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P53基因质粒联合反义c-myc基因质粒对人膀胱癌细胞T24生长的影响

膀脱癌是泌尿系统中常见的肿瘤,其发病率约占恶性肿瘤的3%,是泌尿系统中居第二位的好发肿瘤[\癌症是一种基因病[’],是基因突变积累的结果,其发生和发展是多因素、多步骤的,所以癌症的基因治疗应该是多基因的综合治疗,而不仅仅是单基因治疗。癌基因和抑癌基因在正常细胞转化为恶性癌细胞的过程中起着重要的作用。核内原癌基因C-myc是参与细胞恶性增殖的核蛋白型基因。在许多肿瘤中都发现C-m吓基因表达增高卜‘。Chastoph-F等[幻报道,S-my。基因在人尿道膀肮癌细胞中过度表达和扩增,如果抑制C-叮吓基因的过度表达,则可能促进肿瘤细胞的凋亡,达到治疗的目的。反义核酸技术可选择性地抑制特定基因的表达,是行之有效的基因治疗肿瘤的手段,通过封闭rnRN,或与DNA结合成为3股链,从而达到抑制癌基因转录、翻译和表达的目的[‘1。p3基因是至今发现的与人类肿瘤相关性最高的基因,在多种肿瘤中普遍失活。Droller-MJ[’]发现因接触芳香胺而导致...  (本文共4页) 阅读全文>>

《黑龙江畜牧兽医》2007年04期
黑龙江畜牧兽医

猪外源生长激素释放因子pGRF基因质粒的研究进展

生长激素释放因子(GRF)是由下丘脑合成并分泌的多肽,可促进生长激素的合成与分泌,提高动物的生长速度。随着分子生物学的发展,将GRF基因质粒注入到动物体内,并改变动物机体的生长机能和营养调控已成为现代营养学研究的热点,文章对pGRF的结构特点、合成、表达以及在猪生产中的应用进行了概述。1GRF的概况及结构特点1.1猪成熟型GRF1-44的cDNA基因构成及研究过程1983年,报道了人GRF1-44完整的cDNA序列[1],即TATGCAGATGCCATCTTCACCAACTGCTACCGGAAGGTGCTGGGCCAGCTGTCCGCCCGCAAGCTGCGCCAGGACATCATGAGCAGGCAGCAGGGAGAGAGCAACCAAGAGCGAGGAGCAAGGGCACGGCTT。1993年,又相继报道了牛和猪的成熟型GRF基因序列,其中猪成熟型GRF1-44的cDNA序列[2]为TATGCAGATGCCATCTTCACCA...  (本文共2页) 阅读全文>>

四川农业大学
四川农业大学

EGF、Gln和pGRF基因质粒对早期断奶仔猪生长及肠道发育的影响

本试验通过考察乳源活性物质EGF、Gln和pGRF基因质粒单独使用及在不同组合形式下对早期断奶仔猪生长的影响、作用特点、途径及机制,为上述物质在早期断奶仔猪上的开发利用提供理论依据,特进行了如下四个试验。试验一选用28±2d日龄断奶,平均体重为7.83±0.45kg的同窝三元杂交猪(大×长×太)8头,随机分为2个处理,通过腹部皮下注射方式分别注射EGF和生理盐水,注射剂量4μg/kgBWday~(-1)。试验二选用21±2d断奶,平均体重为5.96±0.62kg的三元杂交猪(杜×长×大)25头,按照EGF注射剂量随机分为1、3、6、9μg/kgBWday~(-1)和对照组共5个处理,给药方式同试验一。试验三分为两个小试验,均选用21±2d断奶,平均体重分别为3.76±0.41kg和4.00±0.64kg的三元杂交猪(大×长×太)各9头,随机分为3个处理,给药方式同试验一。注射剂量及次数:第一个小试验分为1.0、0.5和0μg/k...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国畜牧杂志》2004年12期
中国畜牧杂志

