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鸟苷发酵条件的优化研究

鸟苷作为一种多用途的核苷,是抗病毒药物三氮唑核苷、无环鸟苷和食品增鲜剂5′-鸟苷酸的合成原料,在食品和医药工业中起着不可估量的作用,目前国内鸟苷的市场需求急剧上升。20世纪60年代日本就大规模开展了发酵法生产鸟苷的研究,并取得了一系列成就,而我国对鸟嘌呤系化合物的研究始于20世纪80年代。随着鸟苷工业用途的日益增长,发酵法生产鸟苷的研究也得到更广泛的重视。本研究以枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)TA208为供试菌株,研究了发酵法生产鸟苷的最佳发酵培养基组成以及发酵最优条件,在该条件下,鸟苷产量可达19.79g/L。1 材料与方法1.1 供试菌株枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)TA208,天津科技大学代谢控制发酵研究室保存菌株。1.2 培养基(g/L)1.2.1 种子培养基葡萄糖20,蛋白胨10,玉米浆10,酵母膏10,尿素2(分消),味精5,NaCl5,pH7.0~7.2,0.1MPa压力下灭菌1...  (本文共3页) 阅读全文>>

天津科技大学
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鸟苷产生菌的选育及其发酵条件研究

本文以代谢控制发酵理论为指导,重点研究了鸟苷高产菌的选育及其发酵条件。主要研究内容和结果如下:(1)建立了发酵液中鸟苷定量测定的“纸层析-色斑洗脱比色法”,并对该方法的应用条件进行了研究。(2) 以枯草芽孢杆菌TA1001 为出发菌株,通过硫酸二乙酯(DES)及紫外诱变逐步诱变,定向选育出一株鸟苷产生菌TA208,其遗传标记为腺嘌呤缺陷、8-氮鸟嘌呤抗性和蛋氨酸亚砜抗性(Ade-+8-AGr+ MSOr)。在未经优化的摇瓶发酵条件下可产鸟苷15.82g/L。(3)研究了菌株TA208 的摇瓶分批发酵条件。应用偏最小二乘回归分析法和正交设计法,分别优化出种子培养基和发酵培养基的配比,并对种子培养条件和发酵条件进行了研究。在优化条件下,TA208 菌株摇瓶分批发酵48h,产鸟苷20.74g/L。(4)以菌株TA208 为供试菌株,在最佳发酵条件下进行5L 自控发酵罐分批发酵,鸟苷积累可达25.60g/L,比摇瓶分批发酵条件下产量提高...  (本文共68页) 本文目录 | 阅读全文>>

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鸟苷产生菌的选育及其发酵条件研究

本文以代谢控制发酵理论为指导,重点研究了鸟苷高产菌的选育及其发酵条件。主要研究内容和结果如下:(1)建立了发酵液中鸟苷定量测定的“纸层析-色斑洗脱比色法”,并对该方法的应用条件进行了研究。(2)以枯草芽孢杆菌TA1001为出发菌株,通过硫酸二乙酯(DES)及紫外诱变逐步诱变,定向选育出一株鸟苷产生菌TA208,其遗传标记为腺嘌呤缺陷、8-氮鸟嘌呤抗性和蛋氨酸亚砜抗性(Ade~-+8-AG~r+MSO~r)。在未经优化的摇瓶发酵条件下可产鸟苷15.82g/L。(3)研究了菌株TA208的摇瓶分批发酵条件。应用偏最小二乘回归分析法和正交设计法,分别优化出种子培养基和发酵培养基的配比,并对种子培养条件和发酵条件进行了研究。在优化条件下,TA208菌株摇瓶分批发酵48h,产鸟苷20.74g/L。(4)以菌株TA208为供试菌株,在最佳发酵条件下进行5L自控发酵罐分批发酵,鸟苷积累可达25.60g/L,比摇瓶分批发酵条件下产量提高了23....  (本文共67页) 本文目录 | 阅读全文>>

