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制备脱细胞真皮基质的实验研究

目的 采用高渗盐 -胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质(Acellulardermalmatrix,ADM)并进行组织学观察和微生物学检测,探讨这种方法的可行性和机制。方法 SD大鼠4只,分别麻醉后以 8%硫化钠溶液脱去躯干部皮毛,常规消毒铺巾,切取大鼠背部全层皮肤制成厚约 0 4mm的中厚皮, 1mol/LNaCl溶液 37℃浸泡 48h分离表真皮,以 0 25%胰蛋白酶+0 1%乙二酸二乙胺 (EDTA)溶液 37℃分别热消化 60、70、80、90min脱去细胞成分,并进行冷  (本文共3页) 阅读全文>>

天津医科大学
天津医科大学

异种脱细胞基质支架制备及其移植修补膀胱的实验研究

组织工程和再生医学是人类治疗组织、器官功能衰退和缺失的两项最新技术。这两项技术的基础之一是需要适宜的细胞支架。许多研究表明,最佳的支架是该组织的天然细胞外基质(ECM)。同种异体的同一组织之间ECM的构成和成分是相同的;某些不同种群之间,例如:猪与人类许多组织、器官的ECM成分和结构是相近的。因此,制备源于猪的天然ECM作为支架进行异体移植替代修复人类组织、器官缺损是细胞生物基质研究的重要方向。本项课题以猪的组织为原料研究了两种脱细胞基质的制备及制作支架的方法,一种是真皮脱细胞基质(DAM)支架,另一种是膀胱脱细胞基质(BAM)支架。DAM支架使用了胰蛋白酶或Dispase溶液处理后,十二烷基磺酸钠(SDS)或曲拉通-100(Triton X-100)溶液洗涤后进行制作。BAM支架是在常用的Meezan方法基础上进行了改进,加入了RNAse配合DNAse溶解洗脱细胞。经过病理切片HE染色,光镜观察及其它检验证实这两种脱细胞基质支...  (本文共90页) 本文目录 | 阅读全文>>

安徽医科大学
安徽医科大学

自体微粒皮与异体脱细胞真皮基质复合移植的实验研究

目的:采用高渗盐-胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质并进行组织学观察和微生物学检测,探讨这种方法的可行性和机理。材料与方法:SD大鼠4只:麻醉后常规消毒铺巾,以8%硫化钡溶液脱去躯干部皮毛,切取大鼠躯干全层皮肤制成厚约0.4mm的中厚皮,1MNaCl溶液37℃浸泡48h分离表真皮,以0.25%胰蛋白酶+0.1%EDTA溶液37℃分别热消化50、60、70、80、90分钟脱去细胞成分,并进行冷冻干燥处理。脱细胞真皮基质作光镜、电镜观察和微生物学检测并对不同时间热消化处理的脱细胞真皮基质进行比较分析。结果:消化时间不同的脱细胞真皮基质均具有柔软、一定的柔韧性和伸展性、弹性好、弯曲不断裂的特点,组织学观察见表皮细胞均完全去除,但是消化90分钟,ADM的基底膜(Basement membrane complex,BMC)和胶原纤维的结构与排列有不同程度的破坏;消化50、60、70分钟的ADM虽然基底膜和胶原纤维的结构与排列正常存在,但脱细胞不...  (本文共76页) 本文目录 | 阅读全文>>

南昌大学
南昌大学

异种脱细胞真皮基质修复结膜缺损的实验研究

目的观察异种(鼠)脱细胞真皮基质作为移植材料修复兔结膜缺损的效果,探讨异种脱细胞真皮基质应用于结膜缺损修复的可行性。方法60只健康新西兰大白兔随机分为实验组(n=30)和对照组(n=30)。制备结膜缺损模型,游离去除实验兔术眼眼球上方的部分球结膜、筋膜,面积约10mm×8mm。实验组和对照组分别移植异种(鼠)脱细胞真皮基质植片和同种异体巩膜植片。术后大体观察植片变化及结膜修复情况;于术后1周、2周、4周、8周、12周采集实验兔耳动脉血,离心后行酶联免疫吸附法检测血清白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10)浓度,同时取移植区组织行HE染色光镜下观察植片组织学变化。结果实验组和对照组植片均存活,植片表面结膜上皮生长,实验组和对照组结膜缺损修复时间分别为16.330.77天、15.780.88天,两组时间差异无统计学意义(P=0.056),术后无睑球粘连、无结膜囊狭窄。组织学检查显示实验组术后2周植片细胞浸润较明显,同时新生...  (本文共47页) 本文目录 | 阅读全文>>

《北方药学》2016年01期
北方药学

一种脱细胞真皮基质(ADM)制备方法的实验研究

目的:优化实验条件,建立提取脱细胞真皮基质的可靠方法。方法:选择20例包皮环切术后切除包皮为研究材料,用胰蛋白酶的消化方式、高渗盐水分离皮肤表皮,用去垢剂法和胰蛋白酶去除真皮细胞成分,用组织病理学,抗...  (本文共2页) 阅读全文>>

南京医科大学
南京医科大学

两种真皮胶原支架复合SVF修复创面的实验研究

目的通过改进物理化学方法制备两种真皮胶原支架,一种为疏松多孔的胶原海绵状,一种为微粒状,在体外将其与脂肪基质血管成分(stromal vascular fraction,SVF)复合,观察两种真皮胶原基质复合SVF在创面修复中的作用。方法1.反复冻融结合氢氧化钠热碱液处理得到海绵状真皮胶原支架(New collagen sponge scaffold,NCSS),通过冷冻干燥研磨法过滤后得到真皮胶原微粒(Micronized Acellular Dermal Matrix,MADM),通过HE染色、扫描电镜(Scanning electron microscopy,SEM)将两种真皮胶原支架胶原空间结构、孔腔大小,孔隙率、体外降解时间及细胞毒性进行检测。2.取成人脂肪组织,通过酶消化法获取脂肪基质血管成分。3.SVF复合两种真皮胶原支架,观察其细胞相容性及渗透性;制备裸鼠背部直径15mm全层皮肤缺损模型,分组情况:NCSS+SV...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>