猪生长激素释放因子基因质粒对猪生长发育的影响

通过调控动物内源生长激素 (GH)水平促进动物生长是近年来营养和生理研究的一个重要内容。直接注射外源生长激素GH[1~ 3] 、外源生长激素释放因子 (GRF) [4 ,5] 或采用生长抑素免疫中和、转GH/GRF基因动物等方法 ,能够有效调控动物生长 ,但操作繁琐 ,成本高 ,生产上应用不现实。由于肌肉注射外源DNA能在哺乳动物体内表达[6 ,7] ,如果将猪生长激素释放因子 (pGRF)基因的表达质粒直接注入猪体内 ,表达的GRF将促进内源GH分泌释放 ,这将是调控内源GH释放的一种较理想的方法。小鼠的试验表明 ,该质粒能在小鼠肌肉组织中特异性表达 ,对小鼠生长有促进作用。作者对猪的初步试验结果表明 ,pGRF基因质粒可以在猪体内表达 ,能显著提高猪的生长速度和饲料报酬。本试验拟研究注射不同剂量pGRF基因质粒对肉脂型猪的生长、胴体品质、肉品质、血液GRF、GH、IGF I及某些生化指标的影响 ,探讨其表达的效果、机理、适宜...  (本文共4页) 阅读全文>>

《上海畜牧兽医通讯》2007年04期
上海畜牧兽医通讯

导入外源GHRH基因质粒对犊牛健康的影响

国内外研究表明,生长激素释放激素(Growth HormoneReleasing Hormone,GHRH)基因质粒可以提高家畜的生长速度,增加饲料报酬,减少胴体中的脂肪含量〔1~3〕,而转GH基因动物经常表现出健康异常,牛生长激素在国内外的应用也大都因为其可能引起动物疾病而饱受争议〔1,4〕。本试验将构建的GHRH基因质粒首次应用于牛,在实际的生产中,此质粒同样可能对犊牛的健康造成不同程度的影响,进而通过食物链影响人类的健康。为了避免因此原因在GHRH基因质粒的使用上引起争论,本试验通过研究注射外源GHRH基因质粒对犊牛健康的影响,为该产品安全性方面的研究提供理论依据。1材料与方法1.1试验材料GHRH基因质粒由中国农业大学李宁实验室提供;质粒的大量提取由北京博大泰克生物基因技术有限责任公司完成;各项健康指标测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供;20头荷斯坦牛犊由北京锦绣大地农业股份有限公司提供。1.2饲养管理选取20头平均...  (本文共2页) 阅读全文>>

《岭南心血管病杂志》2006年02期
岭南心血管病杂志

构建重组组织纤溶酶原激活物基因质粒预防换机械瓣术后血栓

机械瓣膜置换术后需终生抗凝,给患者带来极大不便和危险性[1]。组织纤溶酶原激活物(tissueplaminogen activator,t-PA)是机体诱导纤溶激活、促进血栓溶解的重要因子[2]。我们设想构建tPA基因真核表达质粒,在行猪机械瓣膜置换术的同时转导,使心脏细胞产生高抗凝活性tPA,预防或减少术后血栓形成,实验结果报告如下。1材料和方法1.1材料动物:健康猪18只,体重40~50kg,雄性,8月龄。随机分为对照组9只和实验组9只。1.2方法1.2.1基因质粒的构建和表达根据3个EST序列及t-PA基因序列,设计3对引物将t-PA的三段序列从3个EST克隆质粒扩增,并且在3对引物末端分别引入酶切位点。分别用含有氨苄西林和氯霉素的LB培养基扩增,培养3个EST克隆菌株,提取3个EST克隆质粒,作为PCR扩增模板,并扩增3条t-PA片断,回收扩增产物并测序鉴定。质粒pSecTag2B和3条t-PA片断t-PA-1、t-PA...  (本文共4页) 阅读全文>>