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复合诱变原生质体选育耐热碱性蛋白酶高产菌

碱性蛋白酶广泛存在于微生物中,该酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一,在制革、丝绸工业也有广泛的用途川。目前,酶制剂厂及洗涤剂工业迫切需求一种耐高温而且热稳定性很强的碱性蛋白酶,因此该酶制剂也是当前国内外研究的热点。一般认为地衣芽抱杆菌和短小芽抱杆菌所产生的碱性蛋白酶,组成洗涤剂时去污效果好m。我们用地衣芽抱杆菌作为原始菌株,经理化因素对其原生质体直接进行诱变处理,得到一株热稳定性很强的碱性蛋白酶高产菌株。1 材料和方法1.It种 地衣状芽抱杆菌(Bacdtos lichendormis)由本实验室筛选【’]。1.2 培养基 完全培养基(CM)(%):葡萄糖0.5,蛋白陈1.0,酵母膏0.5,NaCIO.25,pHg.5(固体培养基加0.2%琼脂)。 再生培养基(DM。):参照文献*进行。 斜面培养基1(%):牛肉膏1,蛋白陈1,葡萄糖0.5,NaCIO.5,琼脂2,pHg.5。 斜面培养基11:同培养基1,不加葡萄糖。 摇瓶发酵培养...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国兽药杂志》2016年11期
中国兽药杂志

三重复合诱变选育林可霉素高产菌株

林可霉素(Lincomycin,简称LK)是首先被发现的两个林可酰胺类抗生素中的一种,人们在1962年从内布拉斯加州林肯市附近土壤中分离得到一种链霉菌——林肯霉菌林肯变种所产生的抗生素,并因此得名,林可霉素无交叉耐药性且本身毒性较低,是临床上常用的抗生素之一[1-2]。林可霉素通过抑制菌体中蛋白质的合成起作用,能够抗大多数革兰氏阳性菌和少量厌氧的革兰氏阴性菌。其本身的毒性较低,且不像其他的抗生素那样有交叉耐药性,因此临床上被广泛用来治疗由革兰氏阳性菌引发的疾病。林可霉素和其下游的半合成产品被统称为林可酰胺类抗生素。林可霉素的抑菌机制是作用于敏感菌中核糖体,抑制肽基转移酶的活性,从而阻止肽链的延长,抑制了细菌细胞中蛋白质的合成。但在较高浓度的时候,也会对一些菌起到杀死的作用。林可霉素的产量低,不能满足工业化生产的需求[3],因此,提高林可霉素的效价对于大生产来说是必要的基础。随着科学技术的发展,基因工程、杂交育种、原生质体融合等技...  (本文共5页) 阅读全文>>

《食品与发酵科技》2017年04期
食品与发酵科技

亚硝基胍与紫外线复合诱变选育高产乳糖酶菌株的研究

乳糖酶又称β-半乳糖苷酶,是一种无味、无嗅,溶解后为浅棕色液体,且无毒无副作用的生物酶制剂,该酶可用于降解乳糖为半乳糖和葡萄糖,亦具有半乳糖苷的转移作用[1]。同时也是哺乳动物乳汁中一种重要的营养成分。多用于乳品工业。哺乳动物的乳糖酶活性随年龄增长具有典型的生理性降低,所以乳糖酶缺乏是广泛存在的世界性问题[2]。本研究以本公司菌种室保藏的米曲霉(Aspergillus oryzae)菌株AJ2010作为出发菌株菌,采用紫外线和亚硝基胍复合诱变的手段[3],以期获得一株遗传稳定性良好的高产乳糖酶菌株[12]。本研究乳糖酶是胞外酶,提取方便,而且耐热性高,稳定性好,通过对该菌株进行诱变选育,得到一株高产的乳糖酶菌株,以期促进米曲霉产生的乳糖酶在食品工业尤其是乳品工业中的应用[11-13]。1材料与方法1.1材料1.1.1菌株米曲霉AJ2010,本公司菌种室保藏。1.1.2培养基富集培养基:K2HPO40.2%、KCl 0.06%、N...  (本文共4页) 阅读全文>>

