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在大肠杆菌中表达有活性的人STK11蛋白

STK11(serine/threonine kinase11)是1998年由两个独立的研究小组同时发现的基因[1,2],该基因定位于人染色体19p13.3区域,编码一种新的cAMP依赖性的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,分子量为60kDa。近年来的研究显示:该蛋白可能参与调控细胞周期[3]、p53介导的细胞凋亡[4]、Wnt信号通路[5]、TGF-β信号通路[6]、ras诱导的细胞转化[7]、调控细胞极化[8]及细胞的能量代谢平衡[9]等过程,推测该蛋白具有多种重要的生物学功能。利用大肠杆菌表达有活性的重组蛋白是深入研究蛋白功能和进行晶体结构解析的重要基础,比利用真核系统表达蛋白具有明显的优势。鉴于国外学者在大肠杆菌中表达的STK11融合蛋白没有检测到生物学活性[10],而目前国内的研究局限于检测该基因的突变情况[11,12],本研究利用本室克隆的STK11cDNA[13]在大肠杆菌中成功地表达了有活性的STK11蛋白,为该蛋白功能的...  (本文共4页) 阅读全文>>

《黑龙江畜牧兽医》2007年02期
黑龙江畜牧兽医

检测冻肉中大肠杆菌O157∶H7的两种方法比较

大肠杆菌O157∶H7属于肠出血性大肠杆菌(en-terohemorrhagic E.coli,EHEC),是EHEC的主要血清型。感染大肠杆菌O157∶H7可使人患腹泻、出血性结肠炎,也可引发溶血性尿毒综合征及血栓形成性血小板减少性紫癜等严重并发征。笔者运用胶体金免疫(Colloidal gold immunoassay,GIA)检测卡和荧光PCR技术,对东莞市108份冻肉中的大肠杆菌O157∶H7进行了检测,并对2种方法的检测效果进行了分析比较。1材料与方法1.1材料东莞市各镇(区)冻肉库中的冻肉,共108份。大肠杆菌O157∶H7、O1、O48、沙门菌等菌株,由华南农业大学兽医学院郭霄峰教授惠赠。Reveal大肠杆菌O157∶H78h检测系统,购自美国Neogen公司;大肠杆菌O157∶H7实时荧光PCR检测试剂盒,购自深圳太太基因工程有限公司。改良EC新生霉素增菌肉汤基础,购自广东环凯微生物科技有限公司。1.2方法1.2...  (本文共2页) 阅读全文>>

《食品科学》2007年03期
食品科学

温度生长预测模型在大肠杆菌O157:H7控制中的应用

自1982年美国Riley等首次报道肠出血性大肠杆菌O157:H7(EscherichiacoliO157:H7)导致的出血性肠炎暴发流行以来,全球发现该菌感染的国家和地区不断加大。1996年在日本[1]发生的大肠杆菌O157:H7的暴发流行,引起了全世界的关注。至2002年初,国内14个省、自治区、直辖市分离到该病源菌,在8个省、自治区、直辖市发现出血性肠炎病人,说明该菌对我国已构成威胁。我国是肉鸡生产大国,大肠杆菌O157:H7的污染会限制我国肉鸡产品的出口。大肠杆菌O157:H7以产Vero毒素为主要特征,感染后可引起出血性肠炎[2]严重者并发溶血性尿毒综合症和血栓性血小板减少性紫癜[3]等。该菌的感染剂量极低,有报道低达10个菌体[4]。本实验研究了营养肉汤中大肠杆菌O157:H7在温度、p H、N a C l浓度影响下的生长繁殖规律,确定了其最佳生长条件范围;建立了在最适pH、NaCl浓度下肉汤和鸡肉中该菌的温度生长预...  (本文共5页) 阅读全文>>

