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保存兔角膜内皮细胞形态学的研究

为进一步探讨利用干燥、脱水后在4℃冰箱中长期保存角膜移植材料行穿透角膜移植的应用价值,我们除利用这种保存角膜进行部分穿透角膜移植的动物实验外川,还对保存兔角膜的内皮细胞在移植前后进行了超微结构的观察。 材料和方法 为了解保存角膜内皮细胞在移植前后超微结构的特征,我们对保存1~3周或6个月的兔角膜进行检查,同时取正常新鲜角膜作对照,并对2只兔术后植片内皮细胞的超微结构进行了观察。在作电镜检查之前,将保存不同时间的角膜首先复水,使其恢复到正常新鲜角膜的透明度,同新鲜角膜和术后植片一样切成lxZmm小块,放入戌二醛及四氧化饿液中固定。经乙醇、丙酮脱水,用环氧树脂618#包埋,LKB超薄切片,再经醋酸双氧铀及构椽酸铅染色,用JEM2000EXTEM观察。另一部分标本,按上法固定、脱水、乙腊置换,真空干燥。经离子镀膜后,用5520型SEM观察。结果 扫描电镜检查(SEM)正常新鲜角膜内皮细胞,六角形边界清晰,呈镶嵌型排列,细胞间连接紧密(...  (本文共6页) 阅读全文>>

《北京农业大学学报》1987年02期
北京农业大学学报

家兔角膜表面结构研究 表皮火山口样结构的扫描及透射电镜观察

材料和方法 实验动物为十五只健康成年家兔,休艰为2.0、2.5公斤。麻醉下直接摘出眼球,生理盐水轻轻漂洗后,浸泡2 .5肠戊二醛,切下角膜.!:心部分分成两份。分别进行SEM和TEM制样。 一份经2.5帕戊二醛固定后用l%饿酸后固定,丙酮梯度脱水,醋酸异戊角过渡后临界点干燥,最后用离子镀膜仪喷金。 另一份经2.5肠戊二醛固定,1肠锹酸后固定,丙酮梯度脱水,用Epon 812包埋。经LKB一V超薄切片机作超薄切片,构橡酸铅、酷酸铀染色。 最后分别用JEM一xooex透射电镜sokV作TEM观察,J目JEM一looex透射电镜ASID扫描附件4okV和S一450扫描电镜25kV迸行SEM观察。结果 扫描电镜所见:角膜表面存在有浓密的、众多的、大小均一的微绒毛。微绒毛夹杂有丘陵形的微皱续。另外扫描电镜下可见到有散在的炸面包圈样表皮小孔。这种结构大致呈园形或椭园形,中心部凹陷(图l)。但一般与周围微绒毛处于同一平面。边缘稍隆起为微皱装,...  (本文共4页) 阅读全文>>

《青岛医学院学报》1988年02期
青岛医学院学报

深低温长期保存兔角膜穿通性移植的动物实验

自1986年3月,我们利用自行研制的简易深低温角膜降温仪对兔角膜进行了深低温保存技术的研究,对国外沿用的Cape lla法〔‘〕进行简化和改进,优选出6种深低温保存角膜方法。为了将实验研究成果应用于临床,我们将深低温保存8~78天的兔角膜对47只兔眼做了穿通性角膜移植动物实验,现报告如下。材料和方法 一、角膜材杆来源和制作 将2~3 kg健康杂种家兔处死后3h内无菌操作摘除眼球,湿房保存4h内在无菌条件下从眼球上取下带有2~3 mm巩膜环的角膜片。 二、角膜容器 用高压消毒的6 ml中性硅玻璃瓶(可用青、链霉素空瓶),内装2.5ml冷冻保护液,放2~4℃冰箱内预冷备用。 三、角膜深低温保存方法 (一)冷冻保护液配方和冷平衡方法 1。甘油法将角膜放入内装15%甘油复合剂2.5ml的角膜容器内,在2~4℃冰箱中冷平衡10min。甘油复合剂为15% (V/V)甘油与85%(V/V)1.3%葡萄糖、2.9%拘椽酸钠及0.1%红霉素的混合...  (本文共4页) 阅读全文>>

