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全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞凋亡的诱导作用

维甲酸是一类与维生素A结构相似的天然或合成物质,临床上最早用于白血病的治疗,近来陆续有报道维甲酸能够诱导多种肿瘤细胞的凋亡,如乳腺癌、肺癌等。本研究以全反式维甲酸(all-transretinoic acid,ATRA)作用于骨肉瘤细胞,观察维甲酸对骨肉瘤细胞生长的影响。1材料和方法1.1试剂及仪器骨肉瘤细胞(MG-63)为本实验室冻存,ATRA购自Sigma公司,RPMI1640培养液为Gibco公司产品,胎牛血清为杭州四季青公司产品,MTT、二甲基亚砜(DMSO)购自武汉大风生物技术公司,An-nexin-Ⅴ-FITC凋亡检测试剂盒购自北京宝赛生物技术有限公司,原位细胞凋亡检测试剂盒为Roche公司产品。主要仪器包括ELX-800UV型酶标测试仪、FACSort型流式细胞仪(BCTON DICKSON)。1.2细胞培养MG-63细胞常规培养于25 ml培养瓶中,培养液为含10%FBS,100 U/ml青霉素和链霉素的RP-M...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国医科大学学报》1988年05期
中国医科大学学报

人骨肉瘤的超微结构研究

骨肉瘤亦称成骨肉瘤,多发生于青少年的四肢长骨千翁端,其特点是肿瘤细胞能直接产生肿瘤性骨质,恶性度甚高。本文就6例骨肉瘤病例进行病理学和超微结构的研究,分析瘤细胞和基质的形态特征和各型瘤细胞的组织发生。材料与方法 在手术过程中,切取0.5 X 0.5 x 0.5cm3的癌组织,立即浸饱于2 .5%戊二醛冷藏固定液中,进行前固定(4“C)2小时。在低温条件下将癌组织一分为二,一块经福尔马林固定,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜检查。另一块再修整成小于lmm”的数小块,经缓冲液漂洗后,用1%四氧化锹后固定(4。C)2小时,逐级脱水,E环nslZ包埋,聚合,超薄切片,铀铅双重染色,电镜观察。 观察结果病理学观察 6例骨肉瘤中,骨母细胞样骨肉瘤4例,纤维母细胞样骨肉瘤2例。瘤细胞呈显著的多形性及异型性,大小不等。骨母细胞样瘤细胞及核多呈卵圆形。纤维母细胞样瘤细胞及核多呈梭形或多边形。所有的瘤细胞胞核均大而深染,核膜粗厚,染色质颗粒粗大,常见...  (本文共4页) 阅读全文>>

《电子显微学报》1988年04期
电子显微学报

人骨肉瘤的TEM和EDX研究

骨肉瘤亦称成骨肉瘤,多发生在青少年的四肢长骨的干髓端,其特点是肿瘤细胞能直接产生肿瘤性骨质,恶性度甚高。关于它的形态学研究国外已有一些报道”一4’,但在国内却报道很少‘’一”。本文就10例骨肉瘤的材料,对瘤组织细胞进行了光镜和电镜观察,分析了各型瘤细胞和基质的形态特征,探讨了瘤细胞的组织来源,并进行了试探性瘤组织微区的元素成份分析。材料与方法 在外科手术治疗中,结扎血管曝露出瘤组织后,首先切取黄豆瓣大小的瘤组织及其周边组织,立即浸泡在O.IM二甲砷酸钠缓冲液(pH7.4)配制的2.5%戍二醛冷藏4℃固定液中,进行前固定二小时。在此期间将瘤组织一分为三,一块做光镜用,经石腊包埋,切片,HE染色,进行病理检查;另一块经脱水干燥后,离子镀膜,用能谱进行元素成份分析;剩余的再修成为小于lm.3的数小块,经缓冲液漂洗、1%四氧化饿后固定、逐级脱水、EponslZ包埋、超薄切片、铀铅双重染色,进行电镜观察。观察结果一、病理学观察电子显微学报...  (本文共6页) 阅读全文>>

