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产胞外蛋白酶细菌的快速筛选及其发酵产酶条件的初步研究

蛋白酶是催化肽键水解的一类酶,是一种重要的酶制剂,在食品、洗涤、医药、制革等工业中用途非常广泛[1]。到本世纪初,已经报道的微生物蛋白酶估计超过900种,国际市场上商品蛋白酶多达80多种,其销售金额占酶制剂总销售额的75%。由于细菌生长快、易于培养、产酶活性高,使其在工业化生产中具有动物、植物无法比拟的优越性。细菌产生的胞外蛋白酶种类很多:中性蛋白酶、碱性蛋白酶和酸性蛋白酶等。其中研究比较深入的碱性蛋白酶被认为是最重要的应用型酶类[2-3]。目前我国研究开发的碱性蛋白酶品种单一,产酶菌株多为从土壤中分离到的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽胞杆菌[4-6]。近年来,蛋白酶的分离纯化[7-9]、代谢调控[10-11]及基因克隆[12-13]等方面的研究报道较多,而有关细菌胞外蛋白酶菌株筛选的报道却相对较少。本实验对土壤中常温下产蛋白酶细菌的筛选方法和在实验室条件下发酵产酶条件进行了研究,并对其产酶机制进行了初步探讨。1材料和方法1...  (本文共3页) 阅读全文>>

《化学与生物工程》2017年10期
化学与生物工程

一株产木聚糖酶菌株的筛选及发酵产酶条件优化

我国是农业大国,每年都会产生大量可回收利用的农业废弃物,其中大部分为农作物秸秆,据统计我国每年农作物秸秆产量在6亿t左右,其中玉米秸秆总产量达到2.2亿t。秸秆中含有大量的生物质资源,如何合理高效利用秸秆中的生物质已引起世界各国的普遍关注,并逐渐成为农业可持续发展过程中至关重要的因素[1]。半纤维素约占木质纤维素物质的32%,仅次于纤维素(35%)。因此如何低成本、高效利用半纤维素类物质对充分利用我国大量秸秆资源具有重要意义[2]。半纤维素是由几种不同类型的单糖构成的异质多聚体,这些糖是五碳糖和六碳糖,包括戊糖(D-木糖、L-阿拉伯糖)、己糖(D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖)和糖醛酸(D-葡萄糖醛酸)等[3]。早期对半纤维素的研究主要集中在通过物理或化学的方法将其转化成小分子的糖类、化学品、燃料和能量,主要方法包括:过氧化氢抽提法、碱液抽提法、热处理法和机械处理法,但这些方法对设备要求较高、对环境影响较大,很难得到进一步的发...  (本文共6页) 阅读全文>>

《山东工业技术》2016年15期
山东工业技术

纤维素酶发酵产酶条件优化探讨

1 仪器、药品与方法1.1 实验仪器立式压力蒸汽灭菌锅、数显恒温水浴锅、隔水式恒温培养箱、电子天平、离心机、紫外分光光度计和超净工作台等。1.2 实验药品纤维素素粉、琼脂、纤维二糖、羧甲基纤维素、可溶性淀粉、酵母粉、酪蛋白氨基酸、丙酮酸钠等。1.3 培养基(1)发酵产酶培养基:蛋白胨3.0g/L,10.0g/L,酵母粉0.5g/L,磷酸氢二钾2.0g/L,吐温-80 2ml/L,硫酸铵4.0g/L,无水氯化钙0.3g/L,硫酸镁0.5g/L。高压蒸汽灭菌法,121℃,20min。(2)种子培养基:10.0g/L,酵母粉0.5g/L,磷酸氢二钾2.0g/L,硫酸铵4.0g/L,硫酸镁0.5g/L。高压蒸汽灭菌法,121℃,20min。(3)牛肉膏蛋白胨培养基:蛋白胨3.0g/L,牛肉膏3.0g/L,琼脂15.0g/L,氯化钠5.0g/L。p H7.0,高压蒸汽灭菌法,121℃,20min。1.4 实验方法(1)初始p H值:取培养...  (本文共1页) 阅读全文>>