《广州中医学院学报》1989年03期
广州中医学院学报

复方熊胆眼药水对实验性兔角膜白斑的疗效观察

随着社会环境的改变,各种因素造成的角膜镶痕已成为我国主要的致盲眼病之一。积极采用现代科学的手段,发挥中医优势是当代中医研究的主要方向,本课题根据祖国医学对角膜疲痕的认识,以及历代中医应用中药熊胆治疗角膜翁的理论和方法,配制了复方熊胆眼药水,用于实验和临床。 材料和方法 一、模型的建立 实验兔为灰色家兔,雌雄,不_择,体重15。。一2。。。克。将每只实验兔右眼以l呱地卡因充分麻碎角膜,然后以lmofjL(IN)氢氧化钠棉纤头水平置于角膜中央轻压40秒,立即可见兔角膜上呈现一紧密的圆形灰白色混蚀灶,范围在10毫米左右。一月后角膜烧灼面呈光滑白磁样变,大量新生血管形成。二月时,白斑基本稳定。取两只兔角膜作病理切片。二、实验设想 无效”否定 l号方:维生素BZ+冰片 以上三方均配成pHS .5,等渗眼药水。 四、实验方法 将24只实验兔经简单随机法分为I号、I号、l号及空白组,每组6只兔,分别演眼药水每日三次,每次一滴,疗程一个半月。实...  (本文共4页) 阅读全文>>

《大连医科大学学报》2009年02期
大连医科大学学报

国产吲哚青绿前囊膜染色对兔角膜内皮活性的影响

目前,临床上仍可见到大量成熟或过熟期的白内障。这类患眼由于晶状体呈白色混浊,手术中缺乏视网膜红光反射,无法清晰后映手术野,手术难度亦随之增加,为确保撕囊过程的顺利进行,很多学者认为晶状体前囊膜染色剂“检测撕囊边缘”是能够提高撕囊成功率的方法,它能够帮助术者增强组织层次的分辨能力及增强手术的可操作性以最大限度减少并发症。吲哚青绿(indocyanine green,ICG)作为一种无毒性染色剂在眼科的应用已经有很长的历史。1978年McEnerney等[1]已经证实吲哚青绿选择性地染色死亡的角膜内皮细胞,活性细胞的致密细胞膜阻止吲哚青绿进入细胞,不影响正常角膜透明度。因此,吲哚青绿前囊膜染色已经成为白色白内障手术常规用药,而且已经国产化。目前尚未发现有针对国产吲哚青绿前囊膜染色剂在不同浓度与不同时间条件下对兔角膜内皮活性影响的评价。本研究旨在为临床提供指导意义。1材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物及分组:健康科研兔18只(...  (本文共6页) 阅读全文>>

《眼科》2000年05期
眼科

羊膜对兔角膜上皮细胞影响的实验研究

眼部的化学烧伤、热烧伤、手术创伤以及病毒、细菌感染和药物毒性等各种原因导致的眼前节病变 ,可致角膜上皮反复剥脱 ,角膜结膜上皮化、新生血管形成及角膜混浊等 ,甚至可发生角膜基质浸润溶解 ,角膜穿孔 ,目前角膜移植术后免疫排斥反应的发生率已高达 6 0 %~ 70 % ,常导致手术失败[1 ] 。羊膜移植用于眼表面重建 ,已取得了令人瞩目的成绩[2 - 3] 。本文试图观察兔角膜上皮细胞在羊膜面培养的结果 ,初步探讨羊膜移植治疗眼表面疾患的机理 ,为临床应用羊膜提供依据。1 材料和方法1 1 动物和材料1 1 1 实验动物  2只体重约 2~2 5kg新西兰白兔(雌雄不限) ,共 4只眼 ,经检查无任何眼病。1 1 2 培养液 DMEM/Ham’sF1 2 =1∶1混合液 (Gibco,USA) ,内含 1 0mmol/LHEPES ,2 0 %胎牛血清 (Gibco,USA) ,1 0 0× 1 0 3U/L青霉素 ...  (本文共3页) 阅读全文>>

权威出处: 《眼科》2000年05期