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酵母SUC2基因上游顺序对其表达的影响

酵母可以产生两种形式的蔗糖酶:一种是分泌型的糖基化蔗糖酶,它的表达受葡萄糖浓度的调节,在葡萄糖去阻遏条件下酶活性可提高100一1000倍。另一种是胞内型非糖基化蔗糖酶,其表达不受葡萄糖浓度的调节。1982年Carlsont3]等人用互补法首先克隆了酵母sUCZ基因,用Northern杂交和核酸酶sl定位技术,证明sUCZ可以转录出1.,kb和1.skb两种mRNA。它们具有相同的3,末端,而夕末端不同。他们推测这两种mRNA分别编码糖基化蔗糖酶和非糖基化蔗糖酶。1983年Toussig山,等人分析了SucZ基因的核昔酸顺序,从顺序分析资料可以看出,两种酶使用了共同的阅读框架,它们所用的起始密码不同。糖基化蔗搪酶的编码区还包括一段57个核昔酸长的信号顺序,它编码19个氨基酸长的信号肤,这是决定这种酶具有分泌性的特殊结构。 糖基化蔗糖酶的表达可以受葡萄糖浓度的调节。一般认为分解代谢物的阻遏作用是转录水平上的一种调节作用。那么,在SU...  (本文共10页) 阅读全文>>

《中国甜菜》1988年04期
中国甜菜

糖甜菜成熟块根中碱性蔗糖酶的产生与性质

在来成熟的甜菜块根中,测定碱性蔗搪酶的活住足很难的,但在块根开始发育及蔗糖合成的同时,蔗糖酶出现。此后,随着蔗糟积累而平行增长。与之相反,酸性蔗糖酶在来成熟块根中的活性则很高,但在蔗糖贮藏之前迅速下降,在成熟块根中民难测得。 碱性蔗糖酶部分是从成熟决根中提纯的,其程序包括;硫酸镣分馏、二乙氨乙基纤维素往层析.珠状脂酞基凝胶过滤和ECTEO卜A纤维素往层析。碱性蔗糖酶经二乙氨乙基纤维素柱层析分离山两种形式(包活酶1和酶1)。经灼珠状脂酞基...  (本文共1页) 阅读全文>>

合肥工业大学
合肥工业大学

右旋糖酐蔗糖酶的分子改造及其热稳定性研究

来源于肠膜状明串珠菌0326的右旋糖酐蔗糖酶(DSR,EC2.4.5.1)是一类葡聚糖蔗糖酶,能够以蔗糖为底物催化产生右旋糖酐(Dextran),广泛应用于食品和医药行业。然而该酶在高温下的动力学稳定性较差,限制了其工业应用的发展。本研究通过定点突变及引入二硫键的方法提高该酶的热稳定性。本文以实验室克隆保存的Leuconostoc mesenteroides 0326的右旋糖酐蔗糖酶基因dex-YG为基础。通过同源建模建立右旋糖酐蔗糖酶的3D模型结构,并在此基础上进行半理性设计,选取突变位点。以丝氨酸代替473、678和856位的脯氨酸,以苏氨酸代替378、725和955位点的赖氨酸,共构建单点、双点、三点突变体共14个。并从中筛选出P473S/P856S为酶活性最高的突变体进行酶学性质及热稳定性的研究。P473S/P856S酶活性与野生型相比提高了2.86倍;其热失活率提高显著,在35℃下半衰期提高了7.4倍;催化效率比野生型...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

江南大学
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Cellulomonas carboniz T26淀粉蔗糖酶的性质鉴定与应用

淀粉蔗糖酶(amylosucrase)是属于糖苷水解酶(glycoside hydrolase,GH)13家族的葡糖基转移酶(glucosyltransferase,EC 2.4.1.4)。可以以蔗糖为唯一底物,通过生物催化,将蔗糖转化为一种以α-(1,4)糖苷键连接的葡聚糖。淀粉蔗糖酶可以进行水解反应、转糖苷反应和聚合反应,因此淀粉蔗糖酶在碳水化合物转化领域应用广泛。转糖苷反应是淀粉蔗糖酶非常优异的性质,可以将供体葡萄糖基转移到受体单元上(如水杨苷、儿茶素、对苯二酚等),使受体获得稳定性、水溶性等优异的特性。首先,本课题利用基因工程手段获取革兰氏阳性菌Cellulomonas carboniz T26中淀粉蔗糖酶的基因片段,将其连接到pET-22b(+)载体上,构建重组pET-CC-AS质粒。接着,将构建的重组质粒转化至感受态细胞中,经过扩大培养、IPTG蛋白诱导、镍离子亲和层析柱纯化、透析获得重组酶CC-AS。使用SDS-P...  (本文共57页) 本文目录 | 阅读全文>>

江南大学
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Leuconostoc citreum SK 24.002产交替糖蔗糖酶的研究

交替糖(alternan)是一种功能性胞外多糖,它具有特殊的化学结构,即含有交替的-1,3糖苷键和-1,6糖苷键,因而具有一些独特的功能特性,如热值低、粘度低、抗微生物降解、抗酶解、耐酸、耐热等。交替糖蔗糖酶(alternansucrase)是一种新型的葡聚糖蔗糖酶,可以以蔗糖为底物合成交替糖,若反应体系中存在一些小分子糖类,如麦芽糖、异麦芽糖、龙胆二糖等,该酶还可以催化受体反应,即以小分子糖类为受体,蔗糖为供体,通过葡糖基转移作用生成低聚糖。这些低聚糖具有较好的益生作用,能够有效的改善人体的肠道健康;同时,利用交替糖蔗糖酶还可以对淀粉进行改性作用,有效的改善淀粉的理化特性。目前国外关于交替糖蔗糖酶的研究较多,但国内对其研究还较少。本课题利用嗜柠檬酸明串珠菌Leuconostoc citreum SK24.002产交替糖蔗糖酶,并对该酶的纯化、酶学性质及在受体反应和对淀粉的改性方面的应用进行了研究。首先,本课题研究了嗜柠檬酸明串...  (本文共53页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
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芽孢杆菌左聚糖蔗糖酶基因克隆、表达及分子改造

果聚糖(Fructan)包含低聚果糖、高聚果糖,是一类主要以果糖残基为单体聚合而成的多糖,分子量范围分布较广。高聚果糖通常分为两大类,一类主要由β-(2,1)糖苷键连接而成,归类为菊糖(Inulin);另一类通常是以β-(2,6)糖苷键连接而成,归类为左聚糖或细菌型果聚糖(Levan)。果聚糖已经被证实具有多种生物学活性,在抗肿瘤,抗病毒,增强身体免疫等方面都有一定的效果。果聚糖还具有增强免疫应激,改善肠道失衡的功能,并且是一种很重要的食品添加剂,可以用于益生元、膳食纤维、低热食品、减肥产品、降脂产品生产,还可以作为乳化剂、保湿剂、凝胶剂等等使用。左聚糖在保湿性能上和目前化妆品行业需求大价格高昂的透明质酸具有同等效果,在化妆品行业的应用有极大潜力。地处亚热带的广西目前已经是全国最大的蔗糖生产基地,产量占全国蔗糖产量的60%以上。但是广西的蔗糖产业一直存在产品线比较单一,缺少高附加值产品的缺陷。利用蔗糖为原料开发高附加值产品符合地...  (本文共145页) 本文目录 | 阅读全文>>