分享到:

水稻组蛋白H_3基因的分离和组织结构分析

随着近年来植物分子生物学和植物基因工程研究的迅速兴起,水稻基因结构与功能的研究也开始得到重视。自1982年以来,几个水稻品系的基因文库已相继建立(陶金洲等,待发表)ts.们,并已分别从水稻核、线粒体和叶绿体基因组中分离和分析了十几个基因[,,,o声,一,o,,‘]。 组蛋白是一类普遍存在于真核生物细胞核内的碱性蛋白质,具有相当高的结构保守性,它们与核DNA结合组成染色质的基本单位—核小体。在动物中,对组蛋白基因的组织结构、表达调控和进化机制的研究已相当深人t11,13洲,尤其是酵母I川、海胆田、果蝇【川、两栖类沙洲、鸟类‘7]和哺乳动物圈等材料。组蛋白基因属于中度重复顺序(每个单倍体基因组有10一1.00。拷贝),其核昔酸顺序有较高的保守性,特别是H,和H.基因。但是,对于不同的生物,在基因的拷贝数、组构特点和表达调控等方面,均存在着很大的差别,甚至在同一个基因组内,组蛋白基因的变异也是广泛存在的rs,”刀声.3,l。一般地,在...  (本文共10页) 阅读全文>>

《中国科学(B辑 化学 生物学 农学 医学 地学)》1987年02期
中国科学(B辑 化学 生物学 农学 医学 地学)

水稻组蛋白H3基因和1.5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因的克隆和结构分析

水稻是世界上最重要的粮食作物之一,特别在中国更是如此.过去25年来,水稻改良的主要工作是由植物育种学家和遗传学家来完成的,而利用分子生物学的技术在基因水平上对水稻进行的研究则还很少〔‘一‘,.因此,人们首先必须从水稻中分离出一些基因来,并研究其结构、调节和表达.本文报道了两个核基因的克隆和序列分析. 组蛋白基因在真核生物中是普遍存在的;它们的产物是几个小而高度保守的碱性蛋白质所组成的一个蛋白质家族,用以把DNA组建成一种基础结构单位,即核小体.核小体与其它核蛋白一起形成染色质结构.高等真核生物组蛋白基因的结构和组织一直是分子生物学研究的焦点.对于组蛋白基因家族的特征和特性研究的最为完善和最为广泛深入的要算是海胆、果蝇、酵母、鸡、老鼠和人类的了【卜川,但对于植物组蛋白的基因却还研究得很少;因此,这就成了人们对于组蛋白基因结构的全面认识中的一个缺陷.小麦组蛋白H3基因的DNA序列分析结第2期谢雍等:水稻核基因的克隆和结构分析果表明:...  (本文共13页) 阅读全文>>

《微生物学免疫学译刊》1985年02期
微生物学免疫学译刊

基因克隆

;::≯i兜j}包括如下一些蕾水暑!ii:: 载体的制备: 歌兜隧ljN。、片段的分离; 欲兜降I)\\片艘的川收; 欲兜隆D\+\片段连到载体D\!、上; 带有外泓j’\j、片段的绒体导入活菌体J 克隆后的检测。 载体M13DNA的制备 M,。单链噬菌体是1980年以后引进的克隆系统。这个系统的优点是,使人们可以不经过通常的十分耗时的分离纯化于段就可帙速地、大量地j芙得十分纯的各种被测外源DNA的"段。在酶学池D\A序列分析时,更有其独到之处。溶液: 裂解i戎:25mM Tr i s—HCL pH8.0 10n1、{l:D‘r一、 pH 8.0 jonllI葡茴锇 溶菌酶2mg/m I(新配制) 或者O.05、I T r i s一}{CL pI.I 8.O 25%蔗糖 溶慧酶20 c!g/111 l(新配制) 碱性Sl_、S液: 1 96(Ⅵ’/。V)S DS O.2M N a0H 3、Il浩酸钠;。≮ 11¨4..j 0.1...  (本文共8页) 阅读全文>>

