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水稻组蛋白H_3基因的分离和组织结构分析

随着近年来植物分子生物学和植物基因工程研究的迅速兴起,水稻基因结构与功能的研究也开始得到重视。自1982年以来,几个水稻品系的基因文库已相继建立(陶金洲等,待发表)ts.们,并已分别从水稻核、线粒体和叶绿体基因组中分离和分析了十几个基因[,,,o声,一,o,,‘]。 组蛋白是一类普遍存在于真核生物细胞核内的碱性蛋白质,具有相当高的结构保守性,它们与核DNA结合组成染色质的基本单位—核小体。在动物中,对组蛋白基因的组织结构、表达调控和进化机制的研究已相当深人t11,13洲,尤其是酵母I川、海胆田、果蝇【川、两栖类沙洲、鸟类‘7]和哺乳动物圈等材料。组蛋白基因属于中度重复顺序(每个单倍体基因组有10一1.00。拷贝),其核昔酸顺序有较高的保守性,特别是H,和H.基因。但是,对于不同的生物,在基因的拷贝数、组构特点和表达调控等方面,均存在着很大的差别,甚至在同一个基因组内,组蛋白基因的变异也是广泛存在的rs,”刀声.3,l。一般地,在...  (本文共10页) 阅读全文>>

《微生物学免疫学译刊》1985年02期
微生物学免疫学译刊

基因克隆

;::≯i兜j}包括如下一些蕾水暑!ii:: 载体的制备: 歌兜隧ljN。、片段的分离; 欲兜降I)\\片艘的川收; 欲兜隆D\+\片段连到载体D\!、上; 带有外泓j’\j、片段的绒体导入活菌体J 克隆后的检测。 载体M13DNA的制备 M,。单链噬菌体是1980年以后引进的克隆系统。这个系统的优点是,使人们可以不经过通常的十分耗时的分离纯化于段就可帙速地、大量地j芙得十分纯的各种被测外源DNA的"段。在酶学池D\A序列分析时,更有其独到之处。溶液: 裂解i戎:25mM Tr i s—HCL pH8.0 10n1、{l:D‘r一、 pH 8.0 jonllI葡茴锇 溶菌酶2mg/m I(新配制) 或者O.05、I T r i s一}{CL pI.I 8.O 25%蔗糖 溶慧酶20 c!g/111 l(新配制) 碱性Sl_、S液: 1 96(Ⅵ’/。V)S DS O.2M N a0H 3、Il浩酸钠;。≮ 11¨4..j 0.1...  (本文共8页) 阅读全文>>

《生物技术》2017年04期
生物技术

莲藕Na~+/H~+逆向转运蛋白基因-LrNHX的克隆及表达分析

莲藕属于睡莲科莲属多年生水生草本植物,在我国长江中下游以南地区广泛栽培,是一种特色的水生蔬菜,同时也是重要的水旱轮作作物[1-2]。近年来,我国东南沿海地区沿海滩涂面积逐渐扩大,设施土壤连作障碍(盐渍化程度)逐年加重,提高莲藕耐盐特性尤为必要,对充分利用滩涂盐碱土地、扩大莲藕栽培范围具有重要的意义[3]。目前,生产上栽培类型莲藕对盐敏感,低浓度的盐能够影响植株正常发育,而耐盐资源存在于野生种或花莲类型中,所以研究莲藕耐盐机理对培育莲藕耐盐生产用种非常重要。目前国内外莲藕耐盐相关研究较少,克隆耐盐基因鲜有报道。本研究首次通过从耐盐莲藕资源中分离到一个Lr NHX,在此基础上对其表达进行了分析,为进一步验证其功能,提高莲藕耐盐性奠定基础。Na+/H+反向转运蛋白位于细胞膜上,通过维持细胞内外渗透压,把Na+富集于液泡中(主要与液泡中H+移位酶、H+-ATPase和H+-PPiase相互作用,在细胞内产生电化学势,Na+通过主动运输方...  (本文共5页) 阅读全文>>

