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木聚糖酶酶活测定方法的探讨

在造纸工业中,木聚糖酶的应用越来越受到人们的重视,然而作为其重要参数的酶活通常由酶供应者直接提供。在实际使用时,由于酶储存时间、方式等多种因素的影响,酶活或多或少有所损失,因此有必要重新测定木聚糖酶酶活,研究和使用者必须掌握木聚糖酶酶活的测定方法。本文较全面地介绍了木聚糖酶酶活的测定方法。1木聚糖酶酶活的3种测定方法 使用分光光度计测定木聚糖酶酶活的方法有标准对照法、增量法和工作曲线法。1.1标准对照法1.1.1 原理 根据朗伯一比耳定律,在最大吸收峰处,溶液浓度(r)与吸光度(A)呈线性关系,因此在相同条件下,分别配制标准溶液和试样溶液,再在选定的相同波长下,分别测定A标和A样,按照下式计算试样溶液的浓度(c样),即 A标/A样===。拆/f样 (1) 。样=c标·4样/A标1.1.2操作方法 标准溶液的配制:3.0ml反应液里含有1.0ml 1.O%的木聚糖溶液、O.2ml蒸馏水及1.8mI磷酸缓冲溶液,50LC反应15mi...  (本文共2页) 阅读全文>>

兰州大学
兰州大学

饲用木聚糖酶活力的稳定性研究

为研究饲用木聚糖酶在不同应用环节中活性的稳定性,分析了液态木聚糖酶经不同温度处理不同时间的活性变化、固态木聚糖酶热稳定性的评价、饲料原料对固态木聚糖酶活性测定值和热稳定性的影响;加以常见饲料原料中戊聚糖含量、木聚糖酶酶活特性以及对小麦体外酶解效果的浅析结论为依据,结合饲喂动物的消化道环境对饲用木聚糖酶性能评价方法提出自己的建议。结果表明:15℃以下的温度条件下,72h内的处理均对液态木聚糖酶的活性无明显影响(P>0.05);25℃以上的处理会引起液态木聚糖酶活性测定值的明显波动(P<0.05),处理温度升高或处理时长增加除引起液态木聚糖酶活性损失明显加快外,还会导致液态木聚糖酶的酶活测定值明显高于经冷藏后的酶活测定值。玉米、小麦、棉粕、豆粕、菜籽粕溶入酶稀释溶液中均对固态木聚糖酶的活性测定值无明显影响(P>0.05),预混料溶入酶稀释溶液中会显著降低固态木聚糖酶的活性测定值(P<0.05);糖蜜、豆油、鸡鸭油、液态磷脂溶入酶稀释...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>

《粮食与饲料工业》2001年12期
粮食与饲料工业

混合非淀粉多糖水解酶酶活测定方法的改进

目前非淀粉多糖水解酶已被广泛应用于食品、饲料、洗涤剂、造纸、酿造等行业中。在饲料领域中 ,为了增加饲料的消化率 ,提高抗营养物质的吸收量 ,往往在其中添加非淀粉多糖水解酶[1] 。由于这些水解酶添加于饲料后要与饲料一起造粒 ,势必造成酶活的损失 ,因此就需要对各个环节中酶的实际活力进行检测。在食品领域中 ,食品物质的酶解以及果汁的制备等往往也会用到非淀粉多糖水解酶。在一些挤压、膨化食品的加工中也需要添加酶类。在洗涤剂中添加多糖水解酶利于织物的清洗。因此对多糖水解酶的活力进行定量检测是非常必要的。由于非淀粉多糖水解酶是催化各种多糖底物中的糖苷键断裂产生还原糖 ,其酶活的大小也是根据反应产生的还原糖量来计算的 ,或是根据酶反应体系的粘度变化来计算的。当它们共存时由于各个酶的酶活测定指标雷同 ,容易发生相互干扰。在商品酶制剂中存在的一些糖类物质也会影响酶活的测定。非淀粉多糖水解酶作为添加剂添加物料中后 ,酶浓度将大大降低 ,部分酶的酶...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国饲料》2008年04期
中国饲料