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鸟苷工程菌的构建及其发酵条件的初步研究

本文以代谢控制发酵理论为指导,进行了鸟苷工程菌的构建及其发酵条件的初步研究。主要研究内容和结果如下: 1. 建立了发酵液中鸟苷定量测定的方法——离子交换法,对其最佳分离条件进行了研究,并与纸层析法进行比较,发现该方法准确度和精确度比纸层析方法高,可用于简单条件下对鸟苷发酵液中目的产物的测定。2. 利用质粒DNA 的原生质体转化法,将工程菌Q2901 中携带有磺胺胍抗性基因的重组质粒pUBLW2 导入鸟苷产生菌TA208 中,构建出鸟苷工程菌株TA424(pUBLW2/Km~r+SG~r)。3. 研究了鸟苷工程菌TA424 摇瓶发酵生产鸟苷的最佳条件。通过均匀设计和模式识别方法分别研究了鸟苷种子和发酵培养基的最佳配比。在最佳条件下,摇瓶分批发酵产鸟苷24.8g/L。4. 利用5 升发酵罐上的鸟苷分批发酵实验数据,基于构建的数学模型,采用MATLAB 数值应用软件进行非线性规划建立了菌体生长、产物生成和底物消耗动力学模型。该模型能够...  (本文共75页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
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产鸟苷的枯草芽孢杆菌G3发酵特性分析及条件优化

鸟苷是食品增味剂鸟苷酸和抗病毒药品(如利巴韦林等)的前体物,具有广阔的市场前景。由于微生物发酵法具有成本低、环境污染小且经济效益高等优点,已成为鸟苷的主要生产方式。微生物的鸟苷发酵性能受很多因素影响,提高产量并降低成本是鸟苷发酵工业研究热点。本文以产鸟苷的枯草芽孢杆菌G3为对象,通过分析该菌株的发酵特性,确定主要影响因素,并对这些因素进行优化,以期提高鸟苷产量并降低成本。取得的主要研究结果如下:(1)建立了鸟苷、次黄嘌呤及肌苷的高效液相检测方法。确定采用ZORBAX SB-Aq C18柱,流动相为乙腈和水,紫外检测波长248nm,流速为1 m L/min,并优化了色谱条件。在乙腈和水的比例为1:99的优化色谱条件下,鸟苷、次黄嘌呤和肌苷的理论塔板数分别为50867.37、45515.64和50488.8,三者之间分离度大于1.5,实现了很好的分离。同时,得到此条件下三种物质的线性范围分别为0.65 mg/L~65mg/L、0.3...  (本文共65页) 本文目录 | 阅读全文>>

江南大学
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鸟苷产生菌Bacillus subtilis JSIM-G518的改良及其发酵条件优化

鸟嘌呤核苷(guanosine,鸟苷)商品名称为GR,又名9-13-D-呋喃核糖基鸟嘌呤。其用途十分广泛,是食品和医药产品的重要中间体,可用于合成食品增鲜剂5'-鸟苷酸二钠、呈味核苷酸二钠和核苷类抗病毒药物如利巴韦林、阿昔洛韦等,也是用于制造三磷酸鸟苷钠等药物的主要原料。随着越来越多的企业进入生产利巴韦林、阿昔洛韦和5'-鸟苷酸的行列,国内鸟苷市场需求量激增。本论文以提高鸟苷产量为目标,通过对已分离菌株Bacillus subtilis JSIM-G518进行原生质体紫外诱变,分离得到一株产量较高的突变菌株JSIM-GU-124-19,然后对其发酵条件进行优化以进一步提高鸟苷产量,并对鸟苷补料发酵和调控进行了初步研究。其主要研究内容和结果如下:1.通过对酶解浓度、酶解温度的实验分析,确定了JSIM-G518原生质体形成率与再生率较高的最佳条件:溶菌酶终浓度控制在2.4 mg/mL,酶解温度36℃的水浴中处理40 min。对JSI...  (本文共51页) 本文目录 | 阅读全文>>