分享到:

保存兔角膜内皮细胞形态学的研究

为进一步探讨利用干燥、脱水后在4℃冰箱中长期保存角膜移植材料行穿透角膜移植的应用价值,我们除利用这种保存角膜进行部分穿透角膜移植的动物实验外川,还对保存兔角膜的内皮细胞在移植前后进行了超微结构的观察。 材料和方法 为了解保存角膜内皮细胞在移植前后超微结构的特征,我们对保存1~3周或6个月的兔角膜进行检查,同时取正常新鲜角膜作对照,并对2只兔术后植片内皮细胞的超微结构进行了观察。在作电镜检查之前,将保存不同时间的角膜首先复水,使其恢复到正常新鲜角膜的透明度,同新鲜角膜和术后植片一样切成lxZmm小块,放入戌二醛及四氧化饿液中固定。经乙醇、丙酮脱水,用环氧树脂618#包埋,LKB超薄切片,再经醋酸双氧铀及构椽酸铅染色,用JEM2000EXTEM观察。另一部分标本,按上法固定、脱水、乙腊置换,真空干燥。经离子镀膜后,用5520型SEM观察。结果 扫描电镜检查(SEM)正常新鲜角膜内皮细胞,六角形边界清晰,呈镶嵌型排列,细胞间连接紧密(...  (本文共6页) 阅读全文>>

《第三军医大学学报》2007年15期
第三军医大学学报

三种不同方法保存的兔角膜内皮细胞形态学观察

角膜保存是眼库的重要技术之一,分为活性与非活性保存两种,活性保存根据角膜内皮细胞活性的保存时间分为短期、中期和长期3种保存。维持角膜透明的主要细胞是内皮细胞,在本质上角膜移植就是移植相当数量的活性内皮细胞,角膜保存的根本目的也是维持供体角膜内皮细胞的活性[1],因此本实验采用兔角膜进行3种时期的保存,通过观察角膜内皮细胞形态,了解不同保存方法和不同保存时期对兔角膜内皮细胞生物活性的影响。1材料与方法1.1兔角膜片的制备取健康杂种成年家兔9只,体质量2.0~2.5kg,由重庆渝达实验兔场提供,雌雄不拘,分3组每组3只6眼。将兔空气栓塞致死,立即取出眼球,用含800U/ml妥布霉素的生理盐水冲洗并浸洗3次,每次10min,然后沿角膜缘取带2mm巩膜环的角膜片。1.23种不同时期的保存方法1.2.1常规短期湿房保存4℃保存6h。处理好的全眼球置于含800U/ml妥布霉素的生理盐水纱布上,待检测时再取角膜片。1.2.2D-X角膜中期保存...  (本文共2页) 阅读全文>>

《细胞生物学杂志》1992年01期
细胞生物学杂志

传代内皮细胞形态和功能变化的关系

迄今为止,国内外已有不少学者对体外培养的内皮细胞(EC)进行了研究。并已从凝血恤因子,胞浆Weibel一palade小体和染色体数目等方面证明了培养EC在有限的传代次数内保持了内皮细胞的生物学性质[‘一”J。但关于传代它c形态和功能研究的专门报道还尚未见到。本实验发现,传代EC在其生物学性质没有发生根本改变的前提下,也存在着一些形态和功能规律性变化。这些变化对合理选择使用传代EC来进行实验研究有着重要的意义。本文结合传代EC在相差显微镜下的形态学改变及其图象分析研究和蛋白质分泌功能的变化,来探讨传代EC形态和功能变化的关系,旨在为合理选择传代EC来进行实验研究提供参考。 3.测量参数及计算 测量参数Area(面积)和CH(圆形度)。 每次测量,计算机以照片土光标的长度换算为测量参照单位(mm),然后直接用积分法算出细胞投影面积,用细胞周长除以其外切圆周长算出圆形度(见图1),其值在。一1之间,它反映细胞接近国的程度,比值越接近l...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国病理生理杂志》1993年02期
中国病理生理杂志