《蚕学通讯》1985年01期
蚕学通讯

蚕丝学与基因工程

复制 前言 自华特生和克里格氏提倡DNA双螺旋模型以来,分子生物学的进展显著,操纵遗传信息(情报)之源的DNA的解析技术也有显著进步,普通称为基因工程的技术,现在已发展到实用阶段。将此技术应用于蚕丝学领域的方法有种种想法,但这里仅就基因工程究竟系什么样的技术,在蚕丝学领域进行什么样的研究,将来怎么样等,谈谈笔者的浅见。 所谓基因工程 生物的各种形质,例如人的皮肤、毛发色,蚕的幼虫体色、卵色、卵形、茧形等,由亲传子,是谁多熟知的现象。这些形质由基因支配,依各个体所具有的基因型而决定表现型,从亲传到子的方法,服从于孟德尔遗传法则。例如,幼虫皮肤成透明的og油蚕基因,因系隐性遗传,故基因型og/og场合,观察到油蚕,但在+/og场合,表现型成正常,与+/+个体不能区别。在裸蛹场合,因系显性遗传,凡具有Nd/十、Nd/Nd基因型的都成裸蛹而不结茧,只有+/+能结正常茧。由此观之,生物具有的特征,基本上都由基因支配。因此,人之为人,蚕之为...  (本文共4页) 阅读全文>>

《安徽农学通报(上半月刊)》2012年01期
安徽农学通报(上半月刊)

基因克隆研究方法综述

基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称,是具有遗传效应的DNA分子片段。基因控制蛋白质合成,是不同物种以及同一物种的不同个体表现出不同的性状的根本原因,即所谓“种瓜得瓜,种豆得豆”,“一母生九子,九子各不同”。基因通过DNA复制及细胞分裂把遗传信息传递给下一代,并通过控制蛋白质的合成使遗传信息得到表达。基因克隆技术包括了一系列技术,它大约建立于20世纪70年代初期。美国斯坦福大学的伯格(P.Berg)等人于1972年把一种猿猴病毒的DNA与λ噬菌体DNA用同一种限制性内切酶切割后,再用DNA连接酶把这2种DNA分子连接起来,于是产生了一种新的重组DNA分子[1],从此产生了基因克隆技术。1973年,科恩(S.Co-hen)等人把一段外源DNA片段与质粒DNA连接起来,构成了一个重组质粒,并将该重组质粒转入大肠杆菌,第一次完整地建立起了基因克隆体系[2]。因克隆程序可概括为:分、切、连、转、选。“分”是指分离制...  (本文共3页) 阅读全文>>

《传染病信息》2002年01期
传染病信息

抑制性消减杂交技术与基因克隆化

近年来,随着分子生物学技术的迅猛发展及人类基因组计划的实施,当今分子生物学的研究热点已转向利用新技术研究生物学、医学乃至动植物领域中基因的功能及调控作用,如个体的生长、发育和死亡等许多问题的产生与细胞间基因表达的关系研究,尤其是分离和鉴定与危害人类健康疾病(如恶性肿瘤、心脑血管疾病及一些原因不明的慢性疾病等)的发生、发展密切相关的基因,分离、鉴定这些差异表达的基因,可为揭示生命活动的规律、探索疾病发生机制及寻找诊断及治疗的靶基因提供强有力的依据。抑制性消减杂交(suppression subtractivehybridization,SSH)是新近发展的能高效快速克隆差异表达基因的新技术之一。 1 SSH技术的工作原理 目前已有多种分离差异表达基因的方法,如DDR下PCR、。DNA-RDA(代表性差异显示分析)、消减。DNA文库、cDNA消减杂交技术、SAGE法等,但都不同程度地存在操作繁琐、费时费力、对低丰度mRNA富集效率低...  (本文共4页) 阅读全文>>