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哺乳动物P1精蛋白基因表达的研究

目的:研究哺乳动物P1精蛋白基因在大鼠和小鼠中的表达。方法:用RT-PCR法制备大鼠P1精蛋白(rP)cDNA,用小鼠P1精蛋白(mP1)DNA重组质粒(pUC8)制备mP1cDNA,rPcDNA和mP1cDNA经迪高辛标记后作为探针,用Northern杂交等技术分析基因表达情况。结果:rPcDNA与大鼠睾丸RNA有杂交  (本文共6页) 阅读全文>>

南京师范大学
南京师范大学

毛冠鹿睾丸组织cDNA文库的构建及PRM1基因的研究

为构建毛冠鹿睾丸组织cDNA文库,用TRIzol试剂提取总RNA,利用SMART(switching mechanism at 5′ end of RNA transcript)技术合成cDNA第一链,双链cDNA经LD-PCR(Long-distance PCR)扩增并经sfi I酶切和过柱分级分离后,克隆入经sfi I酶切的λTrip1EX2载体,经体外包装而成cDNA原始文库。该毛冠鹿睾丸组织cDNA原始文库含有独立克隆数为5.52×10~5,重组率达90.8%。文库扩增后,滴度达1.05×10~9pfu/mL,插入cDNA平均长度为1.01kb。通过随机挑取噬菌斑,并克隆测序,从该文库中克隆了毛冠鹿睾丸组织表达基因:P1精蛋白基因(PRM1)(GenBank序列号:DQ299383),该cDNA具有5’和3’非编码区,从第95至250个核苷酸为一完整阅读框(ORF),此阅读框编码一个51Aa的P1精蛋白。结果显示本文构建...  (本文共74页) 本文目录 | 阅读全文>>

《高技术通讯》2002年04期
高技术通讯

密码子优化的牛精蛋白基因在大肠杆菌中的表达

以PCR的方法得到牛精蛋白基因组基因 ,去其内含子 ,得到牛精蛋白cDNA ,克隆入原核表达载体 pGEX 2T中 ,组装成表达载体 pGEX 2T PE。利用大肠杆菌偏好的编码精氨酸的密码子CGT将野生型牛精蛋白基因中编码精氨酸的稀有密码子 (AGA或AGG)替换掉 ...  (本文共5页) 阅读全文>>

陕西师范大学
陕西师范大学

鲤鱼抗菌精蛋白的提取、分离、抗菌特性研究及抗菌机理探讨

本文以我国主要的淡水鱼类鲤鱼的废弃物——精巢为原料,采用现代提取、分离纯化技术,对精巢的抗菌精蛋白的提取、纯化及抗菌特性进行了系统的研究。同时,对鲤鱼抗菌精蛋白抑菌机理进行了探讨。为鲤鱼抗菌精蛋白的开发以及作为天然食品防腐剂的应用提供了理论基础。主要获得如下结果:不同鲤鱼品种和不同精巢发育期对鲤鱼抗菌精蛋白的影响研究表明:采用同一发育期不同品种鲤鱼的精巢为原料提取抗菌精蛋白,其得率及其抑菌活性没有显著差异;采用同一品种不同发育期的鲤鱼精巢为原料提取的抗菌精蛋白,其得率及其抗菌活性有显著差异,以第Ⅴ期为最高(得率及其抗菌活性分别为4.63%和84.5%)。本试验通过对硫酸浓度、提取温度、提取时间、以及蛋白质沉淀剂的选择等优化试验,获得了科学、实用、蛋白质得率高、抗菌活性较好的鲤鱼抗菌精蛋白提取工艺路线。主要工艺条件为:每1g鲤鱼精巢用4mL7.5%浓度的硫酸溶液,温度为10℃,提取时间2h,然后每1mL硫酸提取液用三倍体积95%的...  (本文共96页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中华医学遗传学杂志》1992年05期
中华医学遗传学杂志

精蛋白基因及其表达

人类染色体由DNA和蛋白质组成。在与DNA结合的碱性蛋白中最主要的是组蛋白,它见于所有体细胞和生精前期细胞的染色体。组蛋白参与构成了染色质的基本单位核...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中华医学遗传学杂志》1960年10期
中华医学遗传学杂志

原发男性不育患者精蛋白基因的初步研究

为了解男性不育患者精子发育中组蛋白到精蛋白的转换机理、转换障碍与不育的关系,从87例原发不育患者和9例正常可育者精液标本中,提取生殖细胞核碱性蛋白,进行醋酸尿素凝胶电泳。结果显示8例精蛋白异常,异常率9.19%,全部涉及精蛋白2组分的缺乏。异常与正常个体相比,精蛋白占核碱性蛋白比例由55.91±7.4%下降为4.18±2.23%,说明精蛋白的...  (本文共6页) 阅读全文>>