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移动单孢菌丙酮酸脱羧酶基因的克隆及表达

丙酮酸脱羧酶可以催化α酮基羧酸脱羧,进而与醛类发生聚合反应,生成手性的α羟基酮类化合物。α羟基酮类化合物是一类重要的有机合成中间体,在制药工业上发挥着重要的作用[1~3]。不同来源的PDC催化生成的不同构型的α羟基酮类化合物。因此,利用不同来源的酶作为生物催化剂在合成不同构型的手性化合物中有着非常重要的意义。作者曾报道过酿酒酵母PDC基因的克隆与表达[4]。由于移动单孢PDC性质较稳定[5],具有更好的应用前景,作者从移动单孢菌中钓取了PDCzm基因,并将其插入高表达载体pET 22b(+),转化E·coliBL21(DE3),成功构建高表达菌株,为利用重组丙酮酸脱羧酶实现的生物转化进一步奠定了基础。1材料1·1质粒与菌株pET 22b(+)(美国Novagen公司),pMD18T Vector(大连宝生物工程有限公司),E·coliBL21(DE3)与JM109(沈阳药科大学张景海、夏焕章教授惠赠),Zymomonas mob...  (本文共4页) 阅读全文>>

《安徽农业科学》2007年07期
安徽农业科学

双孢蘑菇单孢分离与单孢杂交研究进展

双孢蘑菇[Agaricus bisporus(Lange)Sing]属真菌门担子菌纲无隔担子菌亚纲伞菌目伞菌科蘑菇属,因其担子上通常仅着生2个担孢子而得名,又称蘑菇、双孢菇等,双孢蘑菇是世界上栽培地域最广、生产规模最大、产量最高的一种著名食用菌,有“世界菇”之称。双孢蘑菇人工栽培已有300多年历史,菌株选育方法也得到不断发展。笔者对双孢蘑菇单孢杂交技术研究进展进行综述,旨在为双孢蘑菇育种技术的深入研究提供参考。1单孢育种遗传基础双孢蘑菇的繁殖方式有无性繁殖和有性生殖2种,其生活史在过去已得到很好的研究。有性生殖是双孢蘑菇生活史的主要部分。它通过两性核在担子中的结合或两性细胞以菌丝融合方式结合后形成新的个体。在典型的双孢蘑菇中,双孢担子占绝大多数,大约80%以上的担子是双孢的,而且,每个孢子通常具有“+”“-”2个不同交配型细胞核,因此是自体可育的,它们不产生锁状联合,具有结菇能力。所以次级同宗配合的遗传方式在其完整的有性生殖生活...  (本文共2页) 阅读全文>>

《河北农业大学学报》1988年03期
河北农业大学学报

平菇和香菇单孢的基因型测定

众所周知,同一种内菌株间交配称为近缘杂交。不同种、属、科间的菌株杂交常常不亲和,杂交很难成功,此种杂交称为远缘杂交。为了达到远缘杂交不同亲本基因重组的目的,必需把不同种、属的新生菌丝进行细胞壁脱壁,制备不同种、属的原生质体,在聚合剂的诱导下,将平菇和香菇的原生质体聚合在一起,使两者进行质配和核配。一也就是说,应用细胞工程技术克服远缘杂交不亲和性,而提高远缘杂交频率。目前,国内外食用菌研究工作者,都非常重视原生质体融合技术。而平菇和香菇的单泡基因型测定,为食用菌细胞融合技术和杂交育种提供有效的杂交亲本。 从1935年日本科学家及川、西门等人开始研究香菇的性别。直到目前的研究都充分证明香菇、平菇的单抱都有极性和不同的交配型(基因型)。香菇、平菇属于四极性异宗结合的食用菌,单抱本身是会形成子实体。 食用菌的“性”表现,有宗结合是指自身能孕的食用菌,如草菇、双抱菇等。异宗结合是指自身不孕的食用菌,如香菇、平菇、毛木耳和鬼伞等,它们必须由...  (本文共5页) 阅读全文>>