《石油学报(石油加工)》1994年01期
石油学报(石油加工)

生物水合制取丙烯酰胺高产菌发酵产酶条件的研究

目tJ舀 丙烯酞胺是乙烯基系列聚合物的水溶性单体,广泛用作功能性聚合物的原料。 丙烯酞胺由丙烯睛水合生成。1954年美国氰化物公司首先采用硫酸水合法生产,但其工艺复杂,产品精制困难,且有环境污染等问题。70年代初,美国和日本同时开发了铜催化水合制取丙烯酞胺,并逐步成为世界上生产丙烯酸胺的主要方法。80年代,一些学者进行了生物法合成的研究,发现可用的微生物有棒状杆菌属〔‘〕、一卜诺氏菌属〔2’、节杆菌属〔别和假单胞菌属〔‘,5〕的某些菌株,并开发出生物催化水合制取丙烯酸胺的新方法。该方法具有反应条件温和、转化率高、选择性高、产品质量高,且无污染等特点。1985年,日本日东化学公司首次建成了生物法生产丙烯酞胺的工业装置、年产4火IO3t,其睛水合酶比活力为50一60个单位(拼mol/mg’m时〔6〕。1 988年又成功地开发了性能较好的菌体催化剂,使一单套装置生产能力提高到6x103t/a〔,〕。1991年使用第三代菌体催化剂,生产...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国酿造》2017年05期
中国酿造

酒醅中产纤溶酶细菌的分离及发酵产酶研究

心脑血管血栓栓塞性疾病是世界范围内引起死亡的主要原因,溶栓疗法是主要的治疗手段。纤溶酶可以预防和治疗心脑血管血栓栓塞症,具有溶解血栓和疏通血管的功效。目前,临床上使用的大多数溶栓药物是纤溶酶原激活剂或纤溶酶样蛋白如组织型纤溶酶原激活剂(tissue-typeplasminogen activator,t-PA)、尿激酶(urokinase-type plas-minogen activator,u-PA)和链激酶(streptokinase)[1]。这些药物疗效肯定,但是具有抗再灌注、发生急性冠状动脉再闭塞、出血并发症等副作用,并且价格昂贵[2]。因此,亟需开发天然来源的副作用较小或无副作用的替代品。为此,研究人员进行了大量的工作,分离到了多种纤溶酶产生菌,如根霉、芽孢杆菌、放线菌、好食脉孢菌、北虫草等[3-7]。其中芽孢杆菌是生产纤溶酶的优势菌,如纳豆激酶、枯草激酶及豆豉纤溶酶都是芽孢杆菌发酵的产物[4]。在白酒生产工艺中,酒...  (本文共5页) 阅读全文>>

《生物技术通报》2008年02期
生物技术通报

酶的固体发酵生产研究进展

固体发酵(Solid State Fermentation,SSF)是指培养基呈固态,虽然含水丰富,但没有或几乎没有自由流动水的状态下进行的一种或多种微生物发酵过程。在固体发酵中,底物(基质)是不溶于水的聚合物,它不仅可以提供微生物所需碳源、氮源、无机盐、水及其它营养物,还是微生物生长的场所[1]。与液体发酵相比,固体发酵成本低、产物浓度高、能耗少,且固体发酵有利于次生代谢产生,能够克服液体发酵环境抑制微生物代谢的缺点。固态发酵历史悠久,应用广泛,主要应用领域包括环境污染的生物修复、危险化合物降解、生物制浆、动物饲料和食品。生物杀虫剂等的生产。固体发酵在酶制剂生产中具有巨大的潜力,尤其是它所产的粗发酵产物可以直接作为酶的来源[2],这使得它更加受到重视。1固体发酵产酶的种类及产酶微生物固体发酵生产酶的种类较多,公开报道的有纤维素酶、木质素酶、蛋白酶、木聚糖酶、淀粉酶、果胶酶、脂肪酶、漆酶等。也有研究试图用固体发酵方法生产植酸酶、...  (本文共4页) 阅读全文>>