分享到:

由重组腺相关病毒1/2载体携带的LacZ报告基因在脐血间质干细胞中的表达

目的:观察由重组腺相关病毒1/2载体携带的LacZ报告基因在体外培养的脐血间质干细胞中的表达情况。方法:实验于2005-10/2006-02在上海交通大学附属新华医院科研中心完成。①以孕龄近60d的杂种妊娠犬的脐带血作为实验用脐血间质干细胞的标本来源。重组腺相关病毒1/2载体-lacZ基因(北京本原正阳基因技术有限公司)。②无菌条件下采集妊娠犬脐带血,置于预装有肝素的离心管中,与Hanks液1∶1混合均匀,叠加于相对密度为1.077的淋巴细胞分离液上,梯度离心分离后进行培养和扩增。③取第4代脐血间质干细胞,经胰酶消化后吹打成单细胞悬液,以5×104/孔接种于24孔板内,随机数字表法分为转染组20孔、空白对照组4孔。转染组将重组腺相关病毒1/2载体-lacZ报告基因(1×1012v.g.mL-1)用不含血清的IMDM培养液作系列滴度稀释,分为5个滴度,即感染复数分别为每个细胞1×102,1  (本文共5页) 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

腺病毒介导LacZ基因在神经干细胞中的转染与表达

长期以来,中枢神经系统(Central nervous system,CNS)的损伤与再生一直是困扰人类健康的难题,也是科学家们致力于研究的焦点。19世纪末至20世纪初,人们逐渐发现低等脊椎动物和两栖类的中枢和外周神经损伤后都能再生;而在哺乳动物中,断定只有外周神经系统(Peripheral nervous system,PNS)损伤后可以再生,CNS则没有再生能力,这种观点使人们对神经系统疾病的治疗受到了很大的限制。虽然传统的药物及手术治疗取得了一定的进展,但是有的治疗仍不能达到满意的效果。然而,科学家们从未放弃对CNS再生的研究。近年来,随着生物医学技术迅猛发展,CNS再生研究的不断深入,逐渐证明哺乳动物CNS仍具有较大的可塑性,尤其是近十多年来对干细胞(Stem cell)的研究使人确信,包括人类自身在内的哺乳动物CNS在一定条件下是可以再生的,新生的神经元可以修复CNS损伤,而干细胞移植无疑为CNS疾病的治疗带来希望的曙...  (本文共46页) 本文目录 | 阅读全文>>

《神经解剖学杂志》2003年02期
神经解剖学杂志

腺病毒载体介导的LacZ基因在神经前体细胞的转染和表达

为了观察含报告基因 L ac Z的重组 5型腺病毒载体 ( Ad5CMVLac Z)在神经前体细胞转染和表达的量效关系并探讨用该载体构建基因修饰细胞的可能性 ,本研究用不同滴度 ( 1× 10 3~ 1× 10 1 0 PFU/ml)的 Ad5CMVLac Z转染体外培养的 SD胎鼠(胎龄 12 d)海马神经前...  (本文共4页) 阅读全文>>

《苏州大学学报(医学版)》2002年06期
苏州大学学报(医学版)

LacZ基因在哺乳动物细胞中的稳定表达及其检测方法

目的 构建含有LacZ标记基因的真核表达载体和稳定表达LacZ的转基因细胞 ,并建立简易有效的检测方法。方法 采用脂质体转染法将装有LacZ基因的真核表达载体 pcDNA3导入鼠成纤维细胞L92 9,G418筛选LacZ基因稳定表达细胞株 ,并应用超声波破碎和贴...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中华显微外科杂志》2003年03期
中华显微外科杂志

腺病毒介导的LacZ基因在培养许旺细胞中的表达

目的 观察腺病毒介导的LacZ基因在培养许旺细胞中的表达。 方法 用报告基因LacZ重组腺病毒感染原代培养的许旺细胞 ,X gal组织化学染色检测LacZ基因的表达。  结果 用LacZ重组腺病毒感染培养的许旺细胞时 ,有较好的量效...  (本文共3页) 阅读全文>>

《广东医学》2005年04期
广东医学

转LacZ基因骨髓间充质干细胞体内造血分化的初步研究

目的 初步探讨小鼠骨髓间充质干细胞在体内造血细胞分化的潜能。方法 利用转LacZ基因小鼠MSCs输注X射线亚致死量照射的BALB/C小鼠,2个月后取骨髓细胞作体外甲基纤维素培养和X -Gal...  (本文共3页) 阅读全文>>