《蚕学通讯》1985年01期
蚕学通讯

蚕丝学与基因工程

复制 前言 自华特生和克里格氏提倡DNA双螺旋模型以来,分子生物学的进展显著,操纵遗传信息(情报)之源的DNA的解析技术也有显著进步,普通称为基因工程的技术,现在已发展到实用阶段。将此技术应用于蚕丝学领域的方法有种种想法,但这里仅就基因工程究竟系什么样的技术,在蚕丝学领域进行什么样的研究,将来怎么样等,谈谈笔者的浅见。 所谓基因工程 生物的各种形质,例如人的皮肤、毛发色,蚕的幼虫体色、卵色、卵形、茧形等,由亲传子,是谁多熟知的现象。这些形质由基因支配,依各个体所具有的基因型而决定表现型,从亲传到子的方法,服从于孟德尔遗传法则。例如,幼虫皮肤成透明的og油蚕基因,因系隐性遗传,故基因型og/og场合,观察到油蚕,但在+/og场合,表现型成正常,与+/+个体不能区别。在裸蛹场合,因系显性遗传,凡具有Nd/十、Nd/Nd基因型的都成裸蛹而不结茧,只有+/+能结正常茧。由此观之,生物具有的特征,基本上都由基因支配。因此,人之为人,蚕之为...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生物化学杂志》1989年06期
生物化学杂志

人尿激酶基因克隆的分离

我们利用噬菌斑原位杂交的方法,从人的基因文库中钓出人尿激酶基因克隆,这对分析尿激酶的墓因结构、研究其表达调控都是很有意义的。·现将初步结果简报如下: 本研究所用基因文库(吴是教授惠赠)【”系将人胎儿食管粘膜总DNA的随机片段,经BamH工位点插入取代型噬菌体载体EMBL3,经包装、转染Ecol‘K802株而成,滴度为1 .6 x 107Pfu/mL。从4℃保存的文库中取8“L噬菌体储液与o.3mL接种菌(Eeoli,KsoZ)混合,37℃孵育20分钟,加6 .sml熔化的顶层琼脂(0.7%,50℃),混匀倾注在内径140mm的底层琼脂平板上。37℃孵育至噬菌斑直径达1 .smm,彼此刚开始接触但未显示融合裂解为止(约10一12小时)。转移至4℃,至少放置1小时,使顶层琼脂变硬。每板约形成5 x10召个噬菌斑,然后转移至硝酸纤维素膜上,变性、中和、干燥后[21,与自重组质粒,PHUK招切下的经“ZP标记的人尿激酶墓因cDNA(HU...  (本文共3页) 阅读全文>>

《发酵科技通讯》1989年02期
发酵科技通讯

谷氨酸细菌的基因克隆:系统及其应用

在用棒状细菌成功地进行谷氨酸发酵后,采用棒状细菌的突变株发展了其它氨基,酸发酵。通过序贯突变构建了有效的产生菌,导致氨基酸生物合成途径中反馈调节的解除及阻断碳流入竞争性或降解性途径。这些菌株现在用于工业生产各种氨基酸。为了满足对氨基酸的不断需要,必须进一步通过突变和选育来提高产量。 除了诱变和选育外,重组DNA技术为改进氨基酸产量提供了一种新的有效手段,因为编码限速酶的基因扩增可以排除生物合成途径中的“瓶颈”(bottlenec如),从而使产量增加。这种新的方法已在谷氨酸细菌中应用。本文报导谷氨酸细菌的基因克隆系统发展的最新研究及氨基酸过量产生菌株的构建和谷氨酸棒杆菌基因结构分析中的应用。 1.谷氮酸棒杆菌的宿主一载体系统的发展 一种合适载体的有效性和DNA引入细胞内的方法是任何克隆系统所必需的。需要细菌噬菌体和质粒作为检测这两种要求的材料或工具。我们分离了4种免疫特异性不同的温和噬菌体:币CGI、小CGZ、小CG4和小CGS。...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生理科学进展》1985年02期
生理科学进展

人凝血因子Ⅷ基因克隆可在哺乳动物细胞株中表达

最近,美国的Genenteeh与Geneties Institute的二组科学家同时成功地克隆了凝血因子Vlll:C的DNA,并使共在哺乳类细胞株中表达产生有活性的因子Vlll:C。他们根据已纯化的来源于猪或人因子v川:C的一小片段氨基酸序列,合成出寡核普酸探针,用此探针从基因库中找出了因子vlll的墓因,井已弄i青楚这段基因总民为186000 bp,共有长度为69~3106 bp不等的26个外显子,整个基因约占x染色体的0.1%。他们分别利用人的T细胞杂交瘤株或人肝获得了cDNA克隆,并根据。DNA的序列分析推断出成熟蛋自的2332个氨基酸序列。结果显示,多肤链中有与凝血因子v结构同源的区域以及与血浆铜兰蛋白结构同源的区域。他们将克隆的cDNA与病毒促进子重组后...  (本文共1页) 阅读全文>>