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~(125)I-CEA人/鼠嵌合抗体rch24在裸鼠人结肠癌模型中的生物学分布

我们建立了人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,研究125I标记CEA人/鼠嵌合抗体rch24在裸鼠人结肠癌模型中生物学分布,以探讨其用于结肠癌放射免疫显像(radioimmuoimaging,RII)及作为导向治疗的可行性,为进一步的临床研究提供依据。1材料与方法1.1荷人结肠癌裸鼠模型的建立在无菌条件下,将传代于裸鼠皮下的人结肠癌瘤体(结肠癌瘤株CL鄄187由北京大学临床肿瘤学院中心实验室提供),剔除坏死组织、按体积1∶3稀释(1份组织加3份生理盐水)成癌细胞悬液,每只裸鼠左背部皮下接种0.2ml(BALB/C裸小鼠,鼠龄4~5周,雌雄兼用,体重20g左右。中国医学科学院动物中心提供)。10天后,肿瘤直径生长至0.8~1cm时用于实验。1.2125I鄄CEA人/鼠嵌合抗体rch24的标记CEA人/鼠嵌合抗体rch24由北京市塞科药业有限责任公司提供,由北京市肿瘤防治研究所核医学科标记(NBS法)。CEA人/鼠嵌合抗体rch24标记抗体...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》2019年06期
中国预防兽医学报

抗猫细小病毒嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)又名猫泛白细胞减少症病毒,最易感染断奶幼猫并造成幼猫的感染和高死亡率。犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)2型,能够引起6周龄~6月龄快速生长的幼犬发生高死亡率的犬细小病毒病,是引发犬科动物传染性腹泻的重要病原[1]。FPV与CPV同属细小病毒科,二者的流行特征、临床症状、抗原性高度相似,均为引发宠物疾病的重要病毒。目前主要通过弱毒疫苗免疫来防控细小病毒病,但由于母源抗体干扰,流行株变化和畜主缺乏免疫意识往往造成疾病的发生和流行。FPV与CPV的对症治疗依赖于抗血清,而市售抗细小病毒血清多为单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb)或马血清,虽有一定的疗效但不能连续使用,也易造成过敏反应。同时异种动物抗体Fc段在犬、猫体内不能有效激活补体和Fc受体相关的效应系统,其治疗效果明显低于来源于同种动物的血清抗体。本实验室前期制备了一株杂交瘤细...  (本文共5页) 阅读全文>>

《细胞与分子免疫学杂志》2003年03期
细胞与分子免疫学杂志

抗人肿瘤坏死因子α嵌合抗体的研制

肿瘤坏死因子 (TNF α)是一类炎性因子 ,它的异常表达与类风湿性关节炎 (RA)、败血症、克朗病 (Crohndisease)、后天获得性免疫缺失症 (AIDS)、多发性硬化症 (MS)、充血性心率衰竭症 (CHF)、再生障碍性贫血 (AA)及骨髓增生异常综合症(MDS)等疾病的发生和病程有着密切的关系。应用抗TNF α单克隆抗体 (mAb)中和TNF α的生物学活性 ,已成为治疗和改善这类疾病的主要策略之一[1] 。本研究旨在对具有中和活性的鼠源性mAb(Z12 ) [2 ] 进行人源化改造 ,将VL和VH基因插入含人IgG1恒定区序列的真核表达载体中并转染COS7细胞 ,对瞬时表达的转染细胞培养上清中的抗TNF α嵌合抗体进行鉴定 ,以为研制临床可应用的抗TNF α嵌合抗体奠定基础。1 材料和方法1.1 材料 分泌抗TNF αmAb的小鼠杂交瘤细胞系Z12、rhTNF α、COS7细胞系及L92 9细胞系均为本室保存。嵌...  (本文共3页) 阅读全文>>

《细胞与分子免疫学杂志》1991年04期
细胞与分子免疫学杂志

抗癌胚抗原鼠/人嵌合抗体的体内及体外活性

由于鼠源性MoAb在人体长期反复应用可产生人抗小鼠抗体(HAMA),近年来人们采用构建鼠/人嵌合抗体以降低鼠McAb的免疫原性。本文作者用基因工程方法构建了抗癌胚抗原(CEA)鼠/人嵌合抗体基因,并在小鼠骨髓瘤细胞中表达出嵌合抗体。活性检测结果表明:所制备的嵌合抗体既保持了亲代鼠McAb的特异性亲和力,又具有更强的体内及体外生物学活性。 本研究的起始材料是抗CEA McAb杂交瘤细胞株(2、7、IG、10)。首先提取基因组DNA、经Bam Hl酶切后用蔗糖密度梯度离心法分离含有功能性重排的VK和V:,基因片段,克隆入EMBL一3载体以构建2、7、IG、10基因组文库。分别用轻、重链J区探针对基因组文库进行杂交筛选,分离出vK、V:基因。用限制性酶切图谱分析及DNA序列测定结果表明,所克隆的VK、V:基因结构是完整的,包含信号肤、框架、CDR。及J区,其中VK基因来源于JK,片段重排,VH基因来源于JH3片段重排。将2、7、iG、...  (本文共1页) 阅读全文>>

《生物工程学报》1988年01期
生物工程学报

重组DNA技术在单抗及其他新型嵌合抗体分子研究中的应用前景

70年代中期杂交瘤技术问世是生物医学界一个革命性创举。单克隆抗体(单抗,下同)作为一种生物探针,可用于分析、鉴定细胞表面各种分子,并将广泛用于疾病的诊断与治疗中。尤其是人单抗,在疾病的诊治中可能更具有实用价值。然而,应用杂交瘤技术制备人单抗技术上难点较多。如目前尚未获得理想的亲代细胞株,融合率低,抗体产生量少,稳定性、特异性均较差等。故近年来,人们探索用基因工程技术制备单抗及其他新型嵌合抗休分子。 (一)应用盆组ONA技术制备人单抗 1953年宾州大学医学院的Jonak和Kenett曾在费城举行的杂交瘤年会上报告了应用转染技术使分泌特异抗体的B细胞永存化的新方法。他们用磷酸钙沉淀法将人白血病REH细胞系染色体DNA掺入经相同抗原致敏的小鼠脾细胞,获得分泌IgG及坛M型抗体的细胞株。这些细胞株在体外培养可稳定地分泌抗体。但由于转染效率不肯;’,转染后所获细胞株在体外生长缓慢,产生抗体量有限,因此转染法并未显示出超越杂交瘤技术的优越...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生物技术通报》1988年08期
生物技术通报

基因工程

882839嵌合抗体〔专,英]/Winter,G.P./UK Patent Appl.GB 21a863s.Pub.07.10.87.Appl.GB 8607679,filed 27.03.87[译自CBA,2988,(1),46〕 应用重组技术,用一种免疫球蛋白可变区的互补性决定区域取代另一种专一性不同的免疫球蛋白的对应区域,由此获得改造的抗体。采用寡聚核普酸的定点诱变,可获得生产_h述抗体所需的基因编码序列。(王璋瑜)882840一种HTLV一川gag/env基因蛋白的表达与纯化〔专,英〕/Crowl,R.M.‘…/UKPatent Appl.GB 2188639.Pub。07.10.87.ApPI.US 848671,filed 04.04.86〔译自CBA,2955,(i),47〕 描述了应用重组技术生产一种新的HT-LV一Hl gag/env蛋白的过程。该蛋白同时具有上述病毒的核心蛋白和外壳蛋白的抗原决定簇,可用于诊断...  (本文共9页) 阅读全文>>