血小板激活因子对内皮细胞形态参数的影响及其机制

内皮细胞收缩和细胞连接间隙开放是炎症介质引起血管壁通透性增高的主要机制。我们利用以APOLLODN 3500为主机的图像工作站建立了内皮细胞形态参数分析的软件,对血小板激活因子(PAF)引起的内皮细胞面积、形状因子、细胞间距及细胞间空隙面积占细胞单层面积百分比等形态参数变化进行定量分析,并研究了C护+通道拮抗剂和细胞骨架稳定剂对PAF作用的影响。第2代牛肺动脉内皮细胞培养于96孔板形成致密融合单层后加10一“mol/L PAF作用lh,细胞用Hanks液漂洗2次,..考马氏亮蓝染色,倒置显微镜观察,图像输入计算机进行分析处理。异搏停(10“M)、异丙肾上腺素(1。,‘M)、地塞米松(1。一M)分别在PAF处理前半小时加入,对照组不作任何处理。结果...  (本文共1页) 阅读全文>>

《深圳中西医结合杂志》2000年01期
深圳中西医结合杂志

大蒜素对培养人内皮细胞形态及功能的影响

大蒜素又名大蒜新素,化学名为二烯丙基三硫化物,是从大蒜球茎中分离出的一种化合物,其用于防治AS等心血管疾病是临床研究中的新领域现代AS发病机制的“损伤反应学说”认为,血管内皮细胞损伤和功能失调是AS发生的始动环节「门.因此,维持内皮的完整,改善内皮细胞的内分泌及代谢功能能够预防并延缓AS的发生为此,本实验观察了不同浓度大蒜素对培养人内皮细胞形态的影响,并同时检测了培养液中NO、SOD活性、MDA的水平,旨在进一步揭示大蒜素在临床心血管方面的应用价值.l材料与方法1.1药物与试剂大蒜素注射液(含大蒜素15mg/nll)为湖北医科大学附属第二医院制药厂产品,批号981210;MEM培养基和新生小牛血清均为美国GibCO公司产品;N(>、S()D、MDA三试齐IJ盒均由南京建成生物工程研究所提供12人脐静脉内皮细胞(HVEC)的培养「引人脐静脉内皮细胞(ECV—304,ATCCCRL—1998),由中国典型物保藏中心提供,经ATCC鉴...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国病理生理杂志》1992年05期
中国病理生理杂志

血小板激活因子对内皮细胞形态参数影响的计算机定量分析

利用具有大容量、高运算速度和高分辨率的计算机图像分析系统建立了定量分析内皮细胞(EC)面积、形状因子、细胞间距及细胞间空隙面积占细胞单层面积百分比的软件,并分析了血小板激活因子(PAF)对EC形态参数的影响。结果表明,对照组EC相互连接紧密,细胞间隙较窄。PAF作用60分钟,细胞明显回缩,膜表面有很多粗细不等的突起,细胞间隙增大。计算机定量分析表明PAF(10“.mol/L)作用10分钟,就可使细胞间距和细胞间空隙面积占细胞单层面积百分比分别从对照组的16.0士5。44(X士SD,单位是象元数,下同)和7。...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国病理生理杂志》1993年05期
中国病理生理杂志

血小板激活因子对内皮细胞形态参数影响的计算机定量分析

血管壁通透性增高是炎症过程的基本特征,是创伤、休克、感染及多器官劝能衰竭的主要病理变化之一,其机理尚不十分清楚。内皮细胞(e“othelial cells,Ec)受损,血管壁完整性被破坏,可以引起血管壁通透性增高。近年来的研究表明,在许多病理情况下,EC并没有明显损伤表现,而是发生了可逆性的细胞回缩,使细胞间裂隙增大,因此认为细胞回缩是血管壁通透性增高的主要机制‘”。以往的文献对EC形态变化多数只做了定性描述,少数学者行算了细胞面积或长/短径比例,因而不能明确肯定EC的回缩情况‘””。本研究利用以Ap0LLODN35。魂为主机的图像分析系统建立了EC形态参数分析的软件,并对血小板激活因子(P AF)引起的EC形态变化作了定量汾析。 材料和方法 一、牛肺动脉内皮细胞单层的培养和血小板激活因子的作用 新生小牛放血处死后取心肺,按我们以往的方法“,分离培养牛肺动脉EC,第2代细胞培养于96孔板。细胞形成致密融合单层后,加pAFI。一a...  (本文共4页) 阅读全文>>