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黑色素瘤抗原-4基因在结肠腺癌中表达的检测

黑色素瘤抗原(Melanoma antigen,MAGE)基因是一类肿瘤相关抗原基因,其编码的蛋白在多种恶性肿瘤中表达,而在正常组织(除睾丸和胎盘外)中均不表达[1,2]。黑色素瘤抗原-4(MAGE-4)基因是十几种MAGE基因中研究较少的一种,目前只见到肺癌和乳腺癌有较高程度的表达,而在正常组织中不表达或很少表达[3],因此其编码的抗原有可能作为肿瘤免疫治疗中的靶抗原。有关MAGE-4对于肺癌和乳腺癌免疫治疗的相关研究国外已有报道[4,5],并已取得一定效果,但其在结肠腺癌中的表达与靶向抗原的治疗研究报道甚少。本文采用结肠腺癌作为检测对象,旨在研究MAGE-4基因的表达与结肠腺癌之间的关系。材料与方法1.组织44份结肠腺癌组织标本均经病理诊断证实,其中高分化腺癌20份,中分化腺癌11份,低分化腺癌13份。15份癌旁正常组织标本取自距癌变部位边界5cm以外,且经病理证实无癌变。标本均来源于本院普外科手术治疗的患者。2.菌株与质粒...  (本文共3页) 阅读全文>>

吉林大学
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黑色素瘤抗原-4 DNA疫苗的构建及体内抑瘤效应的研究

本研究将人黑色素瘤抗原-4(MAGE-4)基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1+,构建真核表达载体pcDNA3.1+/MAGE-4,并对其表达进行鉴定。将pcDNA3.1+/MAGE-4转染小鼠结肠癌细胞CT26,建立表达人MAGE-4的鼠CT26细胞株。将质粒pcDNA3.1+/MAGE-4扩增后,作为核酸疫苗对小鼠进行肌肉注射,观察其对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响及对肿瘤的治疗和预防作用。结果表明,经质粒pcDNA3.1+/MAGE-4免疫治疗的小鼠其脾淋巴细胞CTL杀伤活性及脾淋巴细胞上清液中IL-2和IFN-γ明显强于或高于对照组,两者相比有显著性差异。在接种肿瘤细胞的小鼠中,经pcDNA3.1+/MAGE-4免疫治疗后能产生明显的预防和治疗肿瘤的作用。本研究提示MAGE-4作为肿瘤靶抗原可诱导产生明显的细胞免疫应答和体液免疫应答,对肿瘤的生成和发展有治疗和预防的作用。  (本文共110页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
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MAGE-4与热休克蛋白70融合DNA疫苗的构建及体内抑瘤效应的研究

本研究将MAGE-4基因克隆入pcDNA3.1+质粒中,之后用阳离子脂质体成功将pcDNA3.1/MAGE-4质粒导入小鼠结肠腺癌细胞CT26中,建立了表达人MAGE-4的鼠肿瘤细胞系CT26/MAGE-4。然后采用两步次级克隆的方法,构建真核表达质粒pcDNA3.1/HSP70后,再将HSP70基因双酶切亚克隆入pcDNA3.1/MAGE-4载体,获得了能够同时表达两种外源基因的重组真核表达质粒pcDNA3.1/HSP70/MAGE-4。将该真核重组体进行BALB/c小鼠免疫,分离脾淋巴细胞。进而通过MTT法检测小鼠脾淋巴细胞对CT26/MAGE-4细胞的毒性,证明了MAGE-4与Hsp70融合DNA疫苗能够显著增强小鼠脾淋巴细胞对CT26/MAGE-4细胞的杀伤作用。又将免疫后的小鼠脾淋巴细胞与CT26/MAGE-4细胞进行混合培养,采用ELISA法检测混合培养上清中IL-2和IFN-γ的水平,以确定针对MAGE-4的T细胞...  (本文共96页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国组织化学与细胞化学杂志》2013年02期
中国组织化学与细胞化学杂志

