,这是诱变育种中存在的主要问题.如何提高诱变育种的效率,尽可能克服其盲目性和随机性,一定程度上取决于筛选方法的选取.本实验室从川西高原土样中分离的芽孢杆菌MV0 0 73,具M 海因(DL 5 甲硫基乙基乙内酰脲)水解酶活性,可将M 海因水解转化为L 甲硫氨酸(L Met) ,但其产量很低[1] .在氨基酸高产菌的诱变育种中,可通过筛选终产物结构类似物抗性突变株来获得氨基酸高产菌株[2 ,3] .亮氨酸Leu (COOHCH (NH2 )CH2 CH1CH3CH3)和Met(...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国生化药物杂志》2001年03期
中国生化药物杂志

拉曼被孢霉γ-亚麻酸高产突变株的选育

γ 亚麻酸 (γ linolenicacid ,GLA )是机体合成前列腺素及白三烯等多种生理活性物质的前体 ,在体内可发挥多种生物学功能 ,对于许多疾病的防治、抗老防衰、美容减肥有较好效果 ,因此现代医药工业、保健品及美容化妆品领域十分重视GLA资源的开发研究[1] 。GLA的生产过去以从月见草籽中提取为主 ,月见草生长周期长 ,资源单一 ,且易受天气等外界条件的影响。自从 1985年日本、英国等采用微生物发酵法生产出GLA以来 ,许多学者致力于发酵生产GLA的研究[2 ] 。许多种属的霉菌具有合成GLA的能力 ,但野生型菌株合成GLA的能力较低 ,不能用于GLA的发酵生产 ,需经诱变选育高产菌株。我们以拉曼被孢霉 (Mortierellaramanniance)AS 3.3413为出发菌株 ,经理化诱变剂复合处理 ,选育出高产GLA的拉曼被孢霉突变株F5。1 材料和方法1.1 菌株和培养基拉曼被孢霉 (Mortierella...  (本文共3页) 阅读全文>>

《抗生素》1984年02期
抗生素

静丝霉素产生菌的选育—耐磷高产突变株的分离

静丝霉素是由吸水链霉菌井冈变种产生0.05%,MgSO。0.025%,CaCO。0.5%,的一种多肽类抗生素,它的特性与萨腊菌素pH7.5。类似”’。经耐磷试验,发现添加磷酸盐对抗生 Q)发酵瓶”素的合成敏感,在较低浓度时即能抑制抗生 黄豆粉2%,可溶性淀粉2%,蛋白陈素的合成。野生型亲本菌株产生抗生素能力0.5%,蔗糖0.5%,MgSO。0.045%,K。HPO。较低。我们采用紫外线处理结合以磷酸盐作 0.045%,NaCIO.5%,CaCO。0.4%,pH为选择因子来分离耐磷高产突变株。7.5。 本文介绍耐磷高产突变株的选育过程以 三、培养条件 沙土管菌种抱子移接到及几株突变株的特性研究。斜面培养基上,在28℃培养七天;摇瓶发酵 为两级,种瓶接斜面抱子后,在往复式摇瓶 材料与方法 机上振荡*6次/分)培养,28t48小时,以 一、出发菌株 吸水链霉菌井冈变种5%接种量接入发酵瓶再于往复式摇瓶机上口什epic。yces hyg...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生物技术通报》2010年03期
生物技术通报

捷安肽素高产突变株96孔板筛选方法的建立

捷安肽素(JAA)是一种具有广谱抗真菌活性的抗菌多肽,可广泛用于防治各种作物、蔬菜和瓜果的真菌病害[1],具有稳定性好、抑菌持久、不易产生抗药性和对环境安全等优点,因此捷安肽素是一种极具研究开发价值和应用前景的新型生物农药[2]。由于JAA菌株产素水平还不够高,微生物发酵生产JAA未能实现工业化生产。菌种选育在提高微生物产物产量和纯度等方面都具有重要的作用[3,4],是实现工业化生产的基础,而快速灵敏的筛选方法是获得高产突变株的必要手段[5]。目前,JAA高产突变株的初筛是通过比较诱变后的单菌落在初筛平板上形成的抑菌圈直径和菌落直径的比值(抑菌比法)进行,但是由于现在的试验菌株已经是经多轮诱变后的高产突变株了,抑菌比法已不能灵敏的体现出突变株JAA产量的变化。因此,寻找快速、较大通量的菌种筛选方法是选育JAA高产突变株亟需解决的问题。本研究报道了用96孔板建立一种灵敏、快速筛选出JAA高产突变株的筛选新方法。1材料与方法1.1材...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国抗生素杂志》2011年02期
中国抗生素杂志

梧宁霉素C组分高产突变株的获得和产物初步鉴定

梧宁霉素为不吸水链霉菌梧州亚种(Streptomyces ahygroscopicus subsp.wuzhouensis)的发酵代谢产物,是一种高效低毒的防治真菌病害的生物农药。梧宁霉素含有4种活性组分,分别是A1、A2、B和C。A1和A2组分为四烯大环内酯类抗生素四霉素,B组分为肽类抗生素白诺4菌素,C组分为含氮杂环芳香族抗生素茴香霉素[1]。四霉素对酿酒酵母、茄皮镰刀菌、点青霉菌均具有较强的抑制作用[2]。茴香霉素对毛滴虫、内阿米巴和真菌等抑制作用较强,近期研究发现茴香霉素能明显抑制淋巴细胞的增殖活化,可能为开发免疫抑制药物提供新的途径[3]。本研究在对不吸水链霉菌梧州亚种诱变育种过程中,获得了一株抗白念珠菌活性较高的菌株。经鉴定为一株茴香霉素高产菌株。1材料与方法1.1材料1.1.1菌种出发菌株为不吸水链霉菌04(Streptomyces ahygroscopicus subsp.wuzhouensis 04);生物效价...  (本文共4页) 阅读全文>>