《国外农学.植物保护》1988年04期
国外农学.植物保护

利用野油菜黄单孢杆菌测试表面消毒剂对柑桔果实溃疡的检疫处理效果

1984年8月,在佛罗里达中部的温室贮藏中发现了柑桔由又an thomonas eaopestr主:(X·C) PV·Citri引起的细菌病害,自从细菌性演疡在1933年被消灭过后,这种病害还是第一次在佛罗皇达报道。遵照联邦和州的检疫机构制定和实施的方针,人们正试图消除这种新爆发的病害。为了防止成活细菌细胞人为扩散,贮藏和销售的果实,在入库程序中都必须进行表面消毒。现在大都采用氯或SOPP6。-d,U‘”Or比。止叨月ph阳盯。邻苯基苯芬钠)进粉果实消毒。 ’氯处理技术的应用,是在日本的研究基础上发展的,日本的研究材料是亚州型柑桔溃疡材料和方法 接种物 对X.C.PV.citri进行Vi七r。试验的单位,有佛罗里达农业分院的检疫机构和消费者服务组织,在佛罗里达检疫讥构的研究己经取得一定成效后,SOPF也得到应用。用氯处理时(150一250tzg/川J具足够的残效,PH6.0一7.6),未经冲洗的果实要充分打湿2分钟(浸泡或喷雾)...  (本文共5页) 阅读全文>>

《第二军医大学学报》1989年02期
第二军医大学学报

尖端单孢霉引起肺部感染的真菌学鉴定

尖端单孢霉是一种条件致病真菌,广泛存在于自然界的土壤及腐物中,当人体受本菌感染时,可引起足菌肿、肺部感染、脑脓肿及心内膜炎等疾病。我们收治1例肺部感染患者,经临床、真菌学及CT检查等方面研究鉴定,证实为支气管寄生性尖端单孢霉病,现报告如下。病例资料 患者,.女,27岁,内蒙藉。因间歇性咳嗽、咯血、多次咯出异物4个月于1985年3月20日八院。患者于1984年6月因劳累后出现频繁呛咳,伴胸闷、乏力及憋气感,随即咯血约50ml,当时x线胸片未见异常。同年10月又出现胸闷咳嗽,芽咯出一个If芑生米火之灰色块状物。此后每隔半月~1月咯出类似灰褐色块状物1次。服克霉唑共75 g未见效果而入院。患者曾于1976#i因“左肺结核瘤”行左肺下叶切除术。体格检查:体温37~37.5℃、呼吸20/rain,血压14.7/8。66 kPa(110/65mmHg)。胸廓有手术疤痕,未闻及眵音。肝脾未触及,Hb130g/L、WBC 7.5×10’/L,N...  (本文共3页) 阅读全文>>

《酿酒科技》2006年03期
酿酒科技

运动发酵单孢菌发酵生产乙醇研究进展

近年来,随着石油的不断消耗,人们正在积极寻找 替代能源—燃料乙醇[I间。燃料乙醇作为清洁能源,在 日益重视环保的今天,更加受到关注。然而,其普及的关 键还是如何降低成本。利用高浓度酒精发酵技术以及开 发利用优良菌种—运动发酵单抱菌(扮爪。Inonaslno- bilis)便成了热门。运动发酵单抱菌具有高产乙醇能力, 能耐高渗透压和发酵速度快等优点,有可能成为取代酵 母的酒精产生菌阎。但是该菌底物范围窄,限制了应用。 目前利用生物工程手段扩展了该菌的底物范围,但仅限 于实验室研究,还没有应用到工业发酵生产上。 1运动发酵单抱菌的生物学特性 运动发酵单抱菌(寿刀切Inolzas Ino6ilis)最早是Lin- der于1924年从龙舌兰酒中分离得到的网。Zmo6ilis为 革兰氏阴性、厌氧细菌,但能够耐一定的氧气冈。是圆端 肥粗的杆状细胞,周生鞭毛运动,长1.4一2.0x4一5.0 林m,通常成对,较少成短链。泛酸盐是唯一需要的生...  (本文共3页) 阅读全文>>