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腺病毒介导的hVEGF_(165)基因转移促进小鼠骨髓移植后造血重建

本研究探讨内皮细胞生长因子对骨髓移植小鼠造血重建的影响。重组腺病毒AdEGFP/hVEGF165经尾静脉注射给同基因骨髓移植BALB/c小鼠;在移植后10、20和30天时检测hVEGF165在小鼠体内的表达,同时测定外周血白细胞、血小板、红细胞计数和骨髓单个核细胞数  (本文共4页) 阅读全文>>

《浙江创伤外科》2012年05期
浙江创伤外科

腺病毒介导hVEGF编码基因转染骨髓基质干细胞的实验研究

目的应用携带hVEGF基因的重组腺病毒载体转染大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),观察hVEGF的表达情况。方法体外培养大鼠骨髓基质干细胞,含hVEGF基因的重组腺病毒转染骨髓基质干细胞,转染后在荧光...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国组织工程研究与临床康复》2009年49期
中国组织工程研究与临床康复

骨髓间充质干细胞表达的hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白的提纯及功能鉴定

目的:用hVEGF121/EGFP真核质粒转染骨髓间充质干细胞,提纯其表达的hVEGF121/EGFP融合蛋白,并体外检测其功能。方法:用课题组前期工作构建的pEGFP-N2-hVEGF121重组质粒提取质粒DNA。通过阳离子脂质体介导pEGFP-N2-hVEGF121重组质粒DNA转染体外培养的骨髓间充质干细胞,使用荧光显微镜检测hVEGF121/EGFP融合蛋白表达。用Amicon超...  (本文共4页) 阅读全文>>

《浙江临床医学》2008年01期
浙江临床医学

hVEGF_(165)在兔骨髓间充质干细胞中的表达

目的培养和鉴定兔骨髓间充质干细胞,基因转染后观察hVEGF165在其中的表达。方法体外培养兔骨髓间充质干细胞,以流式细胞仪检测其表面抗原(CD29、CD44、CD45、HLA-DR)的表达。通过腺病毒载体转染hVEGF16...  (本文共2页) 阅读全文>>

第二军医大学
第二军医大学

hVEGF_(165)与嵌合水蛭肽融合基因构建、表达和活性的研究

目的:构建具有促进内皮修复和抗栓双重活性的融合基因,检测该融合基因在体内外的活性,为再狭窄的多基因治疗提供新的思路和试验依据。方法:通过基因重组构建hVEGF_(165)与嵌合水蛭肽(Fused hirudin,FH)融合基因的真核表达载体(hVEGF_(165)-FH/pcDNA3.0),转染内皮细胞株,检测其表达产物促进内皮细胞增殖及抗栓的活性;局部转染hVEGF_(165)-FH/pcDNA3.0,观察其是否具有抑制兔颈总动脉血管成形术后再狭窄的作用。结果:hVEGF_(165)-FH表达产物具有促进内皮细胞增殖及抗栓活性,减轻兔颈总动脉血管成形术后再狭窄。结论:融合基因hVEGF_(165)-FH具有促进内皮修复和抗栓功能,从而有效地预防再狭窄。以内皮修复为基础,构建双靶点或多靶点的融合基因可能是再狭窄防治的一个重要策略。  (本文共123页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国组织工程研究与临床康复》2008年21期
中国组织工程研究与临床康复

表达hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白骨髓间充质干细胞的制备及缺氧干预

目的:构建携带增强型绿色荧光蛋白报告基因的人血管内皮细胞生长因子121的真核质粒,检测所制备的表达hVEGF121/EGFP融合蛋白的骨髓间充质干细胞在不同时长缺氧后血管内皮细胞生长因子的水平。方法:设计携带酶切位点的扩增引物,通过PCR技术扩增人血管内皮细胞生长因子121编码基因全序列,以粘端连接克隆法将其编码片段定向连接入质粒载体pEGFP-N2的多克隆位点中,构建pEGFP-N2-hVEGF121重组质粒,采用酶切法、PCR以及DNA序列测定法鉴定所构建的重组质粒。全骨髓差速贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,体外扩增传代,通过形态学观察及表面标记物进行细胞鉴定。通过阳离子脂质体介导pEGFP-N2-hVEGF121重组质粒转染体外培养的骨髓间充质干细胞,使用荧光显微镜检测hVEGF121/EG...  (本文共6页) 阅读全文>>