结肠腺癌组织中COX-2和PTEN蛋白表达与临床病理特征的相关性分析

研究表明,多种肿瘤中存在环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)与磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tension homology detected onchromo-some ten,PTEN)的表达异常,其表达与肿瘤的发生、发展有着密切的关系。本研究旨在分析COX-2和PTEN在结肠癌中的表达情况,探讨两基因表达与临床病理因素的关系,为结肠癌早期诊断、治疗以及预后评估提供实验依据。材料和方法1.一般资料收集2010年1月至2012年4月在我校附属医院因结肠癌而行根治手术切除的组织标本56例,术后均在本院病理科诊断为结肠腺癌。病例包括男39例、女17例;年龄35-81岁,平均(59.2±6.4)岁;所有患者术前均未行放化疗及免疫治疗。结肠癌Duke分期:A期9例,B期17例,C期27例,D期3例;组织学分级:高分化17例,中分化27例,低分化12例;淋巴结转移39例。同期在该院内...  (本文共3页) 阅读全文>>

遵义医学院
遵义医学院

MUC2和Villin在人结肠腺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究人类结肠腺癌组织、结肠腺瘤组织、正常结肠组织中黏蛋白2(MUC2)、绒毛蛋白(Villin)的表达水平及变化趋势,并探讨其在结肠腺癌发生、发展中的临床意义。方法:本实验经过严格筛选并最终选择10例正常结肠组织、16例结肠腺瘤以及40例结肠腺癌。使用Real-time PCR(实时荧光定量逆转录聚合酶链反应)和免疫组织化学染色法分别检测这3种类型结肠组织中MUC2、Villin的表达水平,同时结合临床病理资料,比较MUC2、Villin的表达与临床病理特征的关系。结果:1.MUC2在正常结肠组织、结肠腺瘤组织、结肠腺癌组织中的mRNA及蛋白水平的表达均呈逐渐下降趋势,结肠腺癌组与结肠腺瘤组相比以及结肠腺癌与正常组相比,差异均有统计学意义(P0.05);与肿瘤的浸润深度、淋巴、器官转移有关(P0.05);与肿瘤的浸润深度、淋巴、器官转移有关(P0.05)。结论:1、在“正常结肠-结肠腺瘤-结肠腺癌”的演变过程中,MUC2和...  (本文共52页) 本文目录 | 阅读全文>>

《浙江临床医学》2007年02期
浙江临床医学

结肠腺癌组织中Survivin蛋白表达及其临床意义

Survivin是近年发现的凋亡抑制蛋白[1],通过抑制细胞凋亡而与肿瘤发生发展有关[2],作者采用免疫组织化学方法检测结肠腺癌以及正常结肠黏膜组织Survivin蛋白的表达,探讨Survivin蛋白的异常表达与结肠腺癌分级、分期的生物学行为关系。现将结果报道如下。1资料与方法1.1一般资料收集本院1998至2000年有完整资料的结肠腺癌手术标本74例,男41例,女33例;年龄30~78岁,平均54岁。病理组织学分级:高分化腺癌16例、中分化46例、低分化12例。按Dukes临床分期:DukesA、B期30例,C、D期44例。取非结肠癌患者结肠黏膜10例作对照。采用调查表法进行随访,均获得随访结果。1.2方法组织用10%中性福尔马林固定、石蜡包埋、4μm切片,Survivin抗体(克隆系4F7,产品编号ZM-0458)及免疫组化试剂盒(PicTure二步法,产品编号PV-9000),用已知Survivin阳性的结肠癌切片作为阳性...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国生物制品学杂志》2013年05期
中国生物制品学杂志

鱼精蛋白1在结肠腺癌组织中的表达及其临床意义

结肠癌是我国高发的恶性肿瘤,占胃肠道恶性肿瘤的第三位,其发病率逐年增高,且有低龄化趋势[1]。目前结肠腺癌诊断主要依赖肠镜及腹部CT等,因此大多数患者确诊时已处于癌症晚期,失去了手术治疗的机会。因此,寻找特异的早期诊断标记及分子治疗靶点十分重要。鱼精蛋白(Protamines,PRM)被认为与男性不育有关[2],是精子细胞核内与DNA结合的主要蛋白。人类PRM基因族包括PRM1、PRM2、TNP2,这3个基因的产物在精子形成过程中发挥重要作用,能重新包装父系基因组,形成有功能的配子[3]。近年研究表明,鱼精蛋白1(PRM1)可能是一个新的结肠腺癌相关的肿瘤/睾丸(Cancer/testis,CT)抗原基因[4]。为明确PRM1在结肠腺癌诊断及治疗中的意义,本研究通过检测结肠腺癌组织中PRM1mRNA和蛋白水平的变化,阐述PRM1在临床诊断结肠腺癌中的意义及其作为基因治疗靶点的可能性。1材料与方法1.1研究对象选择2009年1月~...  (本文共4页) 阅读全文>>