木聚糖酶酶活测定方法的研究

木聚糖酶能降解木聚糖,提高麦类日粮的营养价值,在饲料中的应用也越来越广泛(Rotter等,1990;Petersen和Aman,1989;Inborr和Ogle,1988)。由于酶的生产来源广泛,酶活性也有很大的差异,另外,饲料添加剂或饲料加工过程也会对酶的活性产生不同程度的影响(Yu和Tsen,1993)。因此,如何正确测定酶制剂中酶的活性,成为酶制剂的研究和应用中必须解决的问题。本试验以还原糖法为基础,研究了影响木聚糖酶测定的条件。1材料与方法1.1仪器设备电子天平(精度为0.0001g)、pH计、721光栅分光光度计、恒温水浴锅、秒表、三角瓶、振荡器、试管、容量瓶等。1.2试剂与溶液1.2.10.1mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)A液:用蒸馏水溶解8.0g无水醋酸钠,并定容至1000mL。B液:用蒸馏水溶解6.2g冰醋酸,并定容至1000mL。用B液调节A液的pH值至4.5。1.2.21%(w/w)木聚糖底物溶液...  (本文共3页) 阅读全文>>

《饲料工业》2009年10期
饲料工业

不同运输条件下液态木聚糖酶的稳定性研究

在酶制剂的应用流程中,液态酶的运输是一个重要环节,受成本和运输条件的制约,冷链运输还未广泛应用。酶作为一种活性蛋白质,受温度的影响较大,高温可引起酶丧失催化能力,这方面的研究有很多,但还未见运输对液态酶活性影响方面的研究。本试验通过模拟不同温度下不同时间(时长)的运输条件,比较液态酶经不同处理后的酶活测定值,探索液态酶在运输过程中的活性变化情况,为酶制剂的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料液态木聚糖酶为毕赤酵母液态发酵产品,酶活10000U。酶活单位定义:在50℃、pH值5.0条件下,1min水解底物产生1μmol摩尔还原糖(以木糖计)所需的酶量,以U表示。1.2试验方法将样品密封后置于-5、-20℃冰箱或15、25、35、45、55℃烘箱中,每个处理设3个重复,经24、48、72h处理后取出,以4℃冷藏酶液为对照来评价不同处理对酶活测定值的影响程度;再将经少量取样后的各处理组放入4℃冰箱中存储48h,以4℃冷藏酶液为对照...  (本文共3页) 阅读全文>>

湖南农业大学
湖南农业大学

菌糠饲用酶制剂的研究

为了合理利用废弃物菌糠,变废为宝,本实验以菌糠为原料开发饲用酶制剂的研究,同时也从酶的角度,探讨了用菌糠饲养动物的效果。本研究用DNS显色法测定了纤维素酶、木聚糖酶、α-半乳糖苷酶、果胶酶的活力,用Folin显色法测定了蛋白酶活力,用钼蓝法测定了植酸酶活力,然后分别测定几种菌糠中的纤维素酶、木聚糖酶、α-半乳糖苷酶、果胶酶、蛋白酶、植酸酶的活力,并进行比较,从而筛选出最佳的菌糠;接着用不同方法来浓缩粗酶液,然后对沉淀物进行透析,再进行真空干燥,获得干酶制剂;试验过程中也对酶的部分酶学性质进行了研究。通过试验得到了以下结果和结论:1.用DNS显色法来测定纤维素酶、木聚糖酶、α-半乳糖苷酶、果胶酶的活力具有操作简单、灵敏度高和重复性能好等优点。2.分别测定了五种菌糠中的纤维素酶、木聚糖酶、α-半乳糖苷酶、果胶酶、蛋白酶、植酸酶的活力,经比较和分析,确定香菇菌糠为开发饲用酶的最佳菌糠,同时也从酶的角度对菌糠饲喂效果进行了解释。3.确定...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>