《生物学教学》2007年01期
生物学教学

大肠杆菌知识漫谈

在高中生物学教材中多处涉及到大肠杆菌,如T2噬菌体侵染大肠杆菌实验、第一种限制性内切酶是来源于大肠杆菌的限制酶EcoR、最常用的质粒是大肠杆菌的质粒、基因工程中常用的受体细胞是大肠杆菌等;在微生物与发酵工程中有关大肠杆菌的内容更多,如以正在分裂的大肠杆菌图片说明细菌的二分裂方式、用伊红和美蓝鉴别大肠杆菌、以大肠杆菌利用葡萄糖和乳糖为例说明酶合成调节等等,在许多练习中也常遇到有关大肠杆菌的题目;在实际生活中,大肠杆菌也与我们的身体健康有着密切联系;在教学中,常有学生问及大肠杆菌的知识,为此本文对大肠杆菌有关知识综述如下。1生物学特性1.1分类地位大肠杆菌(Escherichia coli)属于肠杆菌科,埃希氏菌属,故又叫大肠埃希氏菌,大肠杆菌株ATCC11775是该属的模式菌种。大肠杆菌的不同菌株间DNA相关性为80%。1.2基本特征大肠杆菌为两端钝圆的短小杆菌,一般大小约0.5~0.8μm×1.0~3.0μm,因生长条件不同,个...  (本文共2页) 阅读全文>>

《食品安全导刊》2018年27期
食品安全导刊

探讨食品中大肠杆菌检测方法

在人和动物的肠道中,大肠杆菌该样品与乳糖胆盐发酵类似,然后将是一种正常生存的菌群,其数量很多,其放入无菌培养皿中,再加入温度并且是非常主要的菌群。大肠杆菌是于45℃下的CDLJ JD显色培养基中食品类源性污染的检测指标,也是卫10 mL的量,并进行培养皿中溶液均生检测的指示菌种,若食品检测过程匀混合,可以通过快速转动培养皿的中发现大肠杆菌,那么就可以判定其方式,等溶液凝固以后,加入5 mL左已经被污染了。在食品卫生检测过程右,然后快速摇晃培养基,使其可以中,我国在检测状况方面仍然存在很均匀覆盖平板表面,等其凝固以后,多问题,所以,对食品中大肠杆菌的翻转培养基,在温度37℃中培养24 h检测是非常重要的。左右,然后观察其形态,颜色等变化[2]。1 传统的食品中大肠杆菌的检除此之外,平行设置两个稀释度培养基,测方法步骤是先稀释样本,通过稀释后,微生1.1 多管发酵法和滤膜法物可以分散为单个细胞,然后进行一定发酵法是传统的食品中大肠杆...  (本文共1页) 阅读全文>>

《湖北畜牧兽医》2016年09期
湖北畜牧兽医

犊牛大肠杆菌腹泻的诊断和治疗

犊牛大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌感染性引起的,主要感染新生犊牛,该病的特征是犊牛腹泻,也可称为犊牛白痢。1发病原因一是犊牛出生后不喂初乳或初乳喂量不足。母牛体弱,营养不良,矿物质、维生素不足与缺乏。二是犊牛舍狭窄,牛只密度过大,牛舍阴暗潮湿,阳光不足,防寒条件差,犊牛受寒感冒,以及断脐消毒不严等。2诊断可根据临床症状、流行情况、饲养状况及剖检变化等综合分析判定。临床表现可分为三种类型:(1)败血型:也称脓毒型。潜伏期很短,仅数小时。主要发生于产后3 d内的犊牛;大肠杆菌经消化道进入血液,引起急性败血症。发病急,病在短。表现体温升高,精神不振,不吃奶,多数有腹泻,粪似蛋白汤样,淡灰白色。四肢无力,卧地不起。多发生于吃不到初乳的犊牛。败血型发展很快,常于病后1 d内死亡。(2)中毒型:也称肠毒血型,此型较少见。主要是由于大肠杆菌在小肠内大量繁殖,产生毒素所致。急性者未出现症状就突然死亡。病程稍长的,可见典型的中毒性神经症状,先不安,...  (本文共2页) 阅读全文>>