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苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白Vip与Cry蛋白的协同作用

苏云金芽胞杆菌是一种已被广泛应用的有效杀虫微生物 ,迄今已发现了十几种生物活性成分[1 ] ,其中新发现的营养期杀虫蛋白 (Vegetativeinsecticidalprotein ,Vip)是一种不同于传统杀虫晶体蛋白 (Crystalinsectidalprotein ,Cry)的胞外蛋白[2 ] 。这种杀虫蛋白普遍地存在于苏云金芽胞杆菌野生型菌株中 ,并对某些鳞翅目害虫具有较杀虫晶体蛋白高的杀虫毒力。对解决实际应用中杀虫晶体蛋白制剂虫谱窄 ,以及缓解最近发现的昆虫抗药性等问题具有重要意义。但是 ,目前对于如何正确使用营养期杀虫蛋白和杀虫晶体蛋白 ,尤其是在针对某种害虫的制剂生产中关于营养期杀虫蛋白与不同杀虫晶体蛋白的配比问题 ,以达到最佳杀虫并避免昆虫抗性产生效果等方面 ,尚未有相关资料报道。虽然已有人研究不同杀虫晶体蛋白之间对不同昆虫的毒力协同作用 ,并利用不同晶体蛋白间的正协同作用 ,构建了对特定昆虫高毒力的工程菌。...  (本文共6页) 阅读全文>>

华中农业大学
华中农业大学

苏云金杆菌嵌合杀虫蛋白的构建与毒性分析

作为重要的杀虫微生物,苏云金芽胞杆菌(.Bacillus thuringiensis,简称Bt.)被越来越多的应用在生物防治与转基因领域,但是当今生物杀虫剂面临的一个最为重要的问题是农业害虫日益增长的抗药性。因此,开发出更多苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因和寻找减缓昆虫抗性的方法,成为当今生物防治和转基因领域的热点。苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白(Vegetative Insecticidal Protein,简称VIPs)被誉为第二代生物杀虫剂,与传统上应用最为广泛的杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Protein,简称ICPs)相比,具有完全不同杀虫机理和杀虫谱。目前单独的VIPs和单独的ICPs转基因作物已经培育成功。然而,对于VIPs和ICPs两种蛋白协同使用的研究报道较少。鉴于此,本论文利用本室保存的一种密码子优化后的营养期杀虫蛋白基因vip3Aa7与其余几种优化后的cry杀虫晶体蛋白基因构建了几种新型的...  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

苏云金芽胞杆菌vip3Aa与cry1Ac融合基因的构建、表达与活性分析

微生物农药由于具有广泛的生产原料,防治对象不易产生抗药性,对环境友好等特点而逐步成为生物防治的支柱产业。其中苏云金芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis, Bt)是目前研究最多、应用最广泛的昆虫病原微生物。杀虫晶体蛋白(ICPs)和营养期杀虫蛋白(VIPs)是Bt的主要杀虫活性物质。Cry1Ac蛋白是苏云金芽胞杆菌在生长至稳定期时形成的伴胞晶体蛋白,对鳞翅目昆虫具有较高的杀虫活性。营养期杀虫蛋白Vip3Aa是Bt营养生长时期产生并分泌到细胞外的具有广谱杀虫活性的蛋白,Vip3Aa与Cry1Ac晶体蛋白没有序列同源性,作用机制不同,二者结合使用可以作为一种新型毒素应用于害虫防治。通过组建融合基因,一次发酵即可生产两种蛋白,缩减生产成本,改善Vip3Aa类蛋白分泌到细胞外给生产应用带来的不便,同时可以扩大Bt的杀虫谱、增强毒性,有效抑制害虫抗药性的产生。本研究通过重叠PCR构建了含有Vip3Aa11-GFP、Vip3A...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