武汉工程大学
武汉工程大学

复合诱变筛选高效菌株及其对煤气化污水处理的研究

煤气化是指在一定温度和压力下,将煤转化成含有氢气、一氧化碳的洁净能源。煤气化在改善我国空气环境,减少污染方面具有非常重要意义。然而煤气化过程产生的煤气化污水具有高污染,难降解的特点,其COD含量一般在5000 mg/L左右,氨氮含量在500 mg/L左右,含有酚类、多环芳香烃化合物及含氮、氧、硫的杂环化合物等有机污染物,煤气化废水的处理利用能极大缓解对环境的污染。本文通过在煤气化污泥中筛选得到一株菌株,以复合诱变方式提高了菌株的降解能力,研究了菌株在可能的复杂环境中的适应性,得到如下结论:(1)在煤气化废水的污泥中,以苯酚为唯一碳源筛选得到3株菌株,分别命名为R,X,Y。初步对3株菌株降解性能测定,结果显示COD含量从1000 mg/L分别下降到了500 mg/L,550 mg/L,600 mg/L。氨氮含量从500 mg/L下降到了270mg/L,350 mg/L,350 mg/L。结果说明菌株R的降解效果较好,对菌株R进行了...  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物技术通报》2007年05期
生物技术通报

复合诱变法选育香兰素高转化率菌株

1引言香兰素(vanillin)也称香草醛,化学名称为3-甲氧基-4-羟基苯甲醛,是医药工业的重要原料和中间体,也可作为食品添加剂和其他化工原料,广泛用于医药、食品及化工行业。天然香兰素主要从干香荚兰豆中提取。随着国内外对天然香兰素需求的不断增长,仅从香荚兰豆中提取已不能满足要求,因此,通过生物技术生产香兰素受到广泛关注。国内外已经报道的生物法生产的香兰素产量距工业化水平还有一定差距[8]。鉴于出发菌株生产能力较低,有必要对其进行诱变来提高其转化率。2材料与方法2.1材料2.1.1菌株链霉菌Streptomyces sp.L1936(本实验室保存)。2.1.2主要药品NAD辅酶(Sigma),a,a'-双吡啶(Sigma),高氯酸,考马斯亮兰G250(Sigma)。2.1.3主要仪器SBA生物传感仪(山东省科学院生物研究所),高压液相色谱仪(日本岛津),紫外分光光度计(上海光谱仪器厂)。氦氖激光治疗仪(广东省激光研究所)。2.1...  (本文共4页) 阅读全文>>

《湖南农业科学》2011年22期
湖南农业科学

复合诱变在提高毛霉抗菌活性中的应用研究

总状毛霉(Mucor racemosus)在腐乳的酿造过程中,不仅对腐乳独特风味的形成有关键作用,而且其产生的多种酶类,如活性蛋白酶中的抗菌肽、细菌素、溶菌酶等都具有抗菌及抑菌功能,从而使腐乳能保存较长时间。毛霉菌种的优劣直接影响到腐乳的产量和质量。优良的生产菌种往往在使用过程中会出现性状退化现象,从而导致产品的质量下降,严重时甚至不能正常生产。因此,对生产菌种进行诱变处理,筛选出抑菌能力强、生长速度快、孢子数量多的菌株是十分必要的。为此,笔者通过紫外线-氯化锂及亚硝酸钠复合诱变,以期筛选出高抑菌活性的毛霉菌株。1材料与方法1.1供试材料试验菌株:毛霉M1(分离于广合腐乳);指示菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及蜡样芽孢杆菌(湖南科技学院微生物实验室);马铃薯和豆腐(市售)。1.2培养基PDA培养基;PSA培养基;诱变培养基(参考吴红艳并加以改进):PSA培养基加入3 g K2HPO4,1.5 g MgSO4?7H2O,1.5 g...  (本文共2页) 阅读全文>>