山东大学
山东大学

姜黄素抑制人骨肉瘤细胞增殖和侵袭的实验研究

研究背景:骨肉瘤是最常见的骨恶性肿瘤,其发病人数大约占到所有骨恶性肿瘤的30%左右,尤其是小儿中发病率较高。骨肉瘤的十年生存率大约是60Y%到75%。目前对于骨肉瘤的治疗,一般是术前化疗,然后行局部广泛切除的保肢术或行截肢术,术后化疗。目前用于化疗的药物对于骨肉瘤细胞和人体正常细胞都有明显的杀伤作用,副作用较大,而这些较大的副作用也有可能进一步降低了骨肉瘤病人的生存率。因此,需要探索新的化疗药物,增加对骨肉瘤细胞的杀伤作用,同时降低对正常组织的损伤,从而进一步改善病人的预后。姜黄素是从植物中提取的一种天然的化学成分,在中国被作为一种中药来治疗多种疾病。目前的研究表明,姜黄素可抑制肝癌、胃癌、胰腺癌等恶性肿瘤;姜黄素可以通过作用于转录因子、凋亡基因、细胞信号分子等多种机制发挥抗肿瘤作用。姜黄素的药理作用广泛,毒性较低,在人体中的耐受性良好。p53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因,也是肿瘤细胞中最容易发生突变失活的基因。p5...  (本文共111页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

冲击波辅助甲氨蝶呤诱导人骨肉瘤U2OS细胞凋亡的研究

背景:骨肉瘤是最常见的原发恶性骨肿瘤。骨肉瘤的治疗很困难,预后也差。近年来研究发现应用大剂量化疗药物可以改善骨肉瘤的治疗效果,但是这一方法也可以导致许多副作用的产生。如何减少化疗药物的剂量、优化治疗效果是目前骨肉瘤患者治疗的目标。如何平衡化疗药物的剂量减少其副作用并保证治疗效果,仍然是骨肉瘤治疗的一项挑战。近年来的研究提示冲击波可能增加骨肉瘤细胞对化疗药物的敏感性。在本研究中我们应用甲氨蝶呤处理人骨肉瘤U2OS细胞,实验组辅助冲击波,评估细胞的凋亡程度,明确治疗效果并探索其潜在机制。实验方法:在本研究中,我们应用台盼蓝染色法确定最佳的冲击波参数。通过定性和定量分析法测定人骨肉瘤U2OS细胞对荧光物质荧光黄和钙黄绿素的摄取。应用人甲氨蝶呤ELISA试剂盒和MTT法评估冲击波辅助甲氨蝶呤处理人骨肉瘤U2OS细胞的效果。为探索冲击波辅助甲氨蝶呤治疗骨肉瘤的机制,我们应用免疫荧光法检测人骨肉瘤U2OS细胞膜表面的P2X7受体,应用ATP...  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

硒酸酯多糖诱导人骨肉瘤细胞凋亡抑制转移及其机制的实验研究

第一部分硒酸酯多糖诱导人骨肉瘤细胞凋亡的实验研究目的 研究硒酸酯多糖对人骨肉瘤细胞在体内外的抑瘤和诱导凋亡作用及对其细胞周期的调控。方法 分别采用0、30、60、120μg/ml硒酸酯多糖干预人骨肉瘤细胞株(OS-732)1、2、4、6天后MTT法在酶联免疫检测仪测光吸收值,绘制细胞生长曲线,计算细胞抑制率。并与酯多糖抑瘤率比较。形态学观察:荧光染色法,采用丫碇橙(AO)与溴化乙啶(EB)双重染色法染色上述硒酸酯多糖干预后的骨肉瘤细胞,在荧光显微镜下观察早期、晚期凋亡细胞的形态,计算细胞凋亡率。透射电镜下观察作用后早、晚期凋亡细胞。采用碘化丙啶(PI)染色药物作用后的骨肉瘤细胞,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡比例及细胞周期。提取硒酸酯多糖干预后骨肉瘤细胞株DNA,Agarose电泳观察细胞DNAladder形态。2×107人骨肉瘤细胞株接种于3组各7只4周龄裸鼠皮下,次日起腹腔给予生理盐水、低浓度组(4mg/kg/d)、高浓度...  (本文共102页) 本文目录 | 阅读全文>>