苏云金芽胞杆菌HBF-18菌株毒力相关基因的克隆与活性研究

蛴螬是金龟子幼虫的总称,是地下害虫中最大类群,也是危害最大、造成损失最严重的种类。苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是目前研究最多、应用最广的昆虫病原微生物。由河北农林科学院植保所分离的HBF-18菌株对大黑鳃金龟(Holotrichia oblita)与暗黑鳃金龟(Holotrichia parallela)有较好杀虫活性,本实验室从中克隆了对暗黑鳃金龟与大黑鳃金龟都有活性的cry8Ga1基因。然而,cry8Ga1基因的表达产物杀虫活性与出发菌株(HBF-18)相比,有较大的差别,对大黑鳃金龟、暗鳃金龟的活性比出发菌株分别降低50倍与70倍。在本实验室克隆的其他对蛴螬有活性的cry8类基因则没有这种现象。由此推测HBF-18菌株中除了含有cry8Ga1基因外,还可能含有其他新的杀虫基因。但是通过传统的鉴定方法我们没有鉴定出来新的杀虫基因,本研究在菌株基因组测序的基础上,对HBF-18菌株中可能...  (本文共85页) 本文目录 | 阅读全文>>

《语数外学习(初中版)》2017年07期
语数外学习(初中版)

Cry

“Tom,what’s the matter with your brother?”“汤姆,你弟弟怎么了?”妈妈在厨房asked the mother in the kitchen.“He’s crying.”里问。“他在哭。”“Oh,nothing,Mum,”replied Tom.“I’m eating“没事儿,妈妈,”汤姆答道。“我在吃my cake.He is cryin...  (本文共1页) 阅读全文>>

《科学技术与工程》2012年14期
科学技术与工程

复合表面活性剂CRY—1的性能评价

化学复合驱技术是20世纪80年代发展起来的三次采油新技术,它是三次采油的重要组成部分,包括碱驱、聚合物驱、表面活性剂驱和复合驱[1,2]。表面活性剂驱油由于适用范围较大,受到的油藏条件限制较小,对石油的采收率提高幅度较大而得到了日益广泛的应用。但是高昂的价格又在某种程度上限制了其推广,在实际矿场中,常用的办法是复合表面活性剂作驱油剂,这不仅能大幅度提高采收率,也大大减少了价格,是一种比较理想的三次采油用剂[3]。目前常用的几种表面活性剂因为结构的限制常不可避免地带来了应用缺陷,如石油磺酸盐和石油羧酸盐抗盐性能差,易形成沉淀,吸附量也较大,稳定性不好;合成烷基苯磺酸盐的主要问题在于抗矿化度问题;木质素磺酸盐及改性产品虽然来源广泛,但是单独使用的时候驱油效果不理想。所以实验室在这些常用表面活性剂驱油实践的基础上,合成了一种复合型驱油用剂,并对其常用特征进行了室内实验。1实验部分1.1药品及仪器1.1.1药品表面活性剂CRY—1分析纯...  (本文共3页) 阅读全文>>

华侨大学
华侨大学

小菜蛾及甜菜夜蛾中肠液中Cry结合蛋白的分离与鉴定

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种革兰氏阳性菌,其在芽胞形成阶段产生的Cry毒素是一种对多种农林害虫具有特异杀虫活性的蛋白毒素。Cry毒素对非靶标生物无毒性,其制剂被广泛应用于农林害虫防治以及抗虫转基因作物改造。随着Cry制剂的大量使用,部分田间害虫已对Cry毒素产生抗性,抗性的产生严重妨害了Cry相关制剂的后续应用。因此,深入研究Cry杀虫作用时的分子过程,揭开Cry杀虫机理的全貌,是从根本上解决Bt发展问题的理论基础。目前公认的Cry作用机制模型主要有二种:穿孔模型和信号转导模型。Cry毒素与昆虫中肠刷状缘膜微囊(BBMVs)上受体的结合是Cry毒素发挥杀虫功能的关键步骤。至今有报道的BBMVs受体包括碱性磷酸酶(ALP)、氨肽酶N(APN)、钙黏蛋白(CAD)、ABCC2转运蛋白以及最新发现的V-ATPase亚基B。然而,昆虫中肠肠腔液中是否存在能够与Cry毒素结合的可溶性蛋白,以及...  (本文共92页) 本文目录 | 阅读全文>>