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p16基因转染对肾癌细胞生物学特性的影响

采用病毒载体进行基因转移是目前肿瘤基因治疗中的重要技术手段 ,其中腺病毒载体以其具有更广泛宿主范围 ,可以感染非分裂相细胞 ,感染效率高以及不与宿主细胞染色体整合、不存在致畸、致突变等优点而运用颇广[1 ,2]。本研究拟将抑癌基因 p16通过腺病毒载体导入小鼠肾癌Renca细胞株中 ,观察腺病毒载体对Renca细胞的转染效率及 p16基因导入后肿瘤细胞的生物学行为 ,并采用ELISA法检测Renca细胞中 p16蛋白的动态分泌水平 ,为抑癌基因疗法提供实验依据。1材料和方法1.1动物及细胞株BALB/C小鼠 ,10~12周龄 ,体重21g~23g,购自上海必凯实验动物有限公司。293病毒包装细胞由德国柏林MDC分子医学中心ThomasBlankenstein博士惠赠。小鼠p16和LacZ重组腺病毒载体Adp16和AdLacZ皆由日本癌症研究会分子生物学治疗研究室Hamada博士惠赠。小鼠Renca肾癌细胞株由美国国立癌症研究室W...  (本文共4页) 阅读全文>>

《张家口农专学报》1998年02期
张家口农专学报

报告基因在监测基因转移中的应用新进展

从实用意义上来说,基因转移不仅包括对目的基因转移的成功与否进行监测,而且包括预期的转基因表达模型的建立。这种转化体的检测和筛选往往存在很大的困难。由于应用以GFP和luc为基础的报告分子能够对转入基因的表达进行灵敏而无害的监测,因而大大地推动了基因转移技术的发展。对GFP分子的改进,使其在各种基因转移过程中得到了更加广泛的应用。随着成像技术日益成熟,luc测定的高灵敏性,使许多人在设计基因转移方案时,把它也作为报告分子。由于能够对活组织中的基因表达连续进行精确的监测,这些多用途的报告分子对其它原有的报告分子系统,如俘一半乳糖昔酶、分泌型碱性磷酸酶、氯霉素乙酞转移酶和日一葡糖醛酸酶等〔’〕,是一个很好的补充。下面就GFP和luC的特性及其作为报告基因在基因转移中的应用分别进行综述。1绿色荧光蛋白 多管水母中的GFP是一条含有238个氨基酸残基的多肤链,具有较强的荧光性,而且在许多测定条件下都很稳定。GFP在395nm和475nm处...  (本文共6页) 阅读全文>>

《新疆农垦科技》1997年04期
新疆农垦科技

基因转移新技术取得成功

我国首批15头转基因牛在新疆安然度过周岁生日,这标志着培育它们的一项基因转移新技术──“精子介导、人工授精”取得了成功。这是由新疆畜牧科学院和中国农业大学联合创造出来的。1995年,郭志勤等研究人员用经过特殊处理的...  (本文共1页) 阅读全文>>

《生物技术通报》1987年06期
生物技术通报

通过接种土壤杆菌将基因转移到树木中

在运用基因直接转移技术方面,近来虽然取得了相当大的进展,但目前土壤杆菌 (Agro一bacte八。间Ti质粒系统仍然是植物遗传工程中最有实效的方法。然而,用土壤杆菌将外来基因转移到植株中仍受这种生物体的寄主范围限制。到目前为止,还没有发现哪种松树易受土壤杆菌的感染。 R .Sederoff及其同事在为火炬松(Pl’朋:taeda)树苗接种时,发现能使松树产生冠瘦瘤的两种根癌土壤杆菌(A.细。ef呱叨:)的野生型菌种。来自这些冠痪瘤的愈伤组织合成同种特性的冠瘦碱,该碱是通过感染上这些菌株的向日葵产生的。这表明在松树组织中已有转移来的直接合成这些冠瘦碱的基因并表达出来。 作者的结论是:根癌土壤杆菌能使DNA转移到火炬松中...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国农村医学》1987年02期
中国农村医学

遗传工程简介

1973年,美国斯坦福大学以科恩为首的研究小组首次实现基因转移成功,宣告了遗传工程的诞生。遗传工程是遗传学和工程学的结合,即用类似工程设计的方法,从各种生物的生活细胞中取出有关的遗传物质(原生质体、染色体、基因)进行施工和加工,创造新物种和新品种的新兴科学技术。广义的遗传工程...  (本文共1页) 阅读全文>>

《国外医学(分子生物学分册)》1987年03期
国外医学(分子生物学分册)

哺乳动物细胞的基因转移

基因转移是借助于物理的、化学的或生物的手段将外源基因导入受体细胞并检查其在该细胞内表达情况的一种技术,是分子生物学手段和细胞生物学手段的结合。在生命科学发展到当今水平的时代里,基因转移是一项重要而应用广泛的技术。例如:在基础理论的研究中,为了阐明基因的结构、功能、调控及相互关系,需要将各种基因片段转移到受体细胞,以观察其表达情况;在遗传工程中,需要将各种外源基因...  (本文共5页